运用酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原的对比分析

运用酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原的对比分析

杨玥

杨玥

（武警广西边防总队医院广西南宁530022）

【摘要】目的：对比分析运用酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原各自优缺点。方法：选取我院2015年1月1日～2015年9月31日采集的1791份血样标本作为研究对象，分别运用酶联免疫法与胶体金法对这些标本实施了乙肝表面抗原检测，最后将两种检测方法其特点以及检测结果进行回顾性分析。结果：运用酶联免疫法检测结果为呈阳性的血样标本有166份，占总样本数的9.27%。运用胶体金法检测结果为呈阳性的血样标本有159份，占总样本数的8.88%。经统计学分析，对于乙肝表面抗原的检测运用酶联免疫法明显敏感性高于胶体金法。结论：根据两法检测结果，在进行现场初筛的场合建议使用胶体金法；在医疗机构中，应选择敏感度较高的酶联免疫法进行乙肝表面抗原筛选实验。

【关键词】乙肝表面抗原；酶联免疫法；胶体金法；灵敏度

【中图分类号】R392【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）18-0246-02

酶联免疫法与胶体金法都是检测乙肝表面抗原的方法中较经济实惠的常用方法。本文为了对比分析运用酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原各自优缺点，特选取我院2015年1月1日～2015年9月31日采集的术前标本或输血标本1791份作为研究对象，分别运用酶联免疫法与胶体金法对这些标本实施了乙肝表面抗原检测，最后将两种检测方法其特点以及检测结果进行回顾性分析。现将具体分析过程及分析结果报告如下。

1.材料与方法

1.1血样标本来源

本文研究的血样标本是我院2015年1月1日～2015年9月31日采集的1791份术前标本或输血标本，所有血样标本都是采用真空管对其进行采集，且都在当日检测完毕。

1.2仪器与试剂

本次研究所使用的仪器和试剂是桂林优利特URIT-670全自动洗板机、KHBST-360酶标仪、酶联免疫法诊断试剂盒为上海荣盛生物药业有限公司产品、胶体金法诊断试剂盒为EFG生物科技有限公司生产。上述两种仪器均进过严格校准和调试才投入使用，所有试剂也都在有效试用期范围之内。

1.3方法

先分别运用酶联免疫法与胶体金法对1791份血样标本实施乙肝表面抗原检测，最后将两种检测方法其特点以及检测结果进行回顾性分析。

1.3.1酶联免疫法第一步，首先血样标本要经过30min以上的凝集，其次将待检100μl血清加入酶标板微孔中于37℃水浴箱温浴1小时后取出，第二步，将酶结合物加入微孔中并温育30min，洗涤，加入显色剂A、B液各50μl，放置37℃避光孵育20min，加入终止液50μl，混匀；第三步，使用KHBST-360酶标仪对其进行比色，最后依据读取的吸光度值进行相应计算。

1.3.2胶体金法第一步，首先使用加样器吸取血清60ul，其次缓慢地将其滴在试纸条的加样端，最后让血清自动经过滤膜并移动向检测端；第二步，在20±4℃环境温度下放置10min以后观察检测结果。

1.3.3结果判读酶联免疫法：当S/C0<1的时候，则表明该样品检测结果为阴性；当S/C0≥1的时候，则表明该样品检测结果为阳性。[2]

胶体金法：当紫红色的免疫复合物线条仅仅出现在试纸条对照线位置的时候，则表明该样品检测结果为阴性；当紫红色的免疫复合物线条同时出现在试纸条的对照线位置和检测线位置的时候，则表明该样品检测结果为阳性。[3]

1.3.4统计学方法本文主要采用SPSS22.0统计学软件对本文研究所得所有数据予以统计学分析，采用均数±标准差（x-±s）表示计量资料，计数资料采用χ2检验，采用t检验，当P<0.05时候，则视为存在显著差异，具有统计学意义。

2.结果

从上表可以看到，运用酶联免疫法对这1791份血样标本进行检测，检测结果为呈阳性的血样标本有166份，占总样本数的9.27%。运用胶体金法对这1791份血样标本进行检测，检测结果为呈阳性的血样标本有159份，占总样本数的8.88%。运用两种检测方法对1791份血样标本进行检测，结果同为阳性的血样标本有158份。酶联免疫法检测为阴性而胶体金法检测为阳性的血样标本有1份。酶联免疫法检测为阳性而胶体金法检测为阴性的有8份。运用两种检测方法对1791份血样标本进行检测，结果同为阴性的血样标本有1624份。经统计学分析，对于乙肝表面抗原的检测运用酶联免疫法明显灵敏度高于胶体金法，存在显著差异（P<0.01），具有统计学意义。

3.讨论

以前就有文献报道过这两种方法在检测敏感性方面存在着差异[1-2]。从本次检测结果上看，酶联免疫法检测过程繁琐但灵敏度高，胶体金法检测过程快捷简便但灵敏度较低，存在一定的漏检率。在实际工作的操作中，建议在需要对乙肝病毒进行现场初筛的场合使用胶体金快速检测试剂盒，如血站对无偿献血者的初筛及新兵应征入伍时基层卫生院的初筛，这样可以减少不必要的浪费[3]。在医疗机构中建议使用酶联免疫法进行乙肝表面抗原筛选实验。因为有文献报道，在阳性标本的ELISE检测S/C值在10以下时，胶体金试纸条的检测结果与ELISE一致性为0，这说明在阳性人群中有近10%左右的人会被漏检。一种病原体的快速检测试验，应该在确保特异性的前提下，其灵敏性越高越好。因此，在医疗机构中建议直接选择敏感度较高的酶联免疫法进行乙肝表面抗原筛选实验。对某些特殊的血样标本，如溶血标本、脂血标本，有可能会干扰酶联免疫法的检测结果，在有条件的实验室，则建议使用特异性和敏感度更高的化学发光法或实时荧光PCR定量进行检测。

【参考文献】

[1]丁玉庚.降低体检中乙肝表面抗原的漏诊和误诊[J].实用医技杂志，2006,13（21）：3789-3790.

[2]王红.酶联免疫法与胶体金法结合判断HBsAg准确性的探讨[J].右江民族医学院学报，2007,29（5）：743.