食品中甜蜜素气相色谱法测定的研究

食品中甜蜜素气相色谱法测定的研究

文利

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华测检测认证集团股份有限公司广东深圳518101

[J].生物技术世界.2015（02）摘要：甜蜜素是我国食品行业中应用最多的一种甜味剂。采用气相色谱法测定食品中甜蜜素含量，甜蜜素在0.030～1.0mg/mL范围内线性关系良好，相关系数r=0.9999；该方法的检出限为0.003mg/mL，试样加标回收率为96.3%～103.5%，该方法精密度和准确度高，分离度好，可供食品甜蜜素含量测定参考借鉴。

关键词：气相色谱法；甜蜜素；含量测定；环己醇；环己醇亚硝酸酯

引言

甜蜜素的化学名为环己基氨基磺酸钠，其甜度是蔗糖的30倍，而价格是蔗糖的三分之一，且不像糖精那样用量稍多时有苦味，因此作为食品添加剂被广泛应用于凉饮料、果汁、冰激凌、糕点食品及蜜饯等食品中。但由于甜蜜素有致癌、致畸、损害肾功能等副作用，长期食用甜蜜素超标的食品，会对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒的能力较弱的老人、孕妇、小孩危害更明显。因此，我国的《食品添加剂使用标准》对甜蜜素的使用范围及含量做了相关的限定。如何采取准确简便的方法测定食品的甜蜜素含量也成为了许多单位重点关注的问题。对此，笔者改进了目前国内使用最多的气相色谱法，并进行了相关介绍。

1材料与方法

1.1仪器与试剂

450气相色谱仪：布鲁克?道尔顿公司；附氢火焰离子化检测器；Scion气质联用仪：布鲁克?道尔顿公司；TDL-5-A低速台式离心机：上海安亭科学仪器厂；KQ-100超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；XW-80A漩涡混合器：上海琪特分析仪器有限公司；ECH-Ⅱ微机控温加热板：上海新仪微化学科技有限公司。

环己基氨基磺酸钠（甜蜜素）标准品：美国Supelco公司；正己烷（农残级）；氯化钠（分析纯）；硫酸溶液（100g/L）；亚硝酸钠溶液（50g/L）；氢氧化钠溶液（40g/L）。

1.2试验方法

1.2.1标准曲线的制备

（1）标准储备液的配置

用托盘天平称取取1.0000g环己基氨基磺酸钠标准品至100mL容量瓶中，加水溶解，摇匀，定容，配制成10.000mg/mL的标准储备液；

（2）标准工作溶液的配置

将标准储备液再分别稀释成0.03000，0.05000，0.1000，0.2000，0.4000和1.000mg/mL的系列标准工作溶液；

分别吸取1.00mL上述浓度的标准工作溶液至50mL具塞比色管中，加20mL水，置冰浴中，加5mL50g/L亚硝酸钠溶液和5mL100g/L硫酸溶液，置旋涡振荡器上振动1min，在冰浴中放置30min，并且经常振动，准确加入10mL正己烷，5g氯化钠，混匀后振动1min，静置分层后，吸取己烷层进行离心分离，取上层清液备用。

1.2.2样品处理

（1）液体样品

样品混匀后直接称取20g试样液于50mL具塞比色管中，含有二氧化碳的样品经水浴加热除去二氧化碳，含酒精的样品先用氢氧化钠溶液调pH至碱性，再于沸水浴上加热除去酒精，置冰浴中，以下步骤同1.2.1。

（2）固体样品

将固体试样粉碎成粉末状或者匀浆状，称取5g样品至100mL容量瓶中，加70mL水，超声1h，冷却至室温，加水定容，摇匀，4500r/min离心15min，取上清液过滤，弃去初滤液，准确吸取20.0mL滤液至50mL具塞比色管中，置冰浴中，以下步骤同1.2.1。

1.2.3色谱条件

（1）气相色谱条件

色谱柱：GsBP-1石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；气化温度150℃；FID检测器温度200℃；分流比20∶1；柱流速：恒压10psi；升温程序：初始温度50℃，以5℃/min升温至80℃，保持1min，再以20℃/min升温至150℃，保持5min；尾吹（N2）流量29mL/min；氢气流量30mL/min；空气流量300mL/min；进样量1μL。

（2）气质联用条件

色谱柱：GsBP-5ms石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；气化温度：150℃；分流比20∶1；柱流速：1.0mL/min；升温程序：初始温度50℃，以5℃/min升温至80℃，保持1min，再以20℃/min升温至150℃，保持5min；进样量1μL；传输线温度250℃；电离方式：电子轰击电离（EI）；电离能量-70eV；离子源230℃；扫描模式，全扫描方式。

2结果与讨论

2.1甜蜜素衍生物总离子流图及质谱图

甜蜜素在硫酸介质中和亚硝酸钠反应生成环己醇，环己醇在酸性条件下又继续与亚硝酸钠发生酯化反应生成主产物环己醇亚硝酸酯。酯化反应在一定的反应条件下是个动态平衡，因此反应产物中同时存在环己醇亚硝酸酯和环己醇两种物质。将反应后的甜蜜素标准溶液按照上述条件进气质联用仪分析，如图1所示，总离子流图中出现两个峰，峰1保留时间为4.624min，峰2保留时间为5.004min，两个产物峰与杂质峰分离较好。

3结语

综上所述，改进后的食品甜蜜素测定方法具有操作方便、快捷，测定结果准确可靠的特点。相对于国标方法GB/T5009.97—2003第一法气相色谱法在检测过程中随时间的延长而造成准确度低，重复性差和水浴时造成的回收率低的问题，改进后的方法不受时间和温度的影响，回收率高，测定结果准确精密。由此可见，改进后的测定方法适合推广应用于食品中甜蜜素的快速测定中。

参考文献：

[1]王丽君，蒋红进.气相色谱法测定果汁中甜蜜素的定量方法改进[J].中国卫生检验杂志.2015（09）

[2]胡康.气相色谱法检测甜蜜素的误差分析