简介：摘要目的探讨机械通气促进肺成纤维细胞活化及肺纤维化的机制，明确乳酸-转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1, TGF-β1）途径在该过程中的作用。方法①将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组（Sham组）和机械通气组（MV组），每组12只，其中Sham组仅行麻醉插管处理并保持自主呼吸，MV组采用20 ml/kg潮气量和70次/min通气频率行单次2 h机械通气，观察7 d后取材。采用H-E染色、Masson染色观察肺组织的损伤程度和纤维化程度，采用Western blot法检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白α1链（collagen type Ⅰ alpha 1 chain, COL1A1）、α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA）和TGF-β1的蛋白表达情况，采用比色法检测小鼠肺泡灌洗液（bronchial alveolar lavage fluid, BALF）和血清的乳酸浓度。②将人胚肺成纤维细胞MRC-5采用随机数字表法分为4组（每组3个孔）：PBS对照组（Con组）、1 mmol/L乳酸组（Lac1组）、10 mmol/L乳酸组（Lac10组）和20 mmol/L乳酸组（Lac20组），于乳酸刺激MRC-5细胞24 h后采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量，同时采用细胞免疫荧光观察α-SMA的表达情况；于乳酸刺激MRC-5细胞72 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况，并通过ELISA法检测细胞培养上清液Ⅰ型前胶原羧基肽（procollagen type I carboxyl peptide, PICP）的含量变化。③另取MRC-5细胞采用随机数字表法分为3组（每组3个孔）：PBS对照组（Con组）、20 mmol/L乳酸组（Lac20组）和20 mmol/L乳酸+TGF-β1受体抑制剂（SB431542）组（Lac20+SB组），处理24 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况。结果①与Sham组比较，MV组小鼠肺泡间隔增厚、胶原蛋白沉积、肺纤维化程度加重，伴有COL1A1、α-SMA和TGF-β1表达水平升高（P<0.05），血清和BALF乳酸浓度升高（P<0.05）。②与Con组比较，Lac10组和Lac20组细胞培养上清液中TGF-β1、PICP含量升高（P<0.05），细胞中COL1A1和α-SMA表达水平升高（P<0.05），免疫荧光观察到α-SMA在细胞内表达增多（P>0.05）。③与Lac20组比较，Lac20+SB组细胞COL1A1和α-SMA表达水平降低（P<0.05）。结论机械通气可以通过乳酸-TGF-β1途径活化肺成纤维细胞，引起胶原蛋白分泌，促进机械通气相关性肺纤维化进程。

简介：摘要目的探讨成人真皮成纤维细胞(HDF-a)中转化生长因子β1(TGF-β1)对Meox1的转录调控机制及细胞迁移功能的影响。方法(1)取HDF-a系细胞，用RPMI 1640完全培养基培养(下称常规培养)，将细胞分为TGF-β1刺激组和空白对照组。TGF-β1刺激组细胞加入10 μL质量浓度为1 mg/μL的TGF-β1刺激，空白对照组加入等量磷酸盐缓冲液。培养72 h，取2组部分细胞进行转录组测序，筛选出2组差异表达比值≥2且P<0.01的基因，对差异基因进行功能富集分析与京都基因和基因组百科全书代谢途径分析，记录Meox1每百万转录本(TPM)表达值，样本数为3；取2组部分细胞，采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法检测Meox1 mRNA表达，样本数为3。(2)取对数生长期HDF-a系细胞(细胞生长期下同)常规培养，分为空质粒组和Smad2过表达组、Smad3过表达组、Smad4过表达组，分别转染2 μg pcDNA3.1空质粒和各自搭载Smad2、Smad3、Smad4的pcDNA3.1质粒，转染6 h后常规培养48 h，实时荧光定量RT-PCR法检测各组细胞中Meox1 mRNA的表达，样本数为3。(3)取HDF-a系细胞常规培养，同实验(1)分组处理，常规培养72 h，采用染色质免疫共沉淀-定量PCR(ChIP-qPCR)法检测2组细胞中Smad2、Smad3和Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度，样本数为3。(4)取HDF-a系细胞常规培养，分为阴性干扰组、小干扰RNA(siRNA)-Smad2组、siRNA-Smad3组、siRNA-Smad4组和空质粒组、Smad2过表达组、Smad3过表达组、Smad4过表达组，分别转染50 μmol/L随机siRNA、siRNA-Smad2、siRNA-Smad3、siRNA-Smad4和2 μg pcDNA3.1空质粒及各自搭载Smad2、Smad3、Smad4的pcDNA3.1质粒，转染6 h后常规培养48 h，ChIP-qPCR法检测相应组别细胞中Smad2、Smad3和Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度，样本数为3。(5)取2个批次HDF-a系细胞常规培养，均分为阴性干扰组、siRNA-Meox1组、空质粒组、Meox1过表达组，分别转染50 μmol/L随机siRNA、siRNA-Meox1和2 μg pcDNA3.1空质粒、搭载Meox1的pcDNA3.1质粒，转染6 h后常规培养24 h，1个批次细胞进行划痕实验，划痕后24 h观察划痕宽度，与划痕后即刻对比划痕愈合宽度；1个批次细胞进行Transwell实验，常规培养24 h，计数迁移细胞，样本数为3。(6)2018年1月—2019年6月，陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院收治3例烧伤后8～12个月增生性瘢痕患者(男2例、女1例，年龄35～56岁)，取其术中切除的瘢痕组织和瘢痕边缘附带正常皮肤组织，行免疫组织化学染色，观察Meox1蛋白表达分布。对数据行单因素方差分析、独立样本t检验。结果(1)培养72 h，2组细胞差异表达明显的基因共843个，涉及组织修复、细胞迁移、炎性细胞趋化诱导过程等功能以及肿瘤坏死因子、白细胞介素17、细胞外基质受体等潜在的信号通路；空白对照组细胞测序结果的Meox1 TPM表达值为45.9±1.9，显著低于TGF-β1刺激组的163.1±29.5(t＝6.88，P<0.01)。培养72 h，空白对照组细胞Meox1 mRNA表达量为1.00±0.21，显著低于TGF-β1刺激组的11.00±3.61(t＝4.79，P<0.01)。(2)培养48 h，Smad2过表达组、Smad3过表达组和Smad4过表达组细胞中Meox1 mRNA表达量分别为198.70±11.02、35.47±4.30、20.27±2.50，均显著高于空质粒组的1.03±0.19(t＝31.07、13.80、13.12，P<0.01)。(3)培养72 h，TGF-β1刺激组细胞中Smad2、Smad3和Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度均显著高于空白对照组(t＝12.99、41.47、29.10，P<0.01)。(4)培养48 h，阴性干扰组细胞中Smad2蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.200 000±0.030 000)%，显著高于siRNA-Smad2组的(0.000 770±0.000 013)%(t＝11.67，P<0.01)；空质粒组细胞中Smad2蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.200 000±0.040 000)%，显著低于Smad2过表达组的(0.700 000±0.090 000)%(t＝8.85，P<0.01)。阴性干扰组细胞中Smad3蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.500 0±0.041 3)%，显著高于siRNA-Smad3组的(0.006 0±0.001 3)%(t＝17.79，P<0.01)；空质粒组细胞中Smad3蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.470 0±0.080 0)%，显著低于Smad3过表达组的(1.100 0±0.070 0)%(t＝9.93，P<0.01)。阴性干扰组细胞中Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度与siRNA-Smad4组相近(t＝2.11，P>0.05)，空质粒组细胞中Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度与Smad4过表达组相近(t＝0.60，P>0.05)。(5)划痕后24 h，siRNA-Meox1组细胞划痕愈合宽度较阴性干扰组窄，Meox1过表达组细胞划痕愈合宽度较空质粒组宽。培养24 h，阴性干扰组迁移细胞数显著多于siRNA-Meox1组(t＝9.12，P<0.01)，空质粒组迁移细胞数显著少于Meox1过表达组(t＝8.99，P<0.01)。(6)烧伤后增生性瘢痕患者瘢痕组织中Meox1蛋白表达明显高于正常皮肤组织。结论在HDF-a系细胞中，TGF-β1通过Smad2/3转录调控Meox1表达，进而促进细胞迁移。

简介：目的：观察人胚胎成纤维细胞（FBs）对糖尿病足FBs生物学特性的影响，探讨其促进糖尿病溃疡愈合的机制。方法分离培养糖尿病创面FBs10例，分别与孕中期人胚胎皮肤FBs3例（实验组）、正常人皮肤FBs5例（对照组1）于transwell小室培养体系中间接共培养，并设立空白对照（对照组2）。绘制共培养体系中糖尿病足FBs生长曲线；观察共培养7d后糖尿病足FBs形态；共培养至第4、7d后，将各组糖尿病足FBs分离培养2d，测量和对比上清液中羟脯氨酸和TGF-β1含量；检测共培养第3、5、7d，β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色阳性细胞百分率。胚胎FBs制作三维培养应用于8例糖尿病足溃疡，比较治疗前后创面愈合时间，做自身前后对照研究。结果实验组糖尿病足FBs比2个对照组增殖活跃，形态更接近于正常。经胚胎FBs处理4、7d，糖尿病足FBs培养上清液中羟脯氨酸、TGF-β1明显增高，相对2个对照组差异均有统计学意义（羟脯氨酸4、7d：与对照组1相比P＝0.023、P＝0.007；与对照组2相比P＝0.007、P＝0.003；TGF-β14、7d：与对照组1相比P＝0.000、P＝0.000；与对照组2相比P＝0.000、P＝0.000）。实验组糖尿病足FBs的SA-β-gal染色阳性率在共培养第3、5及7d无明显变化，2个对照组则明显增高。8例临床糖尿病足溃疡应用胚胎FBs三维培养治疗后创面均愈合。结论胚胎FBs能显著促进糖尿病足FBs增殖，延缓老化表型出现，同时上调羟脯氨酸、TGF-β1的分泌，可能与促进创面愈合机制有关。

简介：摘要目的基于转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFbs)作用的机制。方法人增生性瘢痕组织标本来自新疆医科大学第一附属医院2019年3月至6月收治的9例需要手术的增生性瘢痕患者，采用组织块培养法分离后传代培养人增生性瘢痕成纤维细胞，随机分为空白组、模型组(TGF-β1)、阳性对照组(TGF-β1＋5-氟尿嘧啶)、实验组(TGF-β1＋CPhGs)，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同浓度CPhGs对HSFbs增殖的影响；实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组中Smad2、Smad3、Smad7、Ⅰ型胶原(COL-1)和Ⅲ型胶原(COL-3)的mRNA的表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测各组中Smad2、Smad3、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad7、COL-1和COL-3蛋白的表达，多组间比较采用单因素方差分析。结果60、90、120 mg/L CPhGs作用于成纤维细胞48 h后抑制率为[(36.87±0.06比43.52±0.04比78.11±0.03)%，F＝45.073，P<0.01]，CPhGs对细胞的抑制作用随干预时间的延长和药物浓度的增加而增强；RT-qPCR结果显示，实验组和阳性对照组COL-1、COL-3、Smad2、Smad3 mRNA表达低于模型组，Smad7 mRNA表达明显高于模型组，差异有统计学意义(0.21±0.04比0.3±0.25比1.56±0.01，F＝39.755，P<0.01)、(0.55±0.04比0.27±0.04比1.66±0.22，F＝61.997，P<0.01)、(0.55±0.03比0.78±0.76比1.06±0.15，F＝17.769，P<0.01)、(0.46±0.08比0.55±0.10比2.05±0.29，F＝56.796，P<0.01)、(1.77±0.59比0.11±0.02比0.04±0.04，F＝14.780，P<0.05)；Western blot结果显示：实验组和阳性对照组p-Smad2、p-Smad3、COL-1、COL-3蛋白表达低于模型组，Smad7蛋白表达明显高于模型组(0.16±0.03比0.11±0.02比0.06±0.00)、(0.12±0.02比0.07±0.01比0.04±0.01，F＝7.670，P<0.05)、(0.27±0.02比0.08±0.01比0.05±0.04，F＝34.291，P<0.01)、(0.33±0.02比0.16±0.02比0.17±0.01，F＝16.322，P<0.01)、(0.12±0.03比0.15±0.06比0.23±0.05，F＝3.936，P<0.05)，组间比较差异有统计学意义。结论CPhGs的可通过阻断TGF-β/Smad信号通路进而抑制HSFbs活化和增殖。

简介：摘要目的探讨hsa-miR-199a-5p对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)纤维化过程的影响及其与转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路的关系。方法将携带hsa-miR-199a-5p基因的慢病毒载体(hsa-miR-199a-5p组)及空白慢病毒载体(rLv-NC组)感染KFs，并设空白对照组(KFs正常培养)。采用CCK-8法检测各组KFs的增殖情况。慢病毒感染KFs 48 h后，应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组KFs的hsa-miR-199a-5p表达水平，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，Transwell实验检测细胞侵袭能力，并分别采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad3及TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平。结果病毒感染KFs 48 h后，hsa-miR-199a-5p组的hsa-miR-199a-5p表达量明显高于rLv-NC组和空白对照组，差异有统计学意义(P<0.01)；与rLv-NC组和空白对照组相比，hsa-miR-199a-5p组的细胞增殖率、侵袭性均有所降低，细胞凋亡率有所升高，差异有统计学意义(P<0.01)；hsa-miR-199a-5p组的Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA、Smad3、TGF-β1的mRNA及蛋白表达水平均明显低于rLv-NC组和空白对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。结论hsa-miR-199a-5p可能通过抑制TGF-β/Smad通路的表达，抑制KFs增殖与侵袭，并促进KFs凋亡，从而抑制瘢痕疙瘩纤维化。

简介：摘要目的观察2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)患者血清中成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor-21，FGF-21)的表达及与非酒精性脂肪性肝纤维化评分(NAFLD fibrosis score，NFS)的关系。方法采用横断面研究，选取2018年12月至2020年1月就诊于沧州市人民医院的T2DM患者422例，根据腹部彩超诊断NAFLD，分为T2DM组121例，T2DM合并NAFLD组301例。酶联免疫吸附法检测患者血清FGF-21浓度。根据年龄调整NAFLD纤维化评分评估肝纤维化风险，将T2DM合并NAFLD患者分为除外进展性肝纤维化组(non NAFLD fibrosis，NNF)125例、可疑进展性肝纤维化组(suspected NAFLD fibrosis，SNF)136例、确定进展性肝纤维化组(definited NAFLD fibrosis，DNF)40例。计量资料多组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis H检验；计数资料组间比较采用χ2检验。Pearson法分析比较各组生化指标相关性。Logistic回归分析肝纤维化影响因素。结果(1)与T2DM组比较，T2DM合并NAFLD组FGF-21浓度升高(P<0.05)，差异有统计学意义。NNF、SNF、DNF组血清FGF-21浓度比较差异有统计学意义[(297.03±52.71) ng/L、(321.52±69.42) ng/L、(274.08±30.82) ng/L；F＝12.03，P<0.001]；且SNF组血清FGF-21浓度高于NNF组和DNF组，DNF组低于NNF组(P均<0.05)。(2)Pearson相关分析显示NFS与FGF-21呈负相关(r＝-0.162，P<0.01)。(3)Logistic回归分析显示，独立影响T2DM患者发生NAFLD的危险因素是FGF-21浓度代偿性升高(OR＝1.139，95%CI为1.023～1.380，P<0.001)；独立影响T2DM合并NAFLD患者肝纤维化的因素是FGF-21浓度进行性下降(OR＝0.89，95%CI为0.83～0.98，P＝0.012)。结论血清FGF-21浓度与T2DM合并非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化评分呈倒U型关系。非酒精性脂肪性肝病早期FGF-21代偿性升高；随肝纤维化进展，FGF-21相对进行性分泌不足。提示FGF-21可能作为T2DM合并非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化干预新靶点。

简介：无

简介：人类肿瘤的90％来源于上皮组织，上皮细胞需要在生长信号的不断作用下避免分化和凋亡，获得无限复制的潜能，并依靠新生血管生成、获得侵袭、转移能力才能最终形成肿瘤。整个过程依赖于肿瘤细胞与宿主间质微环境的相互作用，遗传学和细胞生物学研究表明，间质细胞可以提供肿瘤细胞生长、增殖信号，并参与新生血管生成，

简介：目的探讨对鼓膜创伤性穿孔患者行碱性成纤维生长因子（BFGF）治疗的临床效果。方法择取我院2016年2月~2017年2月所收治的68例鼓膜创伤性穿孔患者进行分组研究，根据治疗手段不同分为BFGF组和参照组，每组分别为34例患者。BFGF组行碱性成纤维细胞生长因子治疗，参照组行诺氟沙星滴耳液进行治疗，观察并比较两组治疗效果以及平均愈合时间。结果BFGF组的治疗有效率33例（97.06%）明显高于参照组20例（58.82%），BFGF组的平均治愈时间（9.7±1.8）d明显低于单一组（22.4±5.3）d，P＜0.05为差异具有统计学意义。结论对创伤性鼓膜穿孔患者行碱性成纤维生长因子治疗，不仅能够缩短治愈时间，同时，还能够提高整体治疗效果。

简介：目的：探讨以鼠胚成纤维细胞为饲养层分离、培养鸡胚胎生殖细胞的方法和条件。方法：分离、培养12.5～13.5d鼠胚成纤维细胞。分离孵化5.5d鸡胚原始生殖细胞，原代培养时不使用饲养层，与性腺基质细胞共培养；继代培养时将其置于鼠胚成纤维细胞饲养层上，在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞。结果：鼠胚成纤维细胞可连续传代18代以上（4个月），3～15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的鸡胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落，并能连续在体外培养超过9代。集落未分化标志高碘酸希夫反应（PAS）呈强阳性，体外分化实验表明胚胎生殖细胞具有多能性。结论：用鼠胚成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。

简介：目的寻找调控心脏成纤维细胞增殖的microRNA。方法微矩阵分析比较正常培养和经TGFβ诱导的人成年心脏成纤维细胞microRNA表达谱,发现受TGFβ调控的microRNA。RealtimePCR验证microRNA的表达改变。通过转染模拟物或antagomir,高表达或敲低miR-143表达,MTT实验观察对心脏成纤维细胞增殖的影响。结果TGFβ诱导心脏成纤维细胞中多个microRNA表达失调。MiR-143表达被TGFβ特异性诱导上调,但不受AngII、CTGF和TNFα的影响。高表达miR-143能够促进心脏成纤维细胞增殖10%左右,而敲低miR-143则显著抑制心脏成纤维细胞增殖。结论MiR-143在心脏成纤维细胞中受TGFβ信号通路调控,是心脏成纤维细胞增殖的调控因子。

简介：AIM:ToinvestigatethesideeffectsofthecommonlyusedlasertreatmentalongwithtestingtheneuroprotectiveeffectofbFGFonapotentialretinalimpairment.METHODS:Todothis,30chinchillapigmentedadultmalerabbitsweredividedintothecontrolandexperimentalgroups.ThecontrolandexperimentalgroupsunderwentbothlaserapplicationandbFGFtreatment.Theretinaltissueimpairmentanditsrenewalrateweretestedunderthelightandelectronmicroscopicallevels.RESULTS:Thefocallaserapplicationonrabbiteyescausedmorphologicalalterationsbothintheapplicationregionandintheneighbouringareas.Inthedamagedareas,theouternuclearlayeroftheneuralretinawasalmostdisappeared,retinapigmentepitheliumwasinterrupted,theretinapigmentepitheliummigratedintraretinally,andthedamagedregionalongwithneighbouringareasseemedtobenotseparated.bFGFapplicationjustafterthelaserphotocoagulation,revealedbetterresultsinapplicationareas.CONCLUSION:ItcouldbesuggestedthatthebFGFapplicationfollowinglaserphotocoagulationmighthaveprotective,repairingandwoundhealingeffectsontheretina.

简介：目的研究促炎性细胞因子TNF-α是否具有诱导人胚肺成纤维细胞发生早衰的作用。方法TNF-α连续刺激体外培养的人胚肺成纤维细胞2周，然后进行衰老相关β半乳糖苷酶染色实验，检测细胞衰老情况。结果本研究以TNF-α作为刺激物处理人胚肺成纤维细胞，发现TNF-α可诱导细胞早衰，并建立了细胞早衰模型。结论TNF-α具有明显的诱导人胚肺成纤维细胞衰老的作用。

简介：心脏成纤维细胞作为一种间充质细胞,调控着生理和病理状态下心肌细胞生物学和电生理活动,并在心肌梗死时通过替代已破坏的心肌细胞来保持心肌结构的完整性。近年来,运用转录因子、microRNAs将心脏成纤维细胞直接重编程为心肌样细胞的相关研究取得了一系列进展。本文总结了近年心脏直接重编程体外和体内相关实验研究,并分析这一技术在修复坏死心肌和改善心功能方面的临床应用前景。

简介：

简介：摘要目的探究瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)中是否存在Warburg效应，及增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)、萎缩性瘢痕成纤维细胞(ASFs)是否存在类似现象。方法瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、萎缩性瘢痕及正常皮肤标本，均来源于中国医学科学院整形外科医院患者手术后废弃组织，每种标本各来源于8例患者。分离培养KFs、HSFs、ASFs及正常皮肤成纤维细胞(NFs)，检测各组细胞葡萄糖消耗量与乳酸产生量；以qPCR检测各组细胞糖酵解关键酶mRNA的相对表达量；利用2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)抑制KFs与NFs中糖酵解，对比2种细胞增殖活性的变化。结果KFs组的葡萄糖消耗量及乳酸产生量较NFs组分别增高达45.5%、38.1% (P<0.01)；而HSFs组、ASFs组与NFs组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。KFs组己糖激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶mRNA的相对表达量分别为NFs组的4.7、2.7、1.8倍(P<0.05)；而HSFs组、ASFs组与NFs组相比，差异均无统计学意义(P>0.05)。2-DG作用下，KFs组与NFs组细胞增殖活性分别降低37.5%、27.0%，糖酵解抑制剂对KFs增殖活性的抑制作用显著高于NFs组(P<0.05)。结论KFs中存在Warburg效应，而HSFs及ASFs中无类似现象。

简介：目的初步探讨低氧环境诱导人牙周膜成纤维细胞（PDLCs）凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响。方法体外正常氧（20%O2）或低氧（1%O2）状态下培养PDLCs,光学显微镜观察比较低氧诱导前后PDLCs形态学变化;台盼蓝染色实验检测PDLCs细胞死亡率的差异;凋亡实验比较各组PDLCs凋亡水平的变化。Western免疫印迹检测低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、p53、Caspase-3、Bcl-2与Bcl-xL蛋白的表达水平。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果随着低氧处理时间延长,人PDLCs细胞数量减少,体积逐渐变小,细胞胞质浓缩。台盼蓝染色实验与凋亡实验均证实低氧处理48h后PDLCs死亡率（t=3.855,P=0.018）与凋亡率（t=6.621,P=0.003）显著增高。Western免疫印迹结果显示PDLCs中HIF-1α、p53、Caspase-3蛋白随着低氧刺激时间延长逐渐升高,Bcl-2与Bcl-xL蛋白逐渐降低。结论低氧能促进PDLCs形态变化、凋亡及凋亡相关蛋白的表达。

简介：肿瘤相关成纤维细胞（TAF）对肿瘤发生、生长、血管形成、浸润与转移有重要作用。TAF细胞通过产生旁分泌因子，影响上皮细胞转化，在肿瘤——宿主界面微环境形成中发挥重要作用。本文对TAF细胞的起源，TAF细胞形态及生物学特征及TAF细胞调节信号通路与肿瘤细胞的相互作用的研究现状作一综述。

简介：摘要目的通过对比一次性持续张力紧线术与分次紧线术术后不同时间点创面肉芽组织中面肉芽组织中碱性成纤维生长因子（b-FGF）含量、血管内皮生长因子（VEGF）含量及创面愈合时间等研究，寻找一次性持续张力紧线术式愈合时间短于分次紧线术式的理论基础。方法采用随机对照的临床试验设计方案，60名受试者分为持续张力紧线组和分次紧线组。以两组患者术后创面不同时间点碱性成纤维生长因子（b-FGF）含量、血管内皮生长因子（VEGF）含量及创面愈合时间作为观察指标。结果两组不同时间点的碱性成纤维生长因子（b-FGF）含量、血管内皮生长因子（VEGF）含量及创面愈合时间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论持续张力紧线组比分次紧线组治疗高位肛瘘创面愈合快，与其通过显著增加创面b-FGF水平,从而促进创面胶原的合成和上皮的生长，增加VEGF合成和释放，促进创面血管形成以修复创面有关，为今后一次性持续张力紧线术临床治疗提供一定的理论基础。

简介：目的建立东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为全面研究东方田鼠抗日本血吸虫机制以及开展不同动物成纤维细胞间比较研究奠定基础和提供细胞实验材料。方法运用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入第3代东方田鼠胚胎成纤维细胞,经G418筛选抗性克隆并扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测细胞株中SV40T基因的整合,RT-PCR鉴定SV40T基因在转染细胞中的表达;绘制东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞生长曲线。结果阳性细胞克隆已扩大培养并稳定传代50代,经鉴定SV40T抗原已整合到东方田鼠胚胎成纤维细胞中且稳定表达。结论成功建立东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞系。