简介:摘要脓毒症是机体对感染的反应失调导致的危及生命的器官功能障碍,是重症监护病房(ICU)患者的主要死亡原因之一。凝血功能障碍贯穿于脓毒症的病理生理过程,其严重程度与脓毒症预后密切相关。中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是一种以DNA为骨架、镶有多种蛋白质组分的三维网状结构,其过度产生可激活凝血系统,抑制抗凝系统,抵抗纤维蛋白溶解作用,损伤血管内皮细胞,并通过与血小板的相互作用导致脓毒症相关性凝血功能障碍(SIC)发生。目前,有关SIC的治疗主要为对症治疗,尚无公认有效的抗凝策略。针对NETs及其组分的干预和抗血小板药物有望成为疾病治疗新的研究方向。
简介:摘要目的探讨外源性左旋肉碱对过度内质网应激介导的严重烫伤大鼠肝细胞焦亡的影响及其分子机制。方法采用实验研究方法。将15只6~8周龄雌性SD大鼠按随机数字表法(分组方法下同)分为假伤组、单纯烫伤组、烫伤+肉碱组,每组5只,单纯烫伤组和烫伤+肉碱组大鼠背部制作30%体表总面积的Ⅲ度烫伤,其中烫伤+肉碱组大鼠另外给予腹腔注射左旋肉碱。伤后72 h,采用全自动生化仪检测肝损伤生物化学指标天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)水平,样本数为5。伤后72 h,采用苏木精-伊红染色观察肝组织损伤情况。伤后72 h,采用实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)法检测肝组织中细胞焦亡相关标志物核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、消皮素D和白细胞介素1β(IL-1β)以及内质网应激相关标志物葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的mRNA水平;采用蛋白质印迹法检测肝组织中GRP78、CHOP、NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平,样本数均为5。取人肝癌细胞HepG2,分为二甲基亚砜(DMSO)组、0.1 μmol/L衣霉素组、0.2 μmol/L衣霉素组、0.4 μmol/L衣霉素组、0.8 μmol/L衣霉素组,分别作相应处理。培养24 h后,采用细胞计数试剂盒8法检测细胞活力并筛选衣霉素干预浓度(样本数为5)。取HepG2人肝癌细胞,分为DMSO组、单纯衣霉素组和衣霉素+肉碱组,分别作相应处理。培养24 h后,采用蛋白质印迹法检测细胞中GRP78、CHOP、NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平,样本数均为3。对数据行单因素方差分析和LSD-t检验。结果伤后72 h,单纯烫伤组大鼠血清中AST和ALT水平分别为(640±22)、(157±8)U/L,均分别明显高于假伤组的(106±13)、(42±6)U/L(t值分别为-46.78、-25.98,P<0.01);烫伤+肉碱组大鼠血清中AST和ALT水平分别为(519±50)、(121±10)U/L,均明显低于单纯烫伤组(t值分别为4.93、6.06,P<0.01)。伤后72 h,假伤组大鼠肝组织形态基本正常,未见明显的炎症细胞浸润;与假伤组相比,单纯烫伤组大鼠肝组织可见大量的炎症细胞浸润,细胞排列紊乱;与单纯烫伤组相比,烫伤+肉碱组大鼠肝组织可见少量的炎症细胞浸润。伤后72 h,单纯烫伤组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、消皮素D和IL-1β mRNA表达水平均明显高于假伤组(t值分别为34.42、41.93、30.17、15.68,P<0.01);烫伤+肉碱组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、消皮素D和IL-1β mRNA表达水平均明显低于单纯烫伤组(t值分别为34.40、37.20、19.95、7.88,P<0.01)。伤后72 h,与假伤组相比,单纯烫伤组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平均明显升高(t值分别为12.28、26.92、5.20、10.02、24.78,P<0.01);与单纯烫伤组相比,烫伤+肉碱组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平均明显下降(t值分别为10.99、27.96、12.69、8.96、12.27,P<0.01)。伤后72 h,单纯烫伤组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的mRNA水平均明显高于假伤组(t值分别为21.00、16.52,P<0.01),烫伤+肉碱组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的mRNA水平均明显低于单纯烫伤组(t值分别为8.92、8.21,P<0.01);单纯烫伤组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显高于假伤组(t值分别为22.50、14.29,P<0.01),烫伤+肉碱组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显低于单纯烫伤组(t值分别为14.29、5.33,P<0.01)。培养24 h后,与DMSO组相比,0.1 μmol/L衣霉素组、0.2 μmol/L衣霉素组、0.4 μmol/L衣霉素组、0.8 μmol/L衣霉素组细胞存活率均明显下降(t值分别为4.90、9.35、18.64、25.09,P<0.01);选择0.8 μmol/L作为后续衣霉素的干预浓度。培养24 h后,与DMSO组相比,单纯衣霉素组细胞GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显升高(t值分别为10.48、17.67,P<0.01);与单纯衣霉素组相比,衣霉素+肉碱组细胞GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显下降(t值分别为8.08、13.23,P<0.05或P<0.01)。培养24 h后,与DMSO组相比,单纯衣霉素组细胞NLRP3、消皮素D-N蛋白表达水平均明显升高(t值分别为13.44、27.51,P<0.01),caspase-1、caspase-1/p20、剪切型IL-1β蛋白表达水平均无明显变化(P>0.05);与单纯衣霉素组相比,衣霉素+肉碱组细胞NLRP3、消皮素D-N蛋白表达水平均明显下降(t值分别为20.49、21.95,P<0.01),caspase-1、caspase-1/p20、剪切型IL-1β蛋白表达水平均无明显变化(P>0.05)。结论在严重烫伤大鼠中,外源性左旋肉碱可能通过抑制过度内质网应激介导的细胞焦亡相关通路发挥对肝损伤的保护作用。
简介:摘要目的探讨内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α(eIF2α)通路在草酸钙诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用机制。方法将人肾小管上皮细胞(HK-2)分为对照组、草酸钙组和草酸钙+4-苯基丁酸组。草酸钙组和草酸钙+4-苯基丁酸组在培养基中加入终浓度为5 mmol/L的草酸钙诱导细胞损伤模型,草酸钙+4-苯基丁酸组在培养基中另加入终浓度为2 mmol/L的4-苯基丁酸。通过CCK-8法、流式细胞术和DCFH-DA荧光探针检测细胞活力、凋亡和细胞内活性氧(ROS)水平,并分析细胞内PERK/eIF2α通路中蛋白以及Caspase12和Caspase3表达水平。结果草酸钙组的OD值(0.42±0.05)低于对照组(0.71±0.08),草酸钙+4-苯基丁酸组的OD值(0.65±0.07)高于草酸钙组(均P<0.05)。草酸钙组的细胞凋亡率、ROS水平、PERK和eIF2α蛋白水平、Caspase12、Caspase3 mRNA和蛋白水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。草酸钙+4-苯基丁酸组的细胞凋亡率、ROS水平、PERK和eIF2α蛋白水平、Caspase12、Caspase3的mRNA和蛋白水平低于草酸钙组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在草酸钙诱导的肾小管上皮细胞损伤中使用4-苯基丁酸抑制内质网应激可抑制PERK/eIF2α通路并缓解细胞凋亡。
简介:摘要目的探讨脓毒症大鼠肺组织来源的胞外囊泡对脓毒症肺内炎症反应及中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)形成的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)建立脓毒症大鼠模型,利用Collagenase D和DNase I充分酶解消化肺组织,多次离心去除杂质,最后通过差速超速离心法提取肺组织胞外囊泡(Ti-EVs)。将18只雄性SD大鼠随机分为3组:Ti-EVs组行CLP术并经气道滴入Ti-EVs混悬液(2.5 mg/kg);CLP组行CLP术并经气道滴入等体积PBS;Sham组行假手术。24 h后利用苏木精-伊红(HE)染色检测肺组织病理学变化,酶联免疫吸附实验检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中IL-1β、TNF-α及IL-6的表达水平,免疫荧光法检测肺组织内NETs含量。结果分离提取的大鼠肺组织胞外囊泡经透射电镜观察为双层圆形的囊性小泡结构,粒子直径主要分布在150 nm,Western blot显示EVs标志物CD9、CD63、Tsg101呈阳性表达。肺组织HE染色可见脓毒症大鼠肺泡完整性破坏,炎症细胞浸润。与CLP组相比,Ti-EVs组肺组织损伤程度更重,且BALF中IL-1β、TNF-α、IL-6炎症因子表达水平均显著升高(P<0.01);激光共聚焦显微镜下见脓毒症组和Ti-EVs组肺内均有NETs形成,Ti-EVs组肺内NETs荧光强度较脓毒症组明显增加。结论通过酶解消化、差速超速离心等系列步骤能够成功分离提取得到纯度较高的大鼠肺组织胞外囊泡。在脓毒症肺损伤进程中,肺组织胞外囊泡可加重肺内炎症反应,促进NETs形成。
简介:摘要:目的 研究脑出血小鼠IRAK2-Smurf1表达与内质网应激对脑出血炎症损伤的调节作用。方法 成年雄性小鼠随机分组,进行脑出血造模,检测血肿周围组织IRAK2-Smurf1的表达,巨噬细胞内质网应激程度,评价神经功能缺损评分,检测血肿周围脑组织病理改变、细胞炎症水平。 结果 脑出血组的血肿周围组织IRAK2表达增加,Smurf1表达减少,巨噬细胞内质网应激程度增加,细胞炎症水平增加,脑出血小鼠神经功能缺损加重。结论 IRAK2通过抑制Smurf的表达,增加内质网应激诱发的脑出血小鼠的细胞炎症水平和神经功能损伤。
简介:摘要:医院现代化与医院信息化之间的有着不可分割的、千丝万缕的联系。医院内的信息系统支撑着医院各项工作的运行,同时也对医院的现代化建设起着不可忽视的推动作用。以人为本、全面可持续发展的原则在医院现代化信息基础建设中发挥着重要作用。在医院的现代化建设中要注重对专业人才队伍的培养,提高医院全体工作人员的综合素质。
简介:摘要目的评价Somnolyzer系统在多导睡眠图(PSG)自动评分中的临床应用价值。方法本研究为诊断实验研究。采用非随机抽样的方法选取2017年3月至2019年10月在中日友好医院睡眠诊疗中心行整夜PSG监测的患者138例。分别由2名睡眠技师进行人工判读(M1、M2),Somnolyzer分析系统自动判读(S)及同样2名睡眠技师分别对自动评分进行编辑修正,获得人机协作的判读分析(SM1、SM2)。应用同类相关系数(ICC)评价各判读评分方法的一致性。睡眠分期和呼吸事件的判读依据2007年美国睡眠医学学会标准。结果5种方法对睡眠结构和呼吸事件判读一致性良好,其中睡眠结构相关指标的平均ICC及95%CI分别为:N1% 0.973(0.965~0.979);N2% 0.898(0.869~0.923);N3% 0.951(0.937~0.963);R% 0.964(0.954~0.973);总睡眠时间0.991(0.988~0.993);睡眠潜伏期0.933(0.913~0.949);睡眠效率0.972(0.964~0.979);觉醒指数0.991(0.989~0.994)。呼吸事件各指标的平均ICC及95%CI分别为:阻塞性呼吸暂停指数0.989(0.986~0.992);中枢性呼吸暂停指数0.994(0.992~0.995);混合型呼吸暂停指数0.998(0.997~0.998);低通气指数0.988(0.984~0.991);呼吸暂停低通气指数0.992(0.990~0.994);氧减指数0.999(0.998~0.999);最大氧减持续时间0.913(0.888~0.934);呼吸努力相关微觉醒指数0.964(0.953~0.972)。结论Somnolyzer自动评分系统对睡眠结构参数和呼吸事件的判读结果与人工评分判读无显著差异,二者一致性良好。鉴于人工评分相关的负担,自动评分系统在PSG评分的具有补充应用价值。
简介:【摘要】目的:观察分析自动痔疮套扎术治疗Ⅲ、Ⅳ期混合痔的疗效。方法:选取我院于2019年8月至2021年8月所收治的共计60例Ⅲ、Ⅳ期混合痔患者作为本次研究的样本对象,通过电脑随机的方式将这入选的60例患者随机均分为30例采用外剥内扎术治疗的对照组患者,以及30例采用自动痔疮套扎术治疗的观察组患者。对比分析两组患者的治疗有效率以及并发症发生率。结果:应用自动痔疮套扎术治疗的观察组患者的治疗有效率明显更高于采用外剥内扎术治疗的对照组患者,两组的比较差异具备统计学意义(P<0.05);且应用自动痔疮套扎术治疗的观察组患者的并发症发生率显著更低于采用外剥内扎术治疗的对照组患者,两组的比较差异具备统计学意义(P<0.05)。结论:对于Ⅲ、Ⅳ期混合痔的患者采用自动痔疮套扎术治疗的疗效确切,能大幅度提升治疗有效率,且患者的术后并发症少,安全性有所保障,值得推广应用。
简介:摘要:目的:对全自动洗胃机在中毒急诊患者洗胃中的使用效果展开分析与研究。方法:本文择取本院2021年4月-2022年4月收治的全面中毒患者中的26例作为此次的主要研究对象,随机分成两组,对照组、观察组,每组分别包含13例患者。观察组:采取全自动洗胃机干预,对照组:采取传统洗胃法干预,总结不同方式洗胃后患者的临床效果、并发症情况、洗胃相关指标等数据。结果:两组在临床有效率上对比,观察组较好,观察组的并发症发生率为7.7%,显著低于对照组的53.8%,且观察组的临床症状消失较早,洗胃时间少于对照组,对照组的住院时间以及洗胃液残余量显著多于观察组,组间数据对比差异显著,统计学意义存在(P