简介:摘要目的探讨剖宫产术中子宫收缩乏力出血的高危因素,治疗。方法回顾性分析2011年7月~2013年8月我院剖宫产术中出血患者的临床资料。结果18例患者中有15例实施子宫动脉上行支缝扎+B-Lynch缝合,均成功保留子宫。结论子宫动脉上行支缝扎+B-Lynch缝合治疗剖宫产术中子宫收缩乏力出血可行,有效。
简介:摘要目的研究长链非编码RNA GAS5(long non-coding RNA GAS5,GAS5)靶向调控miR-29、miR-96和miR-208促进胰岛β细胞分泌胰岛素的作用及其机制。方法采用Q-PCR法检测122名健康人血清和88例2型糖尿病(T2DM)患者血清以及大鼠胰岛细胞瘤株INS-1832/13中,长链非编码RNA GAS5与miR-29、miR-96和miR-208的表达水平及其相关性。通过慢病毒载体构建,沉默和过表达GAS5观察对胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响。采用生物信息学预测GAS5与miR-29、miR-96和miR-208有互补结合位点,用荧光素酶报告系统验证其靶向关系。在胰岛β细胞中共转染GAS5 shRNA,用上述方法检测其对胰岛素受体(insulin receptor, INSR)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate-1, IRS-1)和磷酸肌醇3-激酶(phosphatidylinositide 3-kinase, PI3K)水平的影响,从而揭示GAS5刺激胰岛β细胞分泌胰岛素的作用机制。结果与健康人血清相比,2型糖尿病患者血清中GAS5的表达低于健康对照组(t=4.632, P<0.01),miR-29、miR-96和miR-208高于健康对照组(t分别为7.832、9.164、12.359,均P<0.01),而且GAS5水平与miR-29、miR-96和miR-208呈负相关(r分别为-0.50、-0.47、-0.70)。慢病毒过表达GAS5导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加,胰岛素含量增加。相反,GAS5的下调导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛素含量显著降低。利用生物信息学工具,筛选了miR-29、miR-96和miR-208作为GAS5的靶点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证GAS5可以通过靶向抑制miR-96、miR-29和miR-208的表达发挥作用。shGAS5显著降低INSR、IRS-1和PI3K的表达(P分别为0.022、0.038、0.009),而过表达GAS5在mRNA和蛋白水平上均显著上调INSR、IRS-1和PI3K的表达(P分别为0.024、0.045、0.016)。结论GAS5可能通过靶向调控miR-29、miR-96和miR-208的表达,进而对这些miRNA可能存在的负调控因子INSR、IRS-1和PI3K等的表达进行正向调控,刺激胰岛β细胞分泌胰岛素。
简介:目的:探讨miR-34b在白血病细胞株表达和启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义。方法:选择10例非血液系统疾病患儿作为对照组,收集对照组骨髓细胞标本,另选择HL-60和K562白血病细胞株,采用荧光定量PCR检测对照组骨髓细胞、HL-60和K562细胞株的miR-34b相对表达量,并用甲基化特异性PCR检测各组miR-34b甲基化状态。用地西他滨处理HL-60和K562细胞株,用同样方法检测两种细胞株miR-34b相对表达量及甲基化状态。采用脂质体转染法将Has-miR-34b转染至K562细胞株,根据转染是否成功分为未转染组、阴性对照组和Has-miR-34b转染组,记录各组培养后不同时间细胞的增殖情况,并计算增殖抑制率。结果:对照组miR-34b相对表达量为(5.23±0.75),HL-60相对表达量为(0.05±0.01),K562相对表达量为(0.04±0.01),3组间比较差异具有统计学意义(F=44.812,P=0.000)。HL-60细胞株和K562细胞株分别在启动子区CpG岛存在甲基化状态,10例非血液系统疾病患儿骨髓细胞无甲基化现象。经过地西他滨处理后HL-60和K562细胞株miR-34b表达水平均显著增加(P<0.05);加地西他滨前后白血病细胞株启动子区CpG岛均存在甲基化,但是加药后甲基化明显减弱,提示地西他滨对启动子区CpG岛甲基化具有抑制作用。培养48、72、96和120h后Has-miR-34b转染组细胞增殖抑制率分别为24.8%、46.7%、33.6%和24.7%,细胞增殖率均显著低于未转染组和阴性对照组,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:白血病细胞株miR-34b启动子区CpG岛甲基化使其表达水平显著降低,这也是miR-34b对细胞株增殖抑制作用降低的原因;miR-34b也有可能是一种抑癌基因参与调控白血病的发生、发展。
简介:摘要目的探讨miRNA-196b以及WDR37对于人喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)的作用及其潜在的作用机制。方法通过肿瘤基因图谱分析miR-196b和WDR37在LSCC患者中的表达以及两者的相关性。在Tu868细胞低表达miR-196b或过表达WDR37通过CCK-8、AO/EB以及克隆形成检测细胞活性,凋亡以及增殖的作用,通过荧光素酶基因报告研究miR-196b与WDR37的靶向关系,Western blot方法检测转染miR-196b后增殖相关蛋白的变化。结果miR-196b在LSCC中的表达量明显高于正常组(P=0.028),且高表达miR-196b的患者生存率明显低于低表达组(P=3.000×10-4),WDR37在LSCC中的表达量明显低于正常组(P=0.048)。低表达miR-196b的LSCC患者生存时间明显高于高表达(P=0.001); miR-196b与WDR37在LSCC患者中表达呈负相关(P=5.930×10-12)。miR-196b inhibitor可使WDR37的表达增加(P=0.032、0.042), miR-196b mimic可使WDR37的表达降低(P=0.029、0.043)。WDR37是miR-196b的直接靶点。miR-196b inhibitor能够明显抑制细胞活性(P=0.042);而miR-196b mimic能够使细胞活性明显增加(P=0.031)。结果显示miR-196b inhibitor能够诱导Tu868细胞凋亡,同时Ki67实验的结果也说明,miR-196b inhibitor能够明显的抑制Tu868细胞增殖。结论miR-196b过表达抑制人LSCC中的WDR37,导致肿瘤发展预后不良。miR-196b是一种潜在的预后评估标志物。
简介:摘要目的评估并比较生长分化因子15(GDF-15)和B型利钠肽(BNP)对心力衰竭(HF)患者随访1年发生不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法纵向队列研究。选取2017年1月至2019年12月在我院诊治的420例HF患者,入院时检测GDF-15和BNP,根据随访1年是否发生MACE事件(死亡、心力衰竭加重住院、新发急性冠脉综合征)分为MACE组(53例)和无MACE组(367例),比较两组的基线资料,Cox回归分析检验GDF-15、BNP与MACE的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线比较GDF-15、BNP对MACE的预测价值,并比较不同GDF-15和BNP亚组患者的MACE发生风险。结果420例患者中,女性199例(47.4%),年龄为(43.7±21.3)岁,左室射血分数(LVEF)为44.6%±5.3%。与无MACE组比较,MACE组的年龄、吸烟、心房颤动的比例更高,血肌酐、BNP和GDF-15水平更高,LVEF更低,β受体阻滞剂使用率也更低(均为P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,GDF-15(HR=1.834,95%CI:1.107~2.538)和BNP(HR=1.637,95%CI:1.143~1.957)是预测MACE的因素。此外,年龄、缺血性HF、血肌酐和β受体阻滞剂也是MACE的相关因素(均为P<0.05)。ROC曲线结果显示,GDF-15和BNP预测MACE的曲线下面积分别为0.752和0.748。GDF-15预测HF患者发生MACE的预测价值不劣于BNP(P非劣性=0.27)。结论GDF-15对HF患者的MACE预测价值不劣于BNP。
简介:目的探讨p15^INK4B(p15)基因转染对人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖的影响。方法采用脂质体将pCDNA3.1(+)-p15质粒及阴性对照pCDNA3.1(+)-neo质粒转染BxPC3细胞,以亲本细胞作为对照组。应用RT—PCR检测细胞p15^INK4B表达;Westernblotting检测细胞p15蛋白表达;MTF法检测细胞增殖;透射电镜观察细胞超微结构变化;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果p15转染组细胞恢复p15^INK4B和蛋白表达。培养第2天生长被抑制,至第7天,生长抑制率达47.9%。G0/G1期细胞占(61.56±3.96)%,显著高于空质粒转染组的(47.44±6.35)%和对照组的(49.22±7.23)%(P〈0.05)。出现明显的G1凋亡峰,细胞凋亡率为(5.27±1.04)%,显著高于空质粒转染组的(0.11±0.06)%和对照组的(0.09±0.07)%(P〈0.05)。透射电镜观察到p15转染组发生细胞凋亡。结论体外p15基因转染可以抑制人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖,并能诱导其凋亡。
简介:提取4J4例2型糖尿病、31例健康志愿者(正常糖耐量组)外周血单个核细胞;Trizol法提取总RNA;时实荧光定量(染料法)PCR方法检测miR-9、miR-124和PPARoLmRNA表达水平。结果与正常糖耐量组比较,初发2型糖尿病患者血清甘油三酯水平升高(P〈0.01),伴随miR-9表达上调123.65%(P=0.000);miR-124表达上调49.51%(P=0.005);PPARamRNA表达下调42.08%(P=0.029)。结论初发2型糖尿病患者血清甘油三酯显著性升高,伴随外周血miR-9和miR-124高表达而PPARot低表达。
简介:摘要目的探讨循环miR-143和miR-182对急性缺血性卒中(acute ischemic stroke, AIS)患者短期临床转归的预测价值。方法前瞻性纳入2018年1月至2020年6月儋州市人民医院收治的AIS患者,在发病后14 d或出院时应用改良Rankin量表评估短期临床转归,0~2分定义为转归良好,>2分定义为转归不良。采用多变量logistic回归分析确定AIS患者短期临床转归不良的独立危险因素。应用受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估miR-143及miR-182对AIS患者短期临床转归不良的预测价值。结果共纳入158例AIS患者,年龄(65.80±12.36)岁,男性105例(66.46%);95例(60.1%)转归良好,63例(39.9%)转归不良。转归不良组年龄、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、基线美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS)评分、血清miR-143及miR-182均显著高于转归良好组(P均<0.05)。多变量logistic回归分析显示,年龄[优势比(odds ratio, OR)1.984,95%置信区间(confidence interval, CI)1.315~3.617;P=0.036]、低密度脂蛋白胆固醇(OR 2.108,95% CI 1.406~4.103;P=0.013)、基线NIHSS评分(OR 2.584,95% CI 1.675~4.505;P=0.005)、miR-143(OR 3.205,95% CI 2.370~6.180;P<0.001)及miR-182(OR 2.802,95% CI 1.905~5.516;P<0.001)为转归不良的独立危险因素。ROC曲线分析显示,miR-143及miR-182联合预测AIS患者转归不良的曲线下面积为0.935(95% CI 0.873~0.992),其敏感性和特异性分别为96.5%和87.0%。结论血清miR-143及miR-182升高与AIS患者短期转归不良密切相关,两者联合对AIS患者短期转归不良具有较好的预测价值。
简介:摘要目的探讨微小RNA-21(miR-21)和miR-17-5p在乳腺癌患者血浆外泌体中的表达水平及其诊断价值。方法选取2017年6月至2018年3月于成都市第七人民医院就诊的86例乳腺癌患者为乳腺癌组,选取同期体检健康女性45例为对照组。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-21、miR-17-5p在两组血浆外泌体中的表达水平。根据qRT-PCR检测结果将乳腺癌患者分为miR-17-5p高表达组及低表达组,miR-21高表达组及低表达组,比较分析其与乳腺癌患者临床病理参数的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆外泌体miR-21、miR-17-5p对乳腺癌的诊断价值。结果乳腺癌组患者血浆外泌体miR-17-5p表达水平显著低于对照组(P<0.05),而miR-21表达水平显著高于对照组(P<0.05);miR-17-5p单独检测时曲线下面积(AUC)为0.677,敏感度为58.14%,特异度为75.56%,截断值为0.72;miR-21单独检测时AUC为0.694,敏感度为59.30%,特异度为77.78%,截断值为1.68;联合检测时敏感度为96.51%,特异度为95.56%,准确性为96.18%;联合检测诊断乳腺癌的敏感度、特异度及准确性均显著高于单项检测(P<0.05)。血浆外泌体miR-17-5p、miR-21表达水平均与TNM分期、分化程度、淋巴结转移、cerbB-2及Ki-67有关(P<0.05)。结论血浆外泌体低表达的miR-17-5p与高表达的miR-21均可作为诊断乳腺癌的潜在生物学标志物。