简介:采用Streptomyceshygroscopicus(放线菌)源的BAR基因,通过微粒子轰炸遗传转化三个属兰花:长萼兰(Brassia)、卡特兰(Cattleopya)和五唇蝶兰(Doritaensis)的原球茎状体。采用bialaphos(一种除草剂)完成转化细胞的选择。在含1mg/lbialaphos选择培养基上增殖的原球茎状体切碎后转入含3mg/l上述除草剂的选择培养基上。在两个月的间隔期中此种选择重复两次。假定转化的五唇蝶兰的小植株在不含bialaphos中再生,长萼兰和卡特兰则在含3mg/lbialaphos中再生。通过PCR和Southern印迹分析证实了转化植株中存在BAR基因。通过Northern印迹分析证实了BAR基因的转录。通过直接将bialaphos涂于叶片所进行的抗性分析证实了所有三种兰花的小植株BAR基因的功能性表达。
简介:植物通过光合作用将光能转换为化学能,捕光色素结合(LHC)蛋白与色素形成的复合体在捕获、传递和转化光能过程中发挥着重要作用,因此研究毛竹(Phyllostachysedulis)LHC基因结构及表达模式对于揭示其在毛竹光合作用中的功能具有重要意义。采用生物信息学的方法,对毛竹基因组中的LHC基因进行了系统分析。结果表明,在毛竹中共有29个LHC基因同源序列,其包含的内含子数量为0~5个。序列分析表明,29个LHC基因编码的蛋白分别属于光系统Ⅰ和光系统Ⅱ的捕光色素结合蛋白家族LHCⅠ和LHCⅡ。LHCⅠ包含5个亚家族(Lhca1-Lhca5),除了Lhca4含有3个成员外其他亚家族只有1个成员;而LHCⅡ包含6个亚族(Lhcb1-Lhcb6),每个亚家族的成员不同,其中Lhcb1的成员最多为7个。亲疏水性预测表明,不同亚家族成员存在着一定差异。蛋白结构预测发现,29个蛋白均包含导肽和成熟蛋白,具有跨膜结构域,均包含色素结合位点;其中12个蛋白的组成以α-螺旋为主,17个蛋白的组成以随机卷曲为主。基因表达谱分析表明,大多数LHC基因主要在叶片和花序中表达,笋中略有表达,而根和鞭中几乎检测不到表达。研究结果为进一步研究毛竹LHC基因的功能奠定了基础。
简介:通过计算银白杨叶绿体基因组中各基因的ENc值、RSCU值、CAI值和GC3s的含量,分析银白杨叶绿体基因组密码子用法,并采用目前普遍使用的多变量统计分析方法(对应分析)和ENc.plot方法探讨了若干重要因子对银白杨叶绿体基因组密码子用法的效应。对应分析结果显示在影响最大的第一条向量轴上,基因的坐标位置与GC3s(r=349)极显著相关,而与该基因的表达水平(CAI)无显著相关性,但是在第二、三向量轴上基因的坐标位置与该基因的表达水平(CAI)呈极显著相关(r=-0.348和r=0.602,),说明碱基突变是影响密码子发挥作用的主要因素,而少数基因密码子用法受到翻译选择的作用;ENC-plot分析结果也证明了这一点。图2表2参34。更多还原
简介:用X-射线微区分析方法对I-214(PopulusdeltoidesP.nigra(Dode)Guinier)和胡杨(P.euphraticaOlive)根和叶片样品中元素浓度和分布研究的结果表明,与盐胁迫处理和对照的I-214相比较,胡杨根系中具有”次生液泡”,因而Cl,Na,K和Mg离子浓度较低,而Ca离子浓度较高.在不耐盐的I-214杨中由于不具有”次生液泡”,Cl和K离子浓度较高.胡杨中的这种结构一方面可以做为Cl离子的储存场所,另一方面可以防止Cl离子在细胞核中积聚.在盐胁迫处理条件下,相对细胞壁而言胡杨表现出较强的防止细胞核中积聚Cl离子的能力,表明胡杨在离子选择吸收和区隔化方面具有较强的功能,这将有助于解释胡杨所具有的较强的耐盐性
简介:植株的高度控制是菊花商品性生产中一个主要的考虑因子。我们通过生物技术途径致力于这一问题。菊花"Iridon"植株通过遗传工程异位表达受CaMV35S启动子控制的烟草(NicotianatabacumL.)光敏色素B1基因。与野生型(WT)相比,转基因植株较矮,分枝角度较大。由烟草光敏色素B1基因异位表达引起的生长下降与采用推荐用量的商品化生长调节剂所引起的结果相似。在转基因植株叶片上观察到的另一个形态效应是与较高的叶绿素含量相关联的深绿色。在采用一个选择性地减少远红光波长的过滤器的条件下,转基因植株生长非常类似于野生型植株。并且,当植株用赤霉酸(促进生长)或一种赤霉素的合成抑制剂(抑制生长)矮壮素处理后,转基因植株和野生型植株平均节间长度的差异在绝对值上来说是相同的,这表明了PHY-B1转基因的表达引起的生长下降不直接与赤霉素的生物合成有关。此项技术的商品性应用可能提供一种使用化学生长调节剂的替代方法,从而降低生产成本。
简介:本研究以转BADH-反义4Cl二色胡枝子(L.bicolor)为研究对象,对其进行抗盐性试验。通过在茎段增殖培养基添加不同浓度的NaCl(0g/L,2g/L,4g/L,6g/L,8g/L)和生根培养基中添加不同浓度的NaC(0g/L,1g/L,2g/L,3g/L,4g/L),对转lBADH-反义4Cl基因的不同株系,进行茎段增殖和生根培养。结果表明培养基中添加2g/LNaCl不能抑制生根,适合作为生根阶段的选择剂浓度。当NaCl浓度达到4g/L时茎段分化率低下,该浓度可作为适合茎段分化的选择剂浓度。NaCl浓度大于6g/L就抑制了茎段分化,NaCl浓度大于3g/L浓度就抑制了根的生长。两个浓度为胡枝子的筛选浓度或极限浓度。综合茎段增殖系数、平均分化芽数量等测定因素,22号株系在转入双基因BADH-反义4Cl之后耐盐性相对较高。综合生根率、平均生根数量等因素,74号株系在转入双基因BADH-反义4Cl之后耐盐性相对较高。本实验旨在为转基因胡枝子的育种提供一定的理论基础。
简介:应用23个形态学特征,19个扩增片段长度多态性(AFLP)引物组合,80个随机扩增多态DNA(RAPD)引物和32个简单序列重复(SSR)引物对,比较三种分子标记法在29个杏仁栽培种和3个野生种遗传关系构建中的信息量和效率。根据预期杂合度的评价,与AFLPs和RAPDs相比,SSRs具有较高水平的多态性和较大的信息量。AFLPs预期杂合度值最低,但其辨别效率值最高,因为AFLPs能揭示每个反应中的大量条带,导致各种类型的多样性指数均较高。三种分子标记法对杏仁基因型的辨别效率均较高,只是SSRs无法辨别‘Monagha’和‘Sefied’杏仁基因型。三种分子标记法基因型相似性相关系数统计上显著,但SSR数据要低于RAPDs和AFLPs的值。尽管三种分子标记法树形图拓扑结构存在一些差异,但相似性水平均较高。SSRs、RAPDs和AFLPs的系统树图及其综合数据都能依据地理散布反映大多数栽培种的关系。AMOVA检测到每个地理组中栽培种和野生种的变异。辅助程序分析表明,实验所应用的标记物数量足以保证基因相似性估计的可靠性和标记法间的比较是有意义的。