简介：摘要先证者表型和基因型检测结果对遗传病的精准诊断同样重要。遗传变异的精准解读需借助于基因型数据和表型数据。目前，国际已有多个通过数据共享建立的基因型与表型数据库，但鉴于国际现有数据库尚存在一定的缺陷和不足，其收录的数据无法代表中国人群遗传变异谱及表型谱特征，我国实验室之间目前的变异解读差异仍较大，有必要建立中国人群基因型-表型数据库。数据库的建立需要组织和管理者、临床实验室和领域内专家的共同努力。通过数据库的建立，可促进遗传病精准诊断和个体化治疗。

简介：摘要目的探讨PD-L1基因遗传变异对接受铂类药物为基础辅助化疗的非小细胞肺癌患者的预后影响。方法纳入278例2012年1月至2018年12月在郑州大学第一附属医院呼吸科术后接受铂类药物为基础辅助化疗的非小细胞肺癌患者。入院接受治疗期间收集患者的生物学样本，辅助化疗期间评估患者的复发情况以及不良反应发生情况，完成固定周期的辅助化疗后通过电话随访获取患者的长期生存数据。通过收集的血液学样本提取的DNA进行PD-L1基因分型。进一步收集68例患者术后的癌组织标本，提取RNA进行PD-L1基因mRNA表达分析。基因型和预后的单变量分析用Kaplan-Meier生存分析方法。结果278例患者的中位无疾病生存期（DFS）为3.2年，中位总生存期（OS）为4.9年。-1813G>C位点的分布频率为：GG型173例（62.23%），GC型92例（33.09%），CC型13例（4.68%），最小等位基因频率为0.21，三种基因型分布频率符合哈迪温伯格平衡（P=0.864）。后期分析将GC和CC基因型合并；GG基因型和GC/CC基因型患者的中位DFS分别为2.7年和4.0年（P=0.013），中位OS分别为4.0年和5.4年（P=0.009）。未发现该位点不同基因型和2级以上不良反应发生率的存在关联（P>0.05）；相对于GC/CC基因型患者，-1813G>C位点GG基因型患者癌组织标本中PD-L1基因的mRNA表达相对较高（3.67±0.65比2.69±0.78，P<0.001）。结论PD-L1基因-1813G>C位点可以影响术后接受铂类药物为基础辅助化疗的非小细胞肺癌患者的预后。

简介：摘要目的分析临床诊断为21羟化酶缺陷症（21-OHD）患者的CYP21A2基因突变检出情况，以明确临床诊断的准确率。方法纳入2015年1月至2018年1月于北京协和医院就诊的514例21-OHD患者，年龄（15.6±11.8）岁，其中男164例，女350例，收集其临床和生化资料。提取外周血白细胞DNA，利用PCR扩增加Sanger测序方法和多重连接探针扩增技术（MLPA）检测CYP21A2基因的突变情况。根据基因检测结果将患者进行分组，两个CYP21A2等位基因均检出突变为A组，仅1个等位基因检出突变为B组，未检出CYP21A2基因突变的为C组，比较各组患者激素水平的差异。结果514例患者中，401例（78.0%）患者的两个CYP21A2等位基因均检出致病突变，90例（17.5%）仅1个等位基因检出致病突变，23例（4.5%）未检出致病突变。不同临床表型的患者CYP21A2基因突变检出率差异无统计学意义。男性患者中，临床表现为单纯男性化型的A和B组患者血总皮质醇水平分别为0.04（0.02，0.20）nmol/L和0.24（0.17，0.28）nmol/L，A组低于B组，差异有统计学意义（P=0.014）。女性患者中，临床表现为失盐型的A、B和C组患者17-羟孕酮（17-OHP）分别为153.7（90.1，204.5）nmol/L、38.2（31.0，183.3）nmol/L和42.6（27.8，48.1）nmol/L，A组高于B组和C组，差异均有统计学意义（均P<0.05）；临床表现为单纯男性化型的A、B和C组的孕酮水平分别为57.8（34.4，110.2）nmol/L、63.6（31.4，110.8）nmol/L和23.0（8.6，33.2）nmol/L，C组低于A组和B组，差异均有统计学意义（均P<0.05）；临床表现为非经典型的A、B和C组患者17-OHP水平分别为158.7（59.1，187.6）nmol/L、147.8（131.9，179.3）nmol/L和24.5（20.4，54.2）nmol/L，C组低于A组和B组，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论部分临床诊断为21-OHD的患者并未能检出两个CYP21A2等位基因的突变，表明其他引起17-OHP水平升高的先天性肾上腺皮质增生症（CAH）类型有被误诊为21-OHD的可能，基因检测对于CAH不同类型的鉴别诊断起到重要作用。

简介：摘 要：文化是一个国家、一个民族的灵魂。对一个民族而言，优秀传统文化的认同与传承，关系到一个国家的生存与发展。初中道德与法治教材蕴含了不少优秀传统文化基因，包括正文和辅助文。为初中学生对优秀传统文化基因的认同与传承，提供了重要学科教育人平台与途径。笔者，就初中道德与法治教材优秀传统文化基因挖掘、融入与内化， 从读、背、写、画等要素，探究初中道德与法治课优秀传统文化基因渗透教学策略。

简介：摘要目的探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）基因启动子序列单核苷酸多态性（SNPs）与老年退行性心脏瓣膜病（SDHVD）的相关性。方法对236例SDHVD组成员（2012年2月至2016年10月济宁医学院附属医院确诊为SDHVD的患者）与285名健康对照组成员（同期于济宁医学院附属医院体检中心体检的健康体检者）的SIRT1基因启动子序列进行统计分析。Sanger测序法检测SIRT1基因启动子序列SNPs；χ2、Logistic回归对SNPs进行基因型、等位基因分析和相关性分析，Haploview 4.2软件对SNPs进行连锁不平衡分析，SHEsis程序进行单倍型分析，凝胶迁移率变异实验（EMSA）分析SNPs对转录因子与SIRT1基因启动子相结合的影响，Transfac程序预测受多态性影响的与SIRT1基因启动子相结合的转录因子。结果rs3740051位点GG基因型与SDHVD的发生具有相关性，校正年龄后，其致SDHVD效应是AA基因型的3.079倍（OR=3.079，95%CI：1.156~8.201，P=0.024）。SIRT1基因启动子中，5个SNPs位点间呈强连锁不平衡（均D′>0.8），共形成11种P<0.05的单倍型，其中*A**C、AA**C、*AG*C、AAG*C、AA*AC、*AGAC和AAGAC在SDHVD组中具有更高的频率（均P<0.05，OR>1,95%CI不包含1）。EMSA示正常序列探针与核蛋白所孵育出的结合条带较突变序列探针与核蛋白所孵育出的结合条带颜色深。结论rs3740051位点GG基因型与SDHVD具有相关性且可能是SDHVD发生的危险性基因型。单倍型AC(跨rs932658和rs2394443）可能是SDHVD发生的危险性单倍型。rs3740051可能通过干扰FOXC蛋白与SIRT1基因启动子的结合影响SDHVD的发生发展。

简介：摘要一例27岁男性患者，因肢体震颤3年就诊，诊断Kufor-Rakeb综合征（KRS），对多巴胺反应可。其基因检测提示ATP13A2基因存在2个新的突变，分别是28号外显子（exon）c.3367C>G（p.Leu1123Val）突变及21号外显子c.2278G>A（p.Val760Met）突变。

简介：摘要目的探讨家族序列相似性13A（FAM13A）基因与慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）小气道重塑的关系，及干扰FAM13A基因表达对人气道上皮细胞（16HBE细胞）凋亡和增殖表型的影响。方法收集2018年1月至2020年1月宁夏医科大学总医院胸外科因肺部肿瘤或肺大泡行手术治疗的患者74例，根据肺功能和吸烟史分为4组：肺功能正常不吸烟组（正常组，23例）、肺功能正常吸烟组（吸烟组，24例）、慢阻肺不吸烟组（11例）和慢阻肺吸烟组（16例），采用免疫组化检测各组小气道FAM13A基因表达，并分析其与肺功能气流受限指标的相关性。设计FAM13A基因短片断干扰RNA（shRNA）片段，构建和包装FAM13A基因shRNA慢病毒载体，转染16HBE细胞，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western印迹法检测FAM13A基因表达水平，并筛选最佳shRNA序列。运用流式细胞技术检测细胞凋亡率和细胞增殖标志物Ki-67荧光强度。结果FAM13A主要表达于小气道上皮细胞的胞质，慢阻肺不吸烟组和慢阻肺吸烟组小气道上皮细胞FAM13A吸光度（A）值均高于正常组和吸烟组（0.365±0.026、0.412±0.053比0.113±0.018、0.105±0.009，均P<0.05），且其与肺功能气流受限指标第一秒用力呼气容积（FEV1）与用力肺活量（FVC）的比值（FEV1/FVC）及FEV1占预计值百分比（FEV1%pre）呈负相关（r=-0.48和r=-0.40，均P<0.05）。成功构建FAM13A基因shRNA慢病毒载体，并在16HBE细胞系上实现FAM13A干扰。转染16HBE细胞后，shRNA的靶标序列2（shRNA-target-2）的FAM13A表达量降低（均P<0.01）；相比于阴性对照组（shRNA-NC），FAM13A shRNA组细胞凋亡率降低（P=0.023），且Ki-67荧光强度也降低（P=0.042）。结论FAM13A基因在慢阻肺小气道上皮细胞中表达增高，且与慢阻肺气流受限相关，FAM13A基因可能通过影响人气道上皮细胞凋亡和增殖而参与慢阻肺小气道重塑的过程。

简介：摘要目的研究微小RNA-16-5p（miR-16-5p）对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和蛋白质印迹法（Western blotting法）检测人正常成骨细胞hFOB 1.19和骨肉瘤细胞MG63、Saos2、HOS内miR-16-5p、四分子交联体15（TSPAN15）mRNA和蛋白表达。在MG63细胞中转染miR-16-5p或si-TSPAN15，观察其在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖，Transwell法检测细胞迁移和侵袭，Western blotting法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、TSPAN15、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）蛋白表达。Starbase网站预测结合双荧光素酶基因报告实验分析miR-16-5p与TSPAN15的靶向关系。将miR-16-5p和pcDNA-TSPAN1共转染，评估高表达TSPAN15对过表达miR-16-5p诱导的MG63细胞增殖、迁移和侵袭的影响。两组间数据的比较采用t检验。结果与hFOB 1.19细胞（1.00±0.12）相比，MG63、Saos2、HOS细胞中miR-16-5p表达量（分别为0.32±0.05、0.40±0.04、0.45±0.06）明显降低（F=156.204，P<0.05），TSPAN15 mRNA和蛋白水平显著提高（F=71.718、110.350，均P<0.05）。过表达miR-16-5p明显减少MG63细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量及细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量（F=150.136、117.228、154.971、89.479、98.373、130.880，均P<0.05）。敲减TSPAN15明显降低MG63细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量（F=93.206、107.030、109.326、115.625、146.113、139.300，均P<0.05）。过表达miR-16-5p显著降低MG63细胞中p-PI3K、p-AKT蛋白表达量（F=156.755、181.419，均P<0.05）。miR-16-5p靶向调控TSPAN15的表达。高表达TSPAN15可部分逆转miR-16-5p对MG63细胞内TSPAN15、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、p-PI3K、p-AKT蛋白表达、细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量的抑制作用。结论miR-16-5p通过靶向TSPAN15基因并调控PI3K/AKT信号通路，从而抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭。