简介：摘要：本试验主要研究益生菌慕斯洗液对实验性小鼠细菌性阴道炎模型的作用。建立小鼠阴道混合感染金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的动物模型，分别外洗给予益生菌慕斯洗液1mL（低剂量组）、

简介：摘要目的探讨黄芩苷(baicalin，BA)对慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable mild stimulus，CUMS)模型小鼠抑郁行为及细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase，ERK)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein，CREB)的调节作用。方法30只癌症研究所(institute of cancer research，ICR)小鼠根据随机数字表法分为对照组(CON组)、模型组(CUMS组)、氟西汀组(FLU组)、黄芩苷高剂量组(BA-H组)、黄芩苷低剂量组(BA-L组)，每组6只。除对照组外，运用CUMS方法对其余四组小鼠造模，造模共进行42 d，并从第21天开始按照分组进行灌胃至造模完成。给药结束后运用糖水偏爱实验和水迷宫实验测定小鼠的抑郁样行为，运用蛋白质印迹法(Western blot，WB)和反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)法分别检测小鼠海马组织中ERK、CREB mRNA和蛋白的表达情况。运用SPSS 21.0软件包，经正态检验和方差齐性检验后，多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，两两比较采用Tukey法。结果糖水偏爱实验显示，与CON组相比，CUMS组的糖水偏爱率降低[(82.88±2.00)%，(64.49±1.24)%；t＝19.11，P<0.05]。与CUMS组相比，FLU组[(81.90±1.19)%]、BA-H组[(77.86±2.51)%]、BA-L组[(67.98±2.56)%]小鼠的糖水偏爱率均增加(t＝24.83，11.68，3.00；均P<0.05)。水迷宫实验结果显示，与CON组比较，CUMS组小鼠的穿越平台次数[(6.33±0.82)次，(1.83±0.75)次；t＝9.93，P<0.05]和目标象限停留时间[(46.83±4.78)s，(24.25±6.12)s；t＝7.13，P<0.05]均降低，逃避潜伏期延长[(14.88±3.00)s，(70.70±4.77)s；t＝24.26，P<0.05]。与CUMS组相比，FLU组、BA-H组、BA-L组小鼠的穿越平台次数均增加[(5.00±0.89)次，(5.17±0.75)次，(3.33±0.82)次；t＝6.64，7.67，3.31；均P<0.05]，目标象限停留时间均增加[(36.80±2.66)s，(36.82±5.62)s，(33.28±3.56)s；t＝4.61，3.71，3.13，均P<0.05]，逃避潜伏期时间均缩短[(23.37±4.86)s，( 34.83±4.72)s，( 62.15±5.30)s；t＝17.02，13.10，2.94；均P<0.05]。Weston blot结果显示，与CON组相比，CUMS组小鼠海马的ERK蛋白表达[(1.00±0.15)，(0.36±0.10)；t＝6.26，P<0.05]和CREB蛋白表达[(1.00±0.12)(0.29±0.03)；t＝10.32，P<0.05]均降低。与CUMS组相比，FLU组、BA-H组、BA-L组小鼠海马的ERK蛋白表达均增加[(0.87±0.05)、(0.77±0.08)、(0.67±0.03)；t＝8.25，5.79，5.39；均P<0.05]，CREB蛋白表达均增加[(0.90±0.12)、(0.84±0.14)、(0.62±0.04)；t＝8.94，6.59，12.25，均P<0.05]。PCR结果显示，与CON组相比，CUMS组小鼠海马的ERK mRNA [(1.00±0.03)，(0.41±0.10); t＝9.78，P<0.05]和CREB mRNA[(1.00±0.08)(0.61±0.12)；t＝4.62，P<0.05]均降低。与CUMS组相比，FLU组、BA-H组、BA-L组小鼠海马的ERK mRNA均增加[(0.71±0.08)、(0.69±0.03)、(0.59±0.04)；t＝4.15，4.65，2.84；均P<0.05]，FLU组、BA-H组小鼠的CREB mRNA均增加[(0.87±0.08)、(0.86±0.07)；t＝3.14，3.19，均P<0.05]。结论BA对CUMS模型小鼠抑郁样行为有改善作用，其作用机制发挥可能与调节ERK、CREB蛋白有关。

简介：摘要目的探讨维生素D（vitamin D, VD）对睡眠剥夺（sleep deprivation, SD）小鼠认知功能的影响及其作用机制。方法将40只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为4组（每组10只）：正常对照组（Ctrl组）、SD组、SD+VD组（VD组）、SD+VD+3MA组（3MA组）。Ctrl组不做任何处理，SD组、VD组、3MA组小鼠采用多平台水环境法进行72 h的SD；VD组、3MA组腹腔注射1,25-二羟维生素D3[1, 25-dihydroxyvitamin D3, 1,25（OH）2D3]1.5 μg/kg，连续7 d；3MA组腹腔注射自噬抑制剂3MA 2 mg/kg，连续7 d；Ctrl组与SD组腹腔注射等量的生理盐水。造模结束后用Morris水迷宫检测小鼠学习、记忆能力，行为学测试完毕后随即处死取材，采用ELISA试剂盒检测小鼠血清中25羟基维生素D3（25-hydroxy vitamin D3, 25HVD3）的含量以及海马组织中β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein, Aβ）、TNF-α、IL-1β及IL-6的含量，Western blot法检测小鼠海马组织中自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin 1）和微管相关蛋白1轻链3B亚基（B subunit of microtubule-associated protein light chain 3, LC3B）的蛋白水平；免疫荧光染色法标记LC3B。结果与Ctrl组比较，VD组、SD组和3MA组小鼠逃避潜伏期明显延长，穿越平台次数及目标象限停留时间减少，血清中25HVD3含量均减少，海马组织中Aβ、TNF-α、IL-1β及IL-6含量均增加，海马组织中Beclin 1和LC3B蛋白水平均升高（P<0.05）、绿色荧光表达也明显增强。与SD组比较：VD组逃避潜伏期缩短，穿越平台次数及目标象限停留时间增加（P<0.05）；VD组和3MA组血清中25HVD3含量增加，海马组织中Aβ、TNF-α、IL-1β及IL-6含量均减少（P<0.05）；VD组海马组织Beclin 1和LC3B蛋白水平升高（P<0.05），绿色荧光也表达增强。与VD组比较，3MA组小鼠逃避潜伏期明显延长，穿越平台次数及目标象限停留时间减少，海马组织中Aβ、TNF-α、IL-1β及IL-6含量均增加，海马组织中Beclin 1和LC3B蛋白水平降低（P<0.05）、绿色荧光表达下降。结论VD改善SD小鼠认知功能的机制可能与激活自噬有关。

简介：摘要目的探讨硫醚环化B螺旋肽（thioether-cyclized helix B peptide, CHBP）对脓毒症导致急性肺损伤（acute lung injury，ALI）的保护作用及其潜在机制。方法30只SPF级6~8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机（随机数字表法）分为三组：空白对照组、脓毒症致ALI组和CHBP预处理组（10 nmol/kg）。在ALI发生18 h后，通过免疫组化检测肺组织caspase-3阳性表达，通过免疫荧光检测肺组织TUNEL阳性率。体外培养小鼠肺上皮细胞（MLE-12）并分为对照组、脂多糖（LPS）组和CHBP预处理组（10 nmol/L）。刺激24 h后，ELISA检测细胞上清液的炎症因子水平，通过荧光TUNEL法检测各组细胞的凋亡比例以及用Western blot检测caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。使用Graphpad prism 7软件对数据进行单因素方差分析。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果LPS组小鼠出现明显ALI症状和肺组织病理改变。CHBP预处理组肺组织TUNEL阳性细胞数量（个/mm2）少于LPS组，差异有统计学意义[(22±2) vs (39.46±4.51)，P=0.001]。CHBP预处理组肺组织caspase-3阳性细胞数（个/mm2）少于LPS组[(28.67±5.29) vs (52.87±3.76)，P=0.029]。在体外实验中，相比LPS组，CHBP预处理明显抑制MLE-12细胞上清液炎症因子IL-6（pg/mL）[(70.64±5.59) vs (123.10±15.71)，P=0.027]，IL-1β（pg/mL）[(67.11±3.39) vs (100.70±7.61)，P=0.007]和TNF-α（pg/mL）[(76.98±7.97) vs (138.50±13.12)，P=0.007]的表达，抑制了凋亡相关蛋白caspase-3 [(0.085±0.063) vs (1.198±0.058)，P=0.01]以及Bax[(0.562±0.026) vs (0.781±0.044)，P=0.041]的表达，减少细胞凋亡，并且这一趋势与MLE-12细胞荧光TUNEL检测结果[CHBP预处理组(30.33±1.86) vs LPS组(45.00±2.88)，P=0.006]一致。结论CHBP预处理可以减轻脓毒症导致的ALI，这一保护作用很可能是通过抑制炎症反应，减少肺上皮细胞凋亡实现的。

简介：摘要目的评价铁死亡在脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞线粒体损伤模型中的作用。方法常规培养小鼠RAW264.7细胞，按随机数字表法将培养的细胞分为4组（n=6）：对照组（Con组）、脂多糖组（LPS组）、脂多糖+铁死亡激动剂Erastin组（LPS+E组）和脂多糖+铁死亡抑素Ferrostatin-1组（LPS+F组）。LPS组给予终浓度为1 μg/ml的LPS进行孵育6 h；LPS+E组给予终浓度为1 μg/ml的LPS和浓度为1 mmol/L的含Erastin培养液进行孵育6 h；LPS+F组给予终浓度为1 μg/ml的LPS和浓度为1 mmol/L的含Ferrostatin-1培养液进行孵育6 h。采用Clark氧电极法及JC-1法分别测定线粒体呼吸控制率（RCR）及线粒体膜电位（MMP），透射电镜下观察细胞内线粒体改变情况，采用Western blot法测定细胞内铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、长链酯酰辅酶A合成酶4（ACSL4）的表达，采用荧光探针法测定活性氧族（ROS）和Fe2+含量，采用硫代巴比妥酸（TBA）法测定丙二醛（MDA）含量。结果与Con组比较，LPS组RCR和MMP均降低（P均<0.05），GPX4表达下调（P<0.05），ACSL4表达上调（P<0.05）；线粒体出现线粒体膜增厚、线粒体皱缩、线粒体嵴消失等铁死亡表现，细胞内Fe2+含量升高（P<0.05），ROS含量升高（P<0.05），MDA含量升高（P<0.05）。与LPS组比较，LPS+E组RCR和MMP降低（P<0.05），GPX4表达下调（P<0.05），ACSL4表达上调（P<0.05），Fe2+含量、ROS含量和MDA含量均升高（P均<0.05）。LPS+F组RCR和MMP升高（P<0.05），GPX4表达上调（P<0.05），ACSL4表达下调（P<0.05），出现铁死亡变化的线粒体增加（P<0.05），Fe2+含量、ROS含量和MDA含量均降低（P均<0.05）。结论铁死亡增强LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。

简介：摘要目的评价大麻素2型受体(CB2R)基因过表达与小鼠巨噬细胞焦亡的关系。方法利用慢病毒转染小鼠骨髓源性巨噬细胞，制备稳定细胞系：慢病毒LV5阴性对照细胞系LV5-NC、慢病毒LV5CB2R基因过表达细胞系LV5-CB2R-OE(OE)。采用随机数字表法将2种细胞系分别分为3组(n＝18)：对照组(LV5-NC-C组、OE-C组)、LPS/ATP组(LV5-NC-LPS/ATP组、OE-LPS/ATP组)和CB2R特异性激动剂HU308组(LV5-NC-HU308组、OE-HU308组)。对照组细胞正常培养，LPS/ATP组先加入终浓度为0.5 μg/ml LPS孵育5 h后，加入5 mmol/L的ATP孵育1 h。LPS/ATP+HU308组加入终浓度为0.5 μg/ml的LPS和10 μmol/L的HU308共孵育5 h，再给予浓度为5 mmol/L的ATP孵育1 h。采用RT-PCR法检测CB2R、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、caspase-1和消皮素D(GSDMD)的mRNA表达，采用Western blot法检测caspase-1表达，釆用ELISA法检测培养液IL-18和IL-1β的浓度。结果2种细胞系中与对照组比较，LPS/ATP组NLRP3、caspase-1和GSDMD的mRNA表达上调，IL-18和IL-1β浓度升高(P<0.05)；与LPS/ATP组比较，HU308组NLRP3、caspase-1和GSDMD的mRNA表达下调，IL-18和IL-1β浓度降低(P<0.05)。V5-NC-C组与OE-C组比较、LV5-NC-LPS/ATP组与OE-LPS/ATP组比较、LV5-NC-HU308组与OE-HU308组比较，上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论CB2R基因过表达并不能有效抑制小鼠巨噬细胞焦亡的发生，只有激活CB2R才可抑制。

简介：摘要目的探讨热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后肾功能的影响及与肾脏损伤分子1(KIM-1)的关系。方法选取雄性C57BL/6小鼠36只，异氟烷吸入麻醉下阻断双侧肾蒂血管，建立双侧肾脏IRI模型。根据肾缺血时间将小鼠分为四组，即假手术组(Sham组)、阻断28 min组(28 Min组)、30 min组(30 Min组)和32 min组(32 Min组)。术后动态监测各组血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)的变化。术后48 h取肾脏组织行Western blot和免疫荧光染色法检测近端肾小管细胞(PTCs)中KIM-1的表达。术后6周取肾脏组织行苦味酸-天狼星红染色法检测小鼠肾纤维化程度。结果除Sham组外，其余各组小鼠均出现术后Scr及BUN升高，Scr和BUN的达峰时间为24 h，随后缓慢下降，至术后2周达稳定水平。IRI急性期评估提示，除Sham组外，其余各组小鼠术后48 h PTCs表达KIM-1明显上调，且KIM-1的表达量与肾损伤程度及热缺血时间成正比。慢性期评估表明，Sham组和28 Min组术后6周无明显肾纤维化，而30 Min组和32 Min组出现明显肾脏纤维化，且纤维化程度随热缺血时间的延长而加重。术后6周观察期内，Sham组、28 Min组和30 Min组均无小鼠死亡，而32 Min组有50%小鼠死亡。结论小鼠肾脏IRI的损伤程度随热缺血时间的延长而加重。IRI导致的轻微肾损伤是可逆的，急性期后肾功能可逐渐恢复正常。而严重的肾损伤会明显增加小鼠病死率，且会长期影响肾功能。KIM-1可用于监测IRI引起的肾损伤，并评价肾脏损伤的严重程度。

简介：摘要目的建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)模型，分析不同时期肠道炎症改变及巨噬细胞亚群变化，为IBD的治疗寻找新靶点。方法将30只6～8周雄性C57BL/6小鼠简单随机分为对照组、急性活跃期组、组织消退期组。后2组连续5 d饮用25 g/L DSS建立IBD模型，5 d后更换为滤过除菌水，分别在第10天和第15天处死小鼠。对小鼠结肠炎症进行评估，包括体质量、疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度变化、病理组织学及其评分；采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测结肠组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β的表达水平；采用流式细胞术检测肠道巨噬细胞亚群变化。结果急性活跃期组小鼠结肠炎症较对照组明显严重，组织消退期组小鼠结肠炎症减轻。急性活跃期组小鼠结肠长度为(5.94±0.40) cm，较对照组[(7.25± 0.29) cm]明显缩短，组织消退期得到轻微改善[(6.87±0.95) cm]，差异均有统计学意义(均P<0.05)。急性活跃期小鼠促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平分别为53.40±6.58、117.69±30.78、2.52±0.25，均明显高于对照组(1.00±0.13、1.00±0.39、1.00±0.10)；组织消退期IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平分别为2.51±0.13、5.43±0.51、1.73±0.14，均明显低于急性活跃期组(均P<0.05)；组织消退期抗炎细胞因子TGF-β表达水平为2.41±0.17，明显高于急性活跃期组(0.94±0.12)，差异有统计学意义(P<0.05)。IBD进展过程中，小鼠肠黏膜固有层存在三群巨噬细胞，其中成熟度最低的F4/80lowCD64-MHCⅡ-亚群巨噬细胞在IBD活跃期数量显著升高，占比为(10.68±4.62)%，在消退期数量减少并恢复至正常水平，占比为(4.63±1.06)%，差异有统计学意义(P<0.05)。结论巨噬细胞在IBD进展中发挥重要作用，其成熟发育受阻可能是IBD活跃期炎症损伤的主要原因，而针对巨噬细胞亚群转化可能成为IBD治疗的新靶点。

简介：摘要目的探索顺铂致肾间质纤维化的分子机制，为肾间质纤维化防治提供新思路。方法使用8周龄C57BL/6雄性无特定病原体级小鼠建模，将小鼠分为顺铂组和生理盐水组，每组6只，分别于第0、7、21天腹腔注射顺铂溶液（10 mg/kg）或生理盐水，第28天时处死小鼠，取肾组织行RNA Illumina高通量测序、实时定量PCR、Western印迹、Masson染色及生物信息学分析。结果通过实时定量PCR、Western印迹及Masson染色等验证，顺铂诱导的小鼠肾间质纤维化模型成功建立。RNA Illumina高通量测序结果显示，与生理盐水组相比，顺铂组差异表达长链非编码RNA（long noncoding RNA，lncRNA）有387个，通过实时定量PCR验证排名前两位差异表达lncRNA的表达，趋势均与测序结果一致；差异表达mRNA 2 427个，其中补体C3在差异表达mRNA中排位第一。对测序结果行生物信息学分析，通过基因本体（GO）富集分析发现，与免疫相关的多个条目排位前20内；通过京都基因和基因组数据库（KEGG）富集分析发现，系统性红斑狼疮通路排位第一（ko05322，Q=3.4E-17），其中包含了补体级联反应通路。通过实时定量PCR验证发现，与生理盐水组比较，顺铂组补体C1q、C2、C3和C4 mRNA表达均升高（均P<0.05），与测序结果一致。结论小鼠周期性腹腔注射顺铂可诱导肾间质纤维化模型，该模型中肾脏补体通路活化。

简介：摘要目的探讨白细胞介素(IL)-35在脓毒症肝早期损伤的保护作用。方法利用盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导小鼠脓毒症肝损伤模型，将小鼠随机分为假手术组(Sham)、脓毒症肝损伤组(CLP)、CLP+IL-35组、CLP+Anti-IL-35组。术后6、12、24 h收集血清及肝组织标本，全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平；采用苏木精-伊红(HE)染色，观察肝脏病理组织学改变；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织匀浆上清液中IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-10等炎性因子水平。符合正态分布的数据，采用单因素方差分析，不符合正态分布时采用非参数秩和检验。结果CLP组小鼠术后24 h内ALT、AST水平均高于Sham组，并于12 h达到峰值水平[ALT：(97.266±2.289) U/L比(35.234±1.874) U/L，AST：(164.580±2.640) U/L比(51.596±1.310) U/L，t＝4.768、4.275，P<0.01]，CLP+IL-35组术后ALT、AST水平变化趋势与CLP组相似，但各时间点均低于CLP组[12 h ALT：(71.282±2.540) U/L比(97.266±2.289) U/L，12 h AST：(114.919±5.939) U/L比(164.580±2.640) U/L，t＝14.260、12.375，P<0.01]。通过HE染色观察，CLP组见大面积肝细胞肿胀、空泡变性，炎性细胞浸润较明显；与之比较，CLP+IL-35组肝组织水肿减轻，炎性细胞浸润减少。CLP组24 h内促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平明显高于Sham组，并于12 h达到峰值[IL-1β：(68.277±1.517) pg/ml比(31.380±0.876) pg/ml，IL-6：(88.683±3.067) pg/ml比(41.310±1.266) pg/ml，TNF-α：(447.957±5.501) pg/ml比(236.060±2.864) pg/ml，IFN-γ：(675.240±10.064) pg/ml比(328.300±3.248) pg/ml，t＝6.026、6.106、7.212、6.462，P<0.01]。CLP+IL-35组术后24 h内促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均明显低于CLP组，并于12 h达到峰值[IL-1β：(52.127±1.232) pg/ml比(68.277±1.517) pg/ml，IL-6：(72.177±2.222) pg/ml比(88.683±3.067) pg/ml，TNF-α：(343.267±6.617) pg/ml比(447.957±5.501) pg/ml，IFN-γ：(514.117±5.687) pg/ml比(675.240±10.064) pg/ml，t＝16.432、20.727、16.848、16.422，P<0.01]。CLP组、CLP+IL-35组抑炎因子IL-10呈现逐渐升高趋势，且CLP+IL-35组各时间点IL-10水平均明显高于CLP组，并于24 h达到峰值[(388.820±3.817) pg/ml比(302.190±4.439) pg/ml，t＝26.985，P<0.01]，差异有统计学意义。结论脓毒症早期即可见肝脏损伤，此时IL-35可发挥肝脏保护作用，其机制可能是抑制促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ的分泌，同时促进抑炎因子IL-10的分泌。

简介：摘要目的探讨高脂膳食（HFD）对小鼠呼吸功能的影响及其线粒体机制。方法将20只4周龄健康雄性C57BL/6小鼠采用简单随机分组分为两组，每组10只，分别以正常膳食（NFD）和HFD饲养16周，每两周称重1次。干预结束后，采用小动物全身容积描记仪测量小鼠呼吸参数，检测血清及膈肌组织脂质指标，将膈肌组织染色后观察膈肌组织形态、肌纤维表型和线粒体超微结构，采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测肌球蛋白重链（MHC）线粒体动力学相关基因和蛋白表达情况。结果NFD和HFD小鼠基线体重分别为（19.17±0.59）和（19.12±0.64）g，差异无统计学意义（P=0.857）。饲养16周后，HFD组小鼠体重为（41.28±2.21）g，高于NFD组［（27.14±0.53）g，P<0.001］。HFD组小鼠吸气峰流速、潮气量和分钟通气量分别为（5.72±0.64）ml/s、（0.23±0.04）ml和（97.49±21.68）ml，均低于NFD组［分别为（7.70±1.52）ml/s、（0.31±0.07）ml和（129.99±28.87）ml］（均P<0.05），增强呼吸间歇为1.16±0.07，高于NFD组（0.98±0.09，P<0.001）。HFD组小鼠膈肌甘油三酯含量为（20.43±6.36）mmol/mg，高于NFD组［（11.62±1.78）mmol/mg，P=0.003］，膈肌纤维内出现脂滴沉积。HFD组小鼠膈肌MHC-Ⅰ型肌纤维占比为13.33%±2.95%，低于NFD组（19.20%±1.23%，P=0.034）。电镜下可见NFD组小鼠膈肌线粒体成行排列，结构清晰；HFD组小鼠膈肌线粒体出现肿胀、嵴断裂和空泡。HFD组小鼠膈肌线粒体融合蛋白2表达水平为0.61±0.16，低于NFD组（1.28±0.03，P<0.001）；线粒体动力相关蛋白1和线粒体分裂蛋白1表达水平分别为1.18±0.06和0.91±0.11，均高于NFD组（分别为0.61±0.07和0.60±0.04，均P<0.001）。结论HFD损伤小鼠呼吸功能，其机制与膈肌MHC-Ⅰ型肌纤维占比下降及线粒体动力学失衡相关。

简介：摘要目的研究富含脂质肠内营养支持对脓毒症小鼠全身炎症反应影响。方法采用盲肠结扎和穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）构建脓毒症模型。雄性BALB/c小鼠80只，随机（随机数字法）分为假手术组（Sham），脓毒症组（CLP），低脂肠内营养组（lipid low，LL）和高脂肠内营养组（lipid rich，LR），每组20只。在构建脓毒症模型前后，实验组分别给予小鼠肠内喂养富含脂质或低脂质的营养液，观察各组小鼠生存情况，ELISA检测小鼠血浆、肺、肾和肝组织TNF-α、IL-1β和IL-6以及血浆IL-10水平，苏木精-伊红（HE）染色观察小鼠肺、肾和肝组织病理学改变。采用SPSS 16.0软件进行统计学分析，并使用Kaplan-Meier和对数秩检验评估组之间的生存分析，多组间的差异通过单因素方差分析，两组间比较使用LSD-t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果与CLP组相比，LR组小鼠生存数量显著升高（P=0.005），肺、肾和肝组织病理损伤均有所减轻，LL组和LR组小鼠血浆、肺、肾和肝组织内TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平均显著降低（P<0.01），而血浆IL-10水平明显升高（P<0.01）。与LL组相比，LR组小鼠血浆TNF-α（pg/mL）[（23.19±3.49）vs（33.38±2.07），P<0.01]、IL-1β（pg/mL）[（26.42±2.63）vs（35.14±2.43），P<0.01]、IL-6（pg/mL）[（35.76±2.83）vs（50.75±4.03），P<0.01]；肺组织中TNF-α（pg/mL）[（17.99±4.29）vs（23.38±2.07），P<0.01]、IL-1β（pg/mL）[（23.92±2.41）vs（32.97±2.63），P<0.01]、IL-6（pg/mL）[（21.76±4.77）vs（35.35±2.71），P<0.01]；肾组织中TNF-α（pg/mL）[（17.98±4.91）vs（23.08±1.67），P<0.01]、IL-1β（pg/mL）[（23.12±2.26）vs（31.57±1.74），P<0.01]、IL-6（pg/mL）[（21.46±3.06）vs（33.55±1.91），P<0.01]；肝组织中TNF-α（pg/mL）[（15.05±2.91）vs（22.38±1.19），P<0.01]、IL-1β（pg/mL）[（14.62±2.41）vs（22.97±2.63），P<0.01]、IL-6（pg/mL）[（23.06±4.56）vs（34.05±2.34），P<0.01]水平降低均更加显著。结论短期富含脂质的肠内营养治疗可改善脓毒症小鼠全身性和器官特异性炎症，有望成为调节炎症反应干预措施。

简介：摘要目的探讨低强度脉冲超声（LIPUS）对跟腱损伤小鼠疼痛步态的影响及可能机制。方法选取雄性C57BL/6小鼠，采用手术法全层离断右侧跟腱，建立跟腱损伤小鼠模型，按照随机数字表法分为跟腱损伤组和跟腱损伤+LIPUS组，每组7只。术后14 d使用Catwalk步态系统分析足印面积、站立时间、步行周期、脚爪最大强度及步幅5个参数评价小鼠步态功能变化。采用HE染色法观察各组小鼠跟腱组织形态学改变。采用免疫荧光染色法检测各组小鼠跟腱组织内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达水平。同时在体外分离并培养小鼠跟腱细胞，使用100 ng/ml脂多糖（LPS）诱导细胞12 h建立体外细胞模型（LPS组）；并对细胞行LIPUS处理（LPS+LIPUS组）；同时设置对照组（未做任何处理）。采用免疫荧光染色检测细胞内核因子-κB（NF-κB）p65核转位情况，Western blot检测iNOS和磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白的表达。结果术后14 d，跟腱损伤+LIPUS组患肢足印面积［（0.28±0.13）cm2］大于跟腱损伤组［（0.14±0.10）cm2］（P<0.05），患肢站立时间［（0.21±0.03）s］长于跟腱损伤组［（0.11±0.04）s］（P<0.05），步行周期［（0.40±0.05）s］较跟腱损伤组［（0.25±0.05）s］显著延长（P<0.05），患肢脚爪最大强度和步幅与跟腱损伤组差异无统计学意义（P>0.05）。HE染色结果显示，跟腱损伤组跟腱组织增生明显，纤维结构排列疏松且无序，并伴有新生血管生成和炎细胞浸润；跟腱损伤+LIPUS组跟腱组织纤维结构排列较整齐，且新生血管和炎细胞浸润程度均有所减轻。术后14 d跟腱损伤+LIPUS组iNOS表达量［（2.84±0.94）%］低于跟腱损伤组［（5.70±0.81）%］（P<0.05）。小鼠跟腱细胞免疫荧光结果表明，与对照组相比，LPS组细胞内NF-κB p65蛋白转位入核，经LIPUS处理后可抑制NF-κB p65蛋白的核转位。Western blot检测发现，对照组跟腱细胞不表达iNOS，p-NF-κB p65蛋白表达量为（0.63±0.16）；与对照组相比，LPS组细胞iNOS（0.99±0.22）和p-NF-κB p65（1.02±0.19）蛋白表达水平显著升高（P<0.05），LPS+LIPUS组iNOS（0.62±0.10）和p-NF-κB p65（0.65±0.21）蛋白表达水平较LPS组显著降低（P<0.05）。结论LIPUS治疗可改善跟腱损伤小鼠步态功能并抑制体内和体外iNOS的表达，该作用可能与LIPUS抑制NF-κB信号通路有关。

简介：摘要目的探讨葫芦巴碱对荷胆囊癌小鼠抑制作用及其机制。方法胆囊癌细胞系SGC-996随机分为对照组、50 μmol/L组、150 μmol/L组，分别采用0、50、150 μmol/L葫芦巴碱处理细胞24 h，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析3组细胞活力；采用Transwell检测细胞迁移，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9 mRNA和蛋白质表达水平。采用胆囊癌细胞系SGC-996建立异体移植瘤模型随机分为模型组和葫芦巴碱组，葫芦巴碱组小鼠经腹腔给予葫芦巴碱50 mg/kg，模型组小鼠注射等体积生理盐水。连续治疗30 d，计算肿瘤体积和重量。计量数据比较采用t检验。结果对照组胆管癌细胞吸光度值(1.94±0.21)明显高于50 μmol/L葫芦巴碱组(1.64±0.17)，差异有统计学意义(t＝3.091，P<0.05)。50 μmol/L葫芦巴碱组细胞吸光度值(1.64±017)明显高于150 μmol/L葫芦巴碱组胆管癌细胞(1.32±0.11)，差异有统计学意义(t＝2.784，P<0.05)。对照组胆管癌细胞迁移数量[(138.44±12.09)个]明显高于50 μmol/L葫芦巴碱组细胞[(109.37±9.33)个]，差异有统计学意义(t＝6.018，P<0.05)。50 μmol/L葫芦巴碱组细胞迁移数量[(109.37±9.33)个]明显高于150 μmol/L葫芦巴碱组胆管癌细胞[(79.36±7.81)个]，差异有统计学意义(t＝5.091，P<0.05)。对照组胆管癌细胞MMP-2和MMP-9 mRNA表达水平(1.09±0.12、1.16±0.14)明显高于50 μmol/L葫芦巴碱组细胞(0.75±0.18、0.80±0.12)，差异有统计学意义(t＝4.115、4.001，P<0.05)。50 μmol/L葫芦巴碱组细胞MMP-2和MMP-9 mRNA表达水平(0.75±0.18、0.80±0.12)明显高于150 μmol/L葫芦巴碱组(0.50±0.11、0.49±0.10)，差异有统计学意义(t＝3.819、3.618，P<0.05)。模型组治疗30 d后小鼠肿瘤体积[(1 542.49±254.88) cm3]明显高于葫芦巴碱组[(1 127.38±142.29) cm3]，差异有统计学意义(t＝6.099，P<0.05)。模型组治疗30 d后小鼠肿瘤质量[(5.29±0.41) g]明显高于葫芦巴碱组[(2.71±0.34) g]，差异有统计学意义(t＝4.971，P<0.05)。模型组治疗30 d后小鼠肿瘤组织MMP-3和MMP-9蛋白表达水平(2.39±0.14、1.52±0.16)明显高于葫芦巴碱组小鼠肿瘤组织(1.03±0.10、0.79±0.14)，差异有统计学意义(t＝3.901、3.428，P<0.05)。结论葫芦巴碱可显著下调MMP-2和MMP-9，抑制胆管癌细胞增殖和迁移，达到抗肿瘤作用。

简介：摘要目的探讨小鼠视神经钳夹损伤（ONC）后视网膜神经节细胞（RGCs）存活率变化。方法选取97只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠，按照随机数字表法分为正常组（5只）、假手术组（5只）、ONC组（87只）。正常组双眼不进行任何操作；假手术组左眼不进行任何操作，右眼行假手术操作；ONC组左眼行ONC，右眼行假手术对照。正常组分别计算左右眼RGCs密度，比较其差异；假手术组计算假手术眼RGCs密度，比较其与正常组平均RGCs密度的差异；ONC组中，以左眼（ONC眼）与右眼（假手术眼）RGCs密度的比值计算RGCs存活率，然后比较不同钳夹持续时间（5，10，20，30 s）的RGCs存活率差异（取材时间统一为钳夹后7 d），以及不同取材时间（3，4，5，7，14，30，60，90，180 d）的RGCs存活率差异（钳夹持续时间统一为20 s）。结果正常组左右眼RGCs密度分别为（5 167.3±55.6）个/mm2和（5 199.6±44.8）个/mm2，差异无统计学意义（P>0.05）。正常组与假手术组RGCs密度分别为（5 183.5±33.4）个/mm2和（5 151.5±87.6）个/mm2，差异无统计学意义（P>0.05）。ONC组不同钳夹时间（5，10，20，30 s）的RGCs存活率分别为（37.6±1.1）%、（34.0±0.9）%、（33.6±1.6）%、（30.3±0.6）%（P<0.01）。钳夹5 s与 30 s相比，ONC组小鼠RGCs存活率差异有统计学意义（P<0.01）；其余不同钳夹时间相比，ONC组小鼠RGCs存活率差异均无统计学意义（P>0.05）。ONC组不同取材时间（3，4，5，7，14，30，60，90，180 d）的RGCs存活率分别为（85.4±2.0）%、（67.6±3.1）%、（43.0±1.0）%、（33.6±1.6）%、（22.7±2.0）%、（12.8±0.6）%、（10.4±0.8）%、（8.6±0.5）%、（6.7±0.2）%（P<0.01），尤其3~5 d，RGCs存活率大幅下降，30 d后RGCs存活率呈平稳下降趋势。结论在ONC小鼠模型中，不同钳夹持续时间对RGCs造成的损伤程度不同，且ONC后RGCs死亡呈进行性发展，提示在原发性损伤（钳夹）后，小鼠的RGCs经历了继发性损伤。因此，有效控制RGCs的继发性损伤，可能成为治疗视神经损伤性疾病的关键。

简介：摘要目的探讨脂肪干细胞(ADSC)对小鼠皮肤中长波紫外线损伤的修复效果，为皮肤光损伤治疗提供思路。方法2018年8月至2019年7月，郑州大学第一附属医院整形外科提取C57BL/6小鼠腹股沟及肾周脂肪组织，处理获得小鼠ADSC，并进行表面标志物、成脂、成骨分化能力鉴定。小鼠光老化模型用SS-03AB型紫外光照仪照射，UVB总剂量9.45 J/cm2，UVA总剂量94.5 J/cm2。实验小鼠(72只)分为正常组、模型组、DMEM(培养基)组、ADSC组，各18只。正常组、模型组照射结束饲养2周后取材，ADSC组照射结束后给予200 μl ADSC悬液皮下注射，DMEM组给予200 μl无血清培养基，均在2周后取材进行组织病理学染色。实验数据采用方差分析处理。结果提取细胞鉴定为脂肪干细胞。HE染色可见镜下炎症细胞浸润ADSC组比DMEM组(t＝20.649，P<0.001)和正常组(t＝16.147，P<0.001)显著减轻，真皮层厚度增加。Masson染色见ADSC治疗后胶原纤维排列整齐密度明显增高。结论皮下注射ADSC可减轻炎症反应，促胶原组织增生，增加真皮层厚度，有效抵抗UVB造成的炎症损伤和胶原断裂。

简介：摘要目的探讨IκB激酶抑制剂PS1145对脓毒症小鼠血管反应性的影响及机制。方法采用区组随机法将45只雄性BALB/c小鼠分为对照组（腹腔注射等量0.9%生理盐水，即Con组）、脓毒症组［腹腔注射脂多糖（LPS）10 mg/kg，即LPS组］和实验干预组（小鼠尾静脉注射IκB激酶特异性阻断剂PS1145 50 mg/kg，6 h后腹腔注射LPS 10 mg/kg，即PT组），每组15只。在模型建立后6 h时每组再分为3个亚组（n=5），分别监测小鼠基础收缩压、给予去甲肾上腺素（NE）（300 ng/kg静脉注射）后收缩压升高幅值、给予乙酰胆碱（Ach）（600 ng/kg静脉注射）后收缩压下降幅值。取3组中监测完基础收缩压亚组的小鼠，采用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、一氧化氮（NO）及血管内皮多糖-蛋白复合物（GCX）脱落标志物Syndecan-1（SDC-1）的水平，Western blot印迹法检测小鼠肠系膜动脉诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达情况。另取15只小鼠分3组（即对照组、LPS组、PT组）建模后采用伊文思蓝染料（EBD）法测定建模6 h时各组小鼠心肌组织、肺脏组织和肠系膜组织的EBD值。结果建模6 h时，LPS组和PT组小鼠基础收缩压均低于对照组［分别为（85.8±1.1）、（89.2±1.3）和（112.6±1.5）mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），均P<0.01］；使用NE后LPS组收缩压升高值［（6.40±0.16）mmHg］低于对照组［（13.75±0.43）mmHg］（P<0.01），PT组［（8.93±0.17）mmHg］高于LPS组（P<0.01）；使用Ach后收缩压降低幅度LPS组低于对照组［（4.16±0.10）mmHg比（9.52±0.53）mmHg，P<0.01］，PT组［（6.45±0.17）mmHg］高于LPS组（P<0.01）。建模6 h时LPS组小鼠血浆TNF-α、SDC-1、NO浓度均高于对照组（均P<0.01），PT组均低于脓毒症组（均P<0.05）。3组小鼠血浆TNF-α和SDC-1浓度呈正相关（r=0.99，P<0.05）。建模6 h时，LPS组小鼠肠系膜组织动脉内皮细胞上eNOS蛋白表达水平低于对照组（P<0.01），PT组高于脓毒症组（P<0.01）。建模6 h时，LPS组小鼠心脏组织、肺脏组织和肠系膜组织EBD含量均明显高于对照组（均P<0.01），PT组上述组织EBD含量低于LPS组（均P<0.01）。结论使用PS1145抑制核因子-κB信号通路可改善脓毒症小鼠模型的血管反应性，机制可能与其降低NO水平、抑制炎症反应、减轻血管内皮GCX损伤脱落从而保护血管内皮屏障功能有关。

简介：摘要目的观察铁死亡在阿霉素（ADR）诱导小鼠局灶节段性肾小球硬化（FSGS）中的作用。方法雄性BALB/c小鼠按完全随机设计分为对照组和模型组，每组20只。模型组采用眼球后静脉注射ADR建立小鼠FSGS，对照组于眼球后注射与ADR同等剂量的生理盐水。实验第0周、第1周和第8周分别检测两组小鼠尿白蛋白/肌酐（ACR）。实验第8周末，处死小鼠，取肾组织，分别在多聚甲醛和戊二醛中固定，病理切片经PAS染色和透射电镜观察；试剂盒检测肾组织中谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平；荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测肾组织中前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）mRNA表达。结果第8周末，模型组小鼠ACR为（78.57±21.64）mg/mg，对照组小鼠ACR为（17.96±5.86）mg/mg，模型组显著高于对照组（P＜0.001）；肾组织PAS染色呈典型局灶、节段性肾小球硬化表现，提示造模成功。超微结构显示，模型组小鼠足细胞中线粒体萎缩，线粒体膜密度增加和膜破裂。与对照组比较，模型组小鼠肾组织GSH浓度显著减少［（6.49±2.63）mmol/L比（3.92±1.86）mmol/L］，MDA浓度显著增高［（35.69±5.28）mmol/L比（73.36±12.47）mmol/L］，PTGS2 mRNA表达水平显著升高［（1.34±1.61）比（5.94±3.51）］，均P＜0.001。结论ADR诱导小鼠FSGS过程中存在铁死亡现象，提示铁死亡可能参与FSGS的发生。

简介：摘要目的探讨小鼠脓毒症进程中白细胞介素-6(IL-6)的动态变化及其前期主要脏器损伤。方法取7～8周C57雄性小鼠30只，按照数字表法随机分为对照组和脓毒症0、4、8、12、16 h组，每组5只。脓毒症各组小鼠首先用脂多糖(LPS)按照400 μg/kg进行预处理8 h，然后继续使用LPS 10 mg/kg的剂量刺激小鼠，建立脓毒症小鼠模型。对照组仅给予1ml/kg的生理盐水尾静脉注射，不作其他处理。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定小鼠血清IL-6含量，并观察其浓度变化；同时取脓毒症模型小鼠肝、肾、心、肺、脾等脏器进行病理学组织切片，探究其发展进程中的病理学变化。结果0、4、8、12、16 h组脓毒症小鼠血清IL-6水平分别为[(239.7±21.5)、(1 268.5±48.7)、(1 836.8±67.4)、(2 393.9±68.3)、(2 989.5±84.7)] pg/ml，与对照组[(56.5±1.8) pg/ml]相比差异均有统计学意义(P<0.01)；病理检查结果显示，在脓毒症早期，最先受损的脏器为肝脏、心脏，而肾脏、肺、脾脏影响较小。结论模型小鼠脓毒症病情越重，血清IL-6水平越高，且脏器中心脏、肝脏最先出现损伤。

简介：摘要目的评价miR-146a在术后认知功能障碍(POCD)小鼠海马炎症反应中的作用。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠160只，12～16周龄，体重22～28 g，采用随机数字表法分成5组(n＝32)：对照组(C组)、POCD组、miR-146a agomir组(Ag组)、miR-146a antagomir组(At组)和阴性对照液组(NC组)。采用吸入1.5%异氟烷麻醉下行胫骨骨折内固定术制备小鼠POCD模型。于术前2 d时，Ag组双侧海马注射miR-146a agomir 0.5 nmol (0.1 nmol/μl)，At组注射miR-146a antagomir 2.5 nmol (0.5 nmol/μl)，NC组注射miR-146a阴性对照液2.5 nmol (0.5 nmol/μl)；C组不行麻醉或手术处理。于术前1 d、术后1、3和7 d时行旷场实验评估小鼠自发活动能力，15 min后行条件恐惧实验评价认知能力，于术后1和3 d时处死小鼠取海马，采用免疫荧光染色法检测CA1区小胶质细胞激活标志物CD11b的表达，于术后6、12和24 h时采用qPCR法检测miR-146a的表达，Western blot法检测IRAK1、TRAF6、NF-κB p65和TNF-α的表达，采用ELISA法检测IL-1β和IL-6的含量。结果5组各时点旷场实验总探索路程及声音恐惧测试僵直时间百分比差异无统计学意义(P>0.05)。与C组比较，POCD组术后1、3和7 d时场景恐惧测试僵直时间百分比减少，术后1和3 d时海马CD11b表达、术后6、12和24 h时miR-146a、IRAK1、TRAF6、NF-κB p65和TNF-α表达上调，IL-1β和IL-6含量升高(P<0.05)；与NC组比较，Ag组术后1、3和7 d时场景恐惧测试僵直时间百分比升高，术后1和3 d时CD11b表达下调，术后6、12和24 h时miR-146a、IRAK1、TRAF6、NF-κB p65和TNF-α表达上调，IL-1β和IL-6含量减少，At组术后1、3和7 d时场景恐惧测试僵直时间百分比减少，术后1和3 d时CD11b表达上调，术后6、12和24 h时miR-146a表达下调，IRAK1、TRAF6和NF-κB p65表达上调，术后12和24 h时TNF-α表达上调，IL-1β和IL-6含量升高(P<0.05)。结论miR-146a参与了POCD小鼠海马炎症反应的过程，机制可能与其抑制IRAK1-TRAF6-NF-κB信号通路有关。