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  • 简介:SDS-PAGE将SDS所带大量阴性电荷和聚丙烯酰胺凝胶高分辨率相结合,使蛋白自身电荷被大量阴性电荷所淹没,这样蛋白在电泳时迁移率仅与其分子大小有关。蛋白电泳时凝胶孔径大小和电泳介质对不同大小分子分辨率有不同影响,特别对相对分子量小于10000低分子量蛋白,常规电泳方法完全不能分辨,国外报道尿素、缓冲液浓度及聚丙烯酰胺单体和双体比例对蛋白分辨率有较大影响,但将几种不同因素进行综合研究,未见报道。

  • 标签: 聚丙烯酰胺 凝胶电泳 分离胶 小分子物质 低分子量 蛋白分子
  • 简介:简述了蛋白质组学概念、内容和意义,重点综述了现代质谱技术在蛋白质组学应用,主要包括蛋白质和肽段鉴定和定量、蛋白质翻译后修饰鉴定和蛋白质间相互作用检测等.随着新高质量精确度、分辨率、灵敏度和通量质谱仪出现,现代质谱技术在蛋白质组学应用将越来越广泛,并给蛋白质组学研究带来新机遇.

  • 标签: 蛋白质组 蛋白质组学 生物质谱
  • 简介:分子生物学理论与技术发展和应用已渗透到生命科学各各领域,动物营养学发展需要在分子水平上分析及解释营养素对动物机体生理、病理变化调控,如生长发育、新陈代谢、遗传变异、免疫与疾病等.本文综述了分子生物学在动物营养学应用:利用分子生物学技术改造或生产动物性营养物质;从基因水平上研究如何提高动物生产性能及肉用性能:如肉质与瘦肉率等;在分子水平上研究营养与基因表达、调控关系,以从根本上阐明营养对机体作用机制;利用基因工程技术开发饲料资源.

  • 标签: 分子生物学技术 动物营养 基因表达调控 应用 发展前景
  • 简介:在哺乳动物体细胞核移植,供体细胞是影响其效率主要因素之一.供体细胞类型、细胞周期、细胞培养代数、冷藏与冷冻处理,以及供体动物性别、年龄等都可能影响核移植胚胎发育.根据现有资料,简要综述了在哺乳动物体细胞核移植中有关供体细胞研究进展.

  • 标签: 体细胞核移植 供体细胞 细胞类型 细胞周期
  • 简介:目的:研究柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌SIPI-1482酮还原酶基因dnrU阻断后产物(13s)-13-二氢柔红霉素及其他发酵产物变化。方法:利用同源重组原理,以大肠杆菌质粒pUC18为基础构建了dnrU基因交换质粒,通过在SIPI-1482染色体上dnrU基因插入安普霉素抗性基因来筛选dnrU阻断突变株。结果和结论:PCR验证表明成功地阻断了dnrU基因。dnrU基因敲除后,重组菌发酵产物(13s)-13-二氢柔红霉素消失,而其他发酵中间产物也有一定变化。

  • 标签: 天蓝淡红链霉菌 DnrU酮还原酶 同源重组 (13s)-13-二氢柔红霉素
  • 简介:目的:构建带Myc标签LC3B—PLA2基因真核表达质粒,获得LC3B—PLA2融合蛋白,并应用LC3B—PLA2研究Atg4B对LC3B切割作用。方法:以本实验室保存乳腺文库为模板,PCR扩增获得LCgB序列,与PLA2G]O拼接后插入pCMV—Myc载体,用构建重组质粒转染HEK293T细胞,Western印迹检测融合蛋白表达,用LC3B—PLA2与Atg4B共转染方法检测Atg4B对LC3B切割作用。结果:菌液PCR、重组质粒双酶切及测序均表明重组质粒构建成功,Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞获得表达,LC3B—PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用研究。结论:构建了pCMV—Myc—LC3B—PLA2真核表达质粒,LC3B—PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用研究至关重要,为进一步研究Atg4B在自噬过程作用奠定了基础。

  • 标签: LC3B-PLA2 Atg4B 自噬 重组质粒
  • 简介:目的研究分析案例教学法在医学院校生物化学实验教学应用效果.方法:选取本院2013级临床专业学科学生240名,按照教学模式不同而分为观察组与对照组,其中临床专业A班(观察A组)、B班(观察B组)、C班(观察C组)每班60名,均采用案例教学法进行生物化学试验教学,另将临床专业D班60名作为对照组,采用传统教学模式,全部学生均在期末行考核对比.结果采用案例教学模式观察ABC组学生学习掌握程度明显高于对照组学生(t=14.7624,P=0.0000)差异有统计学意义.结论案例教学法在医学院校生物化学实验教学应用效果令人满意,其充分增加了学生学习生物化学兴趣,为学生知识掌握提供了良好方式,该教学模式值得推广.

  • 标签: 案例教学法 医学院 生物化学 实验教学
  • 简介:基因芯片技术具有高通量、高度平行性、高度自动化特点。在对传染病病原体研究,基因芯片技术已应用于耐药性相关遗传多态性分析、基因分型、生物种系遗传进化分析、宿主与病原体相互关系分析、病原体检测等。但在病原体检测方面,与检测细菌相比,基因芯片技术对病毒高通量检测难度较大。简要介绍了目前基因芯片技术在病毒性病原体检测研究进展、所采用探针类型及设计原则、基因芯片杂交结果影响因素等。

  • 标签: 基因芯片 病毒 检测 鉴定
  • 简介:离子液体(ionicliquids)是在室温或室温附近完全由离子组成有机液体物质。它作为一类新型绿色介质,近年来获得了突飞猛进发展。推动离子液体研究迅速发展直接动力来源于国际社会对清洁生产、环境保护、循环经济强烈愿望,以及离子液体本身探索价值和应用潜力。

  • 标签: 离子液体 化学分析 绿色化学 储能材料
  • 简介:传统蛋白质组定量策略主要是通过双向凝胶电泳来进行相对定量.由于该方法不能对相对分子质量极高或极低、等电点极酸或极碱和含量低蛋白质以及膜蛋白质等进行有效分离和检测,所以已不能适应目前蛋白质组研究深入发展需要.近年来,定量蛋白质组学发展主要是以同位素亲和标签试剂为代表、以质谱检测为核心稳定同位素化学标记方法.稳定同位素化学标记结合质谱技术,使定量蛋白质组分析更趋简单、准确和快速,具有良好发展前景.本文对稳定同位素化学标记结合质谱技术在定量蛋白质组学研究进展进行了评述.

  • 标签: 稳定同位素 化学标记方法 定量蛋白质组学 生物质谱
  • 简介:microRNA(miRNA)是一类长度为19-25个核苷酸非常保守非编码小RNA分子,在真核生物体内通过与mRNA3'非翻译区序列不完全互补结合促使mRNA降解或抑制翻译,从而在转录后水平调控基因表达。miRNA在生物体内参与了细胞增殖与凋亡、生长发育、代谢活化、DNA修复等一系列生物学过程,与多种疾病尤其是肿瘤发生发展密切相关。对miRNA功能研究已发展到其分子机制层面,大量集中于其靶基因预测和鉴定及调控相关表观遗传因子,为疾病诊断、治疗及预后提供了新线索。我们就miRNA合成、功能研究及miRNA在临床上应用前景做简要综述。

  • 标签: MICRORNA 生物学过程 功能研究 临床应用
  • 简介:由于国际上对转基因产品安全性存在较大争议,因此对没有加施标签予以声明情况下大量进入中国市场转基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大.本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆为材料,通过比较分析外源CP4-EPSPS基因核苷酸序列和表达氨基酸序列,设计出两对不同引物,采用PCR方法分别对转基因油菜籽和大豆中外源CP4-EPSPS基因进行了检测.

  • 标签: 抗草甘膦油菜籽 抗草甘膦大豆 CP4-EPSPS PCR CP4-EPSPS基因 检测
  • 简介:阿达木单抗是一种抗肿瘤坏死因子α全人源单克隆抗体,可特异性结合人肿瘤坏死因子α,阻止其与效应细胞结合而发挥生物学效应,在风湿性关节炎、银屑病、强直性脊柱炎,克罗恩病以及一些自身免疫性疾病治疗上取得了广泛应用,本文仅就在这些疾病临床治疗进展进行综述.

  • 标签: 阿达木单抗 自身免疫性疾病 临床应用
  • 简介:提高消防装备效能一直是消防工作研究重点问题之一。从装备配置要符合实际需要、普及装备常识、确保特殊装备专人负责、强化装备维护保养以及加强人和装备结合方法研究五个方面进行了研究

  • 标签: 消防 装备 效能 研究
  • 简介:胸腺素α原(ProTα)是一种在哺乳动物细胞中广泛分布、结构保守酸性小分子蛋白,是胸腺素α1(Tα1)前体蛋白.目前在细胞内和细胞外均已发现了ProTα.在胞内,ProTα作为一种核蛋白,参与对细胞周期调节,促进细胞增殖;在胞外,ProTα通过潜在膜受体调节免疫应答,促进IFN-γ、TNF-α、IL-2等细胞因子产生,进而增强细胞和体液免疫应答.但该蛋白分泌机制、受体以及信号通路还有待研究.

  • 标签: 胸腺素Α原 胸腺素 免疫调节
  • 简介:生物碱是一类具有生理活性物质,是许多药用植物有效成分之一.如何从天然产物中提取、分离与鉴别生物碱引起了人们广泛关注,其提取、分离与鉴别的方法也在不断改进和发展.本文综述了近年来不同分类、提取、分离与鉴别方法在生物碱提取分离与鉴别应用与进展.随着人们对生物碱药用价值认识提高以及研究应用深入,将会获得更加高效、迅速、完善提取、分离与鉴别生物碱方法.

  • 标签: 生物碱 分类 提取 分离 鉴别
  • 简介:CD147分子是一种广泛表达于人体多种组织跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族。CD147在多种肿瘤细胞和组织中高表达,通过诱导基质金属蛋白酶(MMP)分泌促进了肿瘤浸润、转移。同时,CD147与炎症反应如类风湿性关节炎、动脉粥样硬化,以及细胞、组织分化和发育等密切相关。简要综述了CD147参与多种生理、病理过程。

  • 标签: CD147 基质金属蛋白酶 肿瘤 类风湿性关节炎 动脉粥样硬化
  • 简介:胸腺素β10(Tβ10)是胸腺素β家族成员。与Tβ4一样,Tβ10也是与细胞运动有关肌动蛋白隐蔽蛋白。研究发现Tβ10可能与某些肿瘤行为,如细胞增殖、细胞凋亡、血管生成、肿瘤转移等相关。目前细胞Tβ10作用分子机制尚不明确。有研究表明,Tβ10有差别地表达于胚胎发生和神经发育过程,在炎症及肿瘤发生时其表达量也有所上调,甚至过表达。我们简要综述了Tβ10研究进展,包括差异表达、功能、机制,以及在肿瘤治疗、创伤愈合等疾病中潜在应用

  • 标签: 胸腺素β10 肌动蛋白 差异表达 肿瘤治疗 创伤愈合
  • 简介:Bcl-2基因属于Bcl-2基因家族,其表达Bcl-2蛋白在细胞凋亡过程通过抑制线粒体细胞色素C释放,可明显地抑制细胞凋亡。由于在大规模细胞培养过程,细胞死亡以凋亡为主,所以可通过建立稳定过表达Bcl-2蛋白重组细胞株,以抑制细胞凋亡。同时,Bcl-2蛋白变化不但可预见肿瘤发生,而且通过药物降低Bcl-2含量对于肿瘤治疗也具有积极意义。本文综述了Bcl-2蛋白结构、功能、抗凋亡作用机理,以及目前在生物制药和临床方面的应用和前景。

  • 标签: BCL-2蛋白 代谢工程 抗癌药物
  • 简介:作为一种具有靶向性生物大分子,单克隆抗体始终是人们关注热点之一,被广泛用于治疗肿瘤、病毒感染和抗移植排斥等.但鼠源单克隆抗体临床应用受限于诱导产生人抗鼠抗体、肿瘤渗入量低、亲和力低和半衰期短等.随着分子生物学技术发展及其向各学科渗透,通过基因操作技术对抗体进行改造,可使其适用于多种疾病治疗.抗体人源化已经成为治疗性抗体发展趋势,同时各种抗体衍生物也不断涌现,它们从不同角度克服了抗体本身应用局限,也为治疗人类疾病提供了利器.本文简要介绍上述技术基本原理、特点和治疗性抗体研究进展.

  • 标签: 治疗性抗体 单克隆抗体 噬菌体展示技术