简介:患者女性,75岁。发现有糖尿病、高血压十余年。本次因“四肢青紫一年,加重伴双足多处溃疡、疼痛三月”入院,诉下肢肤温冷,足部溃疡处静息痛明显,无法下地行走。经内科保守治疗溃疡面积仍继续扩大,后转我科会诊。查体:双足肤色紫黑,肤温冷双足外侧缘及足跟部可见大小不等多个溃疡,最深部位达骨质。溃疡周围肤色发黑呈坏疽样。行双下肢动脉造影显示:双下肢远端动脉及足部动脉均已闭塞,足部血供仅靠少许侧支血管(见封三图5)。Wagner分级为2级。根据造影结果无法进行常规动脉重建术。经科室谨慎的讨论及征求患者本人及家属意见并签署知情同意书后,拟行自体骨髓间充质细胞移植术。患者在局麻下行骨穿抽出自体骨髓约40ral,并常规涂片检查排除造血系统疾患。骨髓经离心等处理后,分离出单个核细胞悬液进行增值培养到计量为左右。于2003年12月22日在导管室局麻下行双下肢动脉造影并通过造影导管将培养的骨髓干细胞注射到下肢动脉末端。术中无明显不适,术毕安返病房。术后三月随访患者足部溃疡基本愈合,双足肤色较前明显红润,肤温有所回升(见封三图6)。患者静息痛消失,日常生活中能自行行走。
简介:摘要目的探讨脑白质高信号(WMH)严重程度与胆红素水平的关系。方法连续纳入2018年1月至2019年6月郑州大学第二附属医院体检的484例健康受试者,排除急性心脑血管疾病、肝脏疾病、胆红素异常和其他导致脑白质高信号的疾病,进行一项横断面研究,比较脑白质高信号严重程度与胆红素的相关性,使用独立样本t检验、χ2检验、秩和检验检验其危险因素,将有统计学意义的指标纳入二元Logistic评分中,分析脑白质高信号的独立危险因素,通过Fazekas视觉评分测量脑白质高信号严重程度。结果轻度组患者年龄为(63.66±12.21)岁,重度组年龄为(78.37±10.36)岁,两组间比较[比值比(OR)=1.100,95%可信区间(CI):1.076~1.125,t=1.748, P<0.01];轻度组高血压患者183例(56.83%),重度组高血压患者为130例(80.25%),两组间比较(OR=1.907,95%CI:1.119~3.249,P<0.05)为脑白质高信号的独立危险因素,低胆红素水平是脑白质高信号的危险因素,校正其他相关因素影响后,以最低四分位数胆红素水平Q1为参照,Q1中轻度组为88例(56.45%),重度组为34例(43.55%),Q2轻度组86例(70.97%),重度组34例(29.03%),两组间比较(OR=0.418,95%CI:0.220~0.792,P<0.01),Q3轻度组81例(71.77%),重度组40例(28.23%),两组间比较结果为(OR=0.504,95%CI:0.265~0.957,P<0.05),差异有统计学意义。结论低胆红素水平为脑白质高信号的危险因素。
简介:摘要目的建立人真皮成纤维细胞(HDF)高糖老化模型,探讨人蜕膜间充质干细胞(dMSC)来源外泌体对高糖老化HDF增殖、迁移、凋亡的影响及其可能机制。方法采用实验研究方法。收集2021年1—3月解放军总医院第四医学中心收治的4例男性包茎患者(18~22岁)环切术后废弃包皮组织,分离培养获取原代HDF。取第6代HDF,按照随机数字表法分为低糖组和高糖组,分别采用低糖完全培养基和高糖完全培养基进行每72小时换液、不传代培养,10 d后取细胞,于接种后24 h,采用β-半乳糖苷酶试剂盒检测细胞衰老情况;于接种后48 h,采用蛋白质印迹法检测细胞衰老相关蛋白p16、p53表达情况;于接种后24、48、72 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖情况;于接种后48 h,采用脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况;于接种后24 h,采用Transwell实验测定细胞迁移能力。取人dMSC培养48~72 h,采用差速高速离心法获取其外泌体,采用透射电子显微镜观察dMSC外泌体形态,采用纳米颗粒追踪分析法检测dMSC外泌体的粒径分布,采用蛋白质印迹法检测dMSC外泌体标志蛋白CD9、肿瘤易感基因101(TSG101)的表达。取dMSC外泌体及前述高糖完全培养基诱导老化的HDF共孵育24 h,采用PKH67试剂盒检测细胞摄取外泌体的情况。取前述高糖完全培养基诱导老化的HDF,同前分为单纯高糖组、高糖+低浓度外泌体组、高糖+高浓度外泌体组,分别于高糖完全培养基中加入等体积的磷酸盐缓冲液、终质量浓度为50 μg/mL dMSC外泌体、终质量浓度为100 μg/mL dMSC外泌体进行常规细胞培养。分组后同前于对应时间点采用CCK-8法和EdU染色法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、细胞周期和凋亡及细胞迁移情况。根据前述结果,另取经高糖完全培养基诱导老化的HDF,分为单纯高糖组、高糖+高浓度外泌体组并同前处理。分组培养48 h,采用实时荧光定量反转录PCR法检测单纯高糖组和高糖+高浓度外泌体组细胞衰老相关的微小RNA-145-5p(miR-145-5p)、miR-498、miR-503-5p及其靶基因钙/钙调素依赖性蛋白激酶1D(CAMK1D)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN基因)和细胞周期蛋白D1的mRNA表达情况。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD-t检验和独立样本t检验。结果接种后24 h,高糖组HDF β-半乳糖苷酶阳性染色率为(38.4±4.2)%,明显高于低糖组的(16.5±2.2)%(t=4.65,P<0.01)。接种后48 h,高糖组HDF的衰老相关蛋白p16和p53的表达量均明显高于低糖组(t值分别为11.85、3.02,P<0.05或P<0.01)。接种后24、48、72 h,高糖组HDF的增殖活性均明显低于低糖组(t值分别为4.13、9.90、15.12,P<0.01)。接种后48 h,高糖组HDF的EdU阳性染色率明显低于低糖组(t=3.83, P<0.05)。接种后48 h,高糖组HDF周期的G2/M+S亚群在3个亚群(G0/G1、S和G2/M)的占比明显低于低糖组(t=8.74,P<0.01)。接种后24 h,高糖组HDF穿过Transwell滤膜到达下室的细胞数量为(37±6)个,明显少于低糖组的(74±7)个(t=8.42,P<0.01)。接种后48 h,高糖组HDF凋亡率明显高于低糖组(t=8.48,P<0.01)。dMSC外泌体为边缘清晰、大小分布均匀的杯状或者圆形囊泡,粒径基本处于80~200 nm。dMSC外泌体标志性蛋白CD9、TSG101表达均呈阳性。共孵育24 h,外泌体被HDF摄入胞内,主要分布于细胞核周围。分组培养24、48、72 h,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF增殖活性均明显高于单纯高糖组(t值分别为6.36、6.10、7.76,8.92、12.17、10.74,P<0.01),高糖+高浓度外泌体组HDF增殖活性均明显高于高糖+低浓度外泌体组(t值分别为7.92、4.82、4.72,P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组比较,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF EdU阳性染色率均明显升高(t值分别为5.32、9.88,P<0.01);与高糖+低浓度外泌体组比较,高糖+高浓度外泌体组HDF EdU阳性染色率显著升高(t=5.27,P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组比较,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF中的G0/G1期亚群占比均显著降低(t值分别为3.81、4.31,P<0.05),G2/M+S亚群占比均明显升高(t值分别为3.81、4.31,P<0.05)。分组培养24 h,与单纯高糖组相比,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF穿过滤膜的数量均明显增多(t值分别为10.14、13.39,P<0.01);与高糖+低浓度外泌体组相比,高糖+高浓度外泌体组HDF穿过滤膜的数量明显增多(t=6.27,P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组比较,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF凋亡率均明显降低(t值分别为3.72、5.53,P<0.05或P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组相比,高糖+高浓度外泌体组HDF的miR-145-5p、miR-498 mRNA表达量均明显上升(t值分别为13.03、8.90,P<0.01),miR-503-5p mRNA表达量明显下降(t=3.85,P<0.05);高糖+高浓度外泌体组中HDF的CAMK1D、PTEN基因mRNA表达量均明显低于单纯高糖组(t值分别为8.83、5.97,P<0.01),细胞周期蛋白D1 mRNA表达量明显高于单纯高糖组(t=4.03,P<0.05)。结论人dMSC来源外泌体可显著提高高糖老化HDF的增殖和迁移能力,抑制其凋亡。这可能与HDF内miR-145-5p和miR-498表达增高抑制了CAMK1D和PTEN基因的表达及miR-503-5p表达下降促进了细胞周期蛋白D1的表达有关。
简介:摘要目的探讨角质层含水量与透皮失水率的相关性。方法2021年10月至2022年6月在普宁市公共健康医疗中心、2所幼儿园及2所小学招募≤ 17岁健康儿童。用皮肤生理功能测量仪测量健康儿童左前臂屈侧和右胫前部位的透皮失水率和角质层含水量,采用Pearson相关分析法分析不同年龄、性别儿童的透皮失水率与角质层含水量的相关性。结果共招募1 396例健康儿童,年龄1个月至17岁,男783例、女613例。在1 ~ < 12个月组,除男童前臂部位的皮肤透皮失水率与角质层含水量无显著相关性外,男童胫前和女童前臂及胫前部位的透皮失水率与角质层含水量均呈正相关(r值为0.283、0.404、0.420,均P < 0.05);在1 ~ 2岁组,男童前臂和女童胫前部位的皮肤透皮失水率与角质层含水量无显著相关性,而男童胫前和女童前臂部位的透皮失水率与角质层含水量均呈正相关(r值为0.370、0.419,均P < 0.01);在3 ~ 5岁组和6 ~ 11岁组,除6 ~ 11岁组男童胫前的透皮失水率与角质层含水量无显著相关性外,两组男女性其他部位的透皮失水率与角质层含水量均呈显著正相关(r值为0.172 ~ 0.293,均P < 0.05);12 ~ 17岁组,男女性前臂及胫前部位的透皮失水率与角质层含水量均呈显著正相关(r值为0.269 ~ 0.485,均P < 0.001)。结论健康儿童前臂屈侧和胫前部位的透皮失水率与角质层含水量呈正相关,且随年龄增大,此正相关性有增加趋势。
简介:摘要目的评估振幅整合脑电图(amplitude-integrated electroencephalography, aEEG)在严重高胆红素血症新生儿脑损伤的监测意义。方法回顾性纳入2018年10月至2020年6月在广州市妇女儿童医疗中心新生儿科完成aEEG监测的严重高胆红素血症足月儿223例。比较aEEG正常组(n=180)和aEEG异常组(n=43)之间的血清胆红素水平、急性胆红素脑病(acute bilirubin encephalopathy, ABE)发生率,分析aEEG对ABE的早期诊断作用以及与脑干听觉诱发电位(brain stem auditory evoked potential, BAEP)和头颅MRI的相关性。采用两独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、χ2检验进行组间比较,采用Goodman-Kruskal Gamma进行关联性分析。结果aEEG异常组血清总胆红素水平[(536.2±154.6)与(422.1±103.0)μmol/L,t=-5.109,P<0.001]和ABE发生率明显高于aEEG正常组[62.8%(27/43)与9.4%(17/180),χ2=62.366,P<0.001]。aEEG对ABE诊断的灵敏度为61.3%,特异度为91.1%。随着ABE由警告期向痉挛期进展,aEEG电压抑制越严重(Gamma=0.847,P=0.003),睡眠觉醒周期越紊乱(Gamma=0.941,P<0.001),痫性放电越频繁(Gamma=0.976,P<0.001)。223例中148例完成BAEP检查,BAEP异常组aEEG异常率明显高于BAEP正常组[32.7%(33/101)与6.4%(3/47),χ2=12.040,P=0.001],且BAEP重度异常组电压异常率高于BAEP轻度异常组[20.6%(7/34)与2.6%(1/38),χ2=5.858,P=0.016],BAEP重度异常组痫性放电率明显高于BAEP轻度异常组[32.4%(11/34)与2.6%(1/38),χ2=11.413,P=0.001]和BAEP中度异常组[32.4%(11/34)与3.5%(1/29),χ2=8.480,P=0.004]。223例中108例完成MRI检查,胆红素脑损伤特征性影像学改变组aEEG监测痫性放电率明显高于MRI正常组[28.6%(10/35)与2.6%(1/39),χ2=9.864,P=0.002]和其他影像学改变组[28.6%(10/35)与2.9%(1/34),χ2=8.451,P=0.004]。结论aEEG监测对于ABE的诊断有一定帮助,并且能反映病情的严重程度。高胆红素血症所致的脑损伤在aEEG监测上主要表现为痫性放电增加且多为频繁放电。aEEG监测与BAEP及MRI检查结果具有一定相关性。
简介:目的探讨羊膜间充质干细胞(amniotilmesenehymalstemcells,AMSCs)对严重烧伤大鼠早期肾脏损害的作用及相关作用机制。方法体外分离培养大鼠AMSCs,流式细胞仪检测细胞表面分子标记物。36只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为假伤组、单纯烧伤组、AMSCs治疗组。处理后48h收集3组大鼠肾脏组织标本及腹主动脉血,ELISA法检测血肌酐、尿素氮水平,实时荧光定量RT-PCR法检测组织中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-10的mRNA表达水平。结果分离培养的AMSCs传至第三代经流式细胞仪检测,均表达CD29、CD44、CD90、CD105,阳性率分别为96.4%、89.8%、94.2%、98.3%,而CD34阳性率为2.1%。单纯烧伤组大鼠血清肌酐、尿素氮含量高于假伤组(P〈0.05)。AMSCs治疗组大鼠肾脏组织中血肌酐和尿素氮含量均显著低于单纯烧伤组(P〈0.05)。单纯烧伤组大鼠肾脏组织中TNF-α、caspase-3、IL-1β的mRNA表达量高于假伤组的(P〈0.05)。AMSCs治疗组大鼠肾脏组织中IL-1β、caspase-3、TNF-α的mRNA表达量低于单纯烧伤组(P〈0.05);AMSCs处理组大鼠肾脏组织中IL-10的mRNA表达量显著高于假伤组、单纯烧伤组(P〈0.05)。结论AMSCs可显著降低烧伤大鼠肌酐、尿素氮水平,减轻肾脏组织凋亡蛋白caspase-3的表达,降低炎症因子IL-1β和TNF-α表达、促进抑炎因子IL-10的表达,可能对严重烧伤大鼠肾脏损伤具有保护作用。
简介:摘要近些年,在麻醉学领域不断进步和发展中出现快通道麻醉概念,其是基于理想化麻醉技术,并利用标准化流程,以便于接受大手术治疗患者的重要脏器尽早恢复,这也是快通道心脏手术的关键组成。本文对快通道麻醉在非体外循环冠状动脉搭桥术的应用研究进展进行综述。
简介:目的:探讨原发性开角型青光眼(primaryopenangleglaucoma,POAG)早期上下半视盘周围视网膜神经纤维层(retinalnervefiberlayer,RNFL)的变化特征。方法:临床观察研究,研究对象为2012-05/2014-05在我院门诊确诊为原发性开角型青光眼早期患者30例39眼和健康成人20例40眼,使用Humphrey视野计和光学相干断层成像术(opticalcoherencetomography,OCT)检查,分别记录视野平均缺损(meandefect,MD)、青光眼半视野检测(glaucomahemifieldtest,GHT)、眼压、C/D比值及视盘周围FNFL厚度。使用SPSS18.0统计软件对测量值进行统计分析,计量资料组间比较采用t检验。结果:两组上半视盘各钟点位的RNFL厚度减去下半视盘相对应钟点位的RNFL厚度,两组间比较,仅上鼻-下鼻的差值具有统计学意义(t=2.526,P=0.014),其余上下半视盘相对应钟点位RNFL厚度的差值比较,两组间均无统计学意义(均为P〉0.05)。结论:原发性开角型青光眼早期上下半视盘周围RNFL存在不对称性变化,上鼻部位(右眼1颐00位,左眼11颐00位)的RNFL较下鼻部位(右眼5颐00位,左眼7颐00位)的RNFL更容易受损变薄。
简介:摘要目的探讨孕产妇及家属在严重产科并发症后的情感体验及照顾体验的有关质性。方法纳入2017年1月至2019年1月在深圳市龙华区中心医院进行分娩的孕产妇100例,将其按照是否发生严重产科并发症分成并发症组(23例)与无并发症组(77例)。比较两组孕产妇及其家属的情感体验以及照顾体验情况。并通过Pearson分析孕产妇家属的HAMA、HAMD评分与ECI评分的相关性。结果并发症组孕产妇及家属的HAMA、HAMD评分均显著高于无并发症组,差异有统计学意义(均P<0.05)。并发症组孕产妇家属的消极评价评分显著高于无并发症组,而积极评价评分显著低于无并发症组,差异有统计学意义(均P<0.05)。经Pearson相关性分析显示,孕产妇家属HAMA、HAMD评分与消极评价评分均呈正相关关系,而与积极评价评分均呈负相关关系,差异有统计学意义(均P<0.05)。工作状况为在职、经济状况紧张的孕产妇家属消极评价评分均显著高于工作状况为无/退休、经济状况宽裕的家属;而积极评价均显著低于工作状况为无/退休、经济状况宽裕的家属,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论孕产妇及家属在严重产科并发症后均存在一定程度的焦虑、抑郁等负性情绪,且家属的照顾体验相对较差,值得临床重点关注。