简介:第一条为了保护和合理利用种质资源,规范品种选育和种子生产、经营、使用行为,维护品种选育者和种子生产者、经营者、使用者的合法权益,提高种子质量水平,推动种子产业化,促进种植业和林业的发展,制定本法。
简介:玻璃化法作为简单方便的超低温保存方法之一,目前已成功地应用于植物茎尖、胚性细胞、原生质体、悬浮细胞等多种单一组织或细胞培养体系,但尚未见对幼苗这种复合组织的保存报道.本文研究了拟南芥(Arabidopsisthaliana,Landsbergerecta)幼苗的玻璃化保存程序并发现了一些有价值的研究现象.幼苗来自萌发的种子,种子消毒后播种在MS培养基上,4℃处理48h后转入25℃,10h光周期,萌发不同天数为实验材料.玻璃化程序包括:1)预处理———用2M甘油+04M蔗糖在20℃处理20min;2)脱水处理———用玻璃液PVS2(30%w/v蔗糖+15%w/v乙二醇+15%w/v二甲基亚砜+含04M蔗糖的MS)0℃处理50min;3)冷冻融化———玻璃液及幼苗一起投入液氮(LN2)保存,20℃室温自然融化;4)置换———用MS+12M蔗糖20℃处理30min,成活力检查;幼苗转到MS培养基培养5天,观察再生长状况.10天后转到培养土中,在生长箱中长到结实.结果表明:1)使用完整的程序,冻融后成活率最高,为765%;玻璃液处理是成功的关键,省去此处理成活率为0;冻融是造成玻璃化保存成活率降低的主要因子;2)由萌发0~2天的种子形成的幼苗便使用该技术,冻存融化后成活率分别为88%,838%和765%,结实正常;3)
简介:用修改了的异硫氰酸胍法从两种森林昆虫Closteraanastomosis和Saperdapopulnea的不同组织中快速提取总RNA.电泳检测和cDNA合成分析结果表明,RNA未降解.经紫外分光光度计检测,A260/A280在1.8到2.0之间,表明RNA的纯度很高.用RT-PCR合成的双链cDNA的长度大于2kb,表明mRNA的完整性.用PCR的方法克隆了C.anastomosisβ肌动蛋白和几丁质酶的基因片段,表明RNA可用于其它分子操作.使用这个方法,在4个小时内可至少从8个样品中提取RNA并进行电泳分析.这些结果表明用这个修改后的一步法提取昆虫总RNA是省时,省钱和有效的.