简介：目前,在供体器官短缺的情况下,大家公认猪是最合适的异种器官和组织的提供者,用猪肝细胞治疗急性肝衰病人已有报道.如何将肝细胞最大限度完整地、无损伤地分离出来,这是非常关键和重要的一步.我室在进行猪肝细胞的分离中,逐渐探索出一套比较行之有效的方法.材料与方法:采用中国实验用小型猪,常规麻醉、消毒、开腹,用D-Hank′s液进行肝脏原位灌注,再用0.02%EDTA-Hank′s液(37℃)灌注18～20min,摘取肝脏行多点灌注5min,置肝脏于60目钢网上,用直剪迅速剪开肝脏被膜,用镊子夹起轻轻抖动,并用1640液冲洗,边抖动边冲洗,使细胞滤出漏于烧杯中.与此同时,用剪刀把肝组织剪成小块,再用玻璃注射器芯轻轻研磨,边研磨边冲洗,操作要轻,并保持无菌,收集肝细胞,离心洗涤三次,并逐级用80目、100目、120目、150目钢网过滤.分离出的肝细胞进行计数、台盼蓝拒染试验检查、PAS染色、葡萄糖-6-磷酸酶染色及电镜检查.结果:肝细胞存活率90±1.3%,PAS染色显示肝糖元丰富,葡萄糖-6-磷酸酶染色显示酶的活性良好.电镜观察,肝细胞的线粒体、内质网等亚显微结构未见异常.对于猪肝细胞的分离,国外文献报道多采用Ⅳ型胶原酶循环灌注法,但费用很昂贵.在实践中,我们用EDTA代替胶原酶,采用肝脏原位灌注+多点灌注+机械研磨的方法,取得了较为满意的效果.此法与胶原酶灌注法比较,从分离的肝细胞数量、活力、肝糖元及细胞中一些酶的活性都与胶原酶法无显著差异,且光镜及电镜观察,显示细胞形态及亚细胞结构未见异常.我们认为此方法易于控制,价格低廉;而胶原酶法容易消化过度,造成细胞膜破损,或消化不完全造成多个细胞连在一起,且费用昂贵.实验证明,改良的猪肝细胞分离方法为用猪肝细胞治疗急性肝衰病人的研究提供了一个可行的方法.

简介：树突状细胞(DC)是一类专职性抗原呈递细胞,不仅启动免疫反应和诱导免疫耐受,还在调节免疫反应与免疫耐受的平衡中起决定性作用.肝脏因其固有的移植耐受性而在免疫耐受研究中深受关注,肝移植物容易存活,伴有肝移植的其他器官(如心脏、肾脏等)移植存活时间也较其单独移植明显延长.最近有人提出,在肝移植耐受中DC可能起关键作用,但因其难于分离培养,国外仅美国Pittshburgh大学在做相关研究,国内尚未见报道.材料与方法:1.肝非实质细胞的分离:取6～8w小鼠,麻醉后无菌开腹,门静脉插管,用前灌液(PBS+肝素500μ/100ml)灌流2～3min,改用注射器缓慢推注2mlⅣ胶原酶(GIBCOL公司,0.05%);取材后剪碎,15mlⅣ胶原酶液(0.05%)体外消化30min.尼龙网过滤,PBS液清洗(400g×5min离心)两次,稀释成4～5ml细胞悬液.下铺细胞分离液Percoll(Pharmacia公司)制成的不连续密度梯度液,500g×30min离心后,细胞分三层,先吸弃最上层细胞碎片,再吸取两液体界面的肝非实质细胞,避免吸到最底层的血细胞,RPMI1640液(GIBCOL公司)清洗两次,400g×5min离心,即可得肝非实质细胞.2.肝树突状细胞(HDC)的培养:将肝非实质细胞用含灭活的10%胎牛血清(GIBCOL公司)的RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2.5×106/ml,接种于24孔培养板,每孔1ml,加GM-CSF(GIBCOL公司)10ng/ml.培养第三天轻轻吸去未贴壁细胞,换液.后隔天半量换液,培养第7～8d可收取HDC.结果与讨论每只小鼠可得肝非实质细胞约1.0～1.5×107个,细胞大小不一,类型较多.培养24～48hr后,有大量细胞贴壁生长,少量HDC前体细胞半贴壁状散在分布,经筛选、扩增,第4d时HDC数量增多,出现6～8个细胞组成的小集落.第7～8d,HDC数量增多,此阶段细胞有一明显的增殖高峰,有大量半贴壁半悬浮的集落,集落表面的细胞有小的突起.第7～8d,每只小鼠HDC得率约为2～3×106个.因HDC难于分离培�

简介：长期以来,Guguen等[1]的两步胶原酶灌注法分离获得肝细胞的方法,几乎成了肝细胞分离的经典方法;在此基础上又发展了多种不同的培养方法,如在培养瓶内加纤连蛋白(febronectin)以促进肝细胞附壁[2],添加生长因子于培养基促其生长等.但上述方法步骤繁琐,成本较高,且两步胶原酶灌注法主用于大鼠肝细胞的分离,不适于新生鼠肝细胞的分离,甚至分离成年小鼠肝细胞,都因为血管的纤细,在实际应用中也很困难.

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简介：作为重要的医学基础课的系统解剖学教学，面对高校扩招，教学改革深入，课时压缩的现状，如何从优化教学内容、改进教学方法、改善教学条件及提高教师素质等方面着手，进行有益的改进及尝试，以提升系统解剖学的教学效果。本文结合教学实践，从以上几点提出一些教学体会。

简介：随着医学教育教学改革的深化，如何结合课程特色采用有效的教学方法，以提高学生的学习效果，越来越受到高校教师的重视。系统解剖学作为医学专业基础课程，其重要性对学生而言是不言自明，很多学生一走进医学院校大门即知道这门课程非常重要。学生学习的内部动机是不缺乏的。但我们在教学中发现，以往多历届学生均出现一个共同现象：一进入脉管系统特别是神经系统后，便反映“解剖知识太难记了”、“记住了后面的知识，又忘记了前面的知识”、“名词太多、内容较散”、“雷占内容很多，感觉是抓不住重点”，等等。

简介：近年来,用于系统解剖学实验的尸体来源越来越少,而教学使用尸体标本的数量和价量却越来越多和越高.针对这一矛盾,我们从系统解剖学实验标本的设计与制作入手,根据教学大纲要求,用较少的尸体,设计制作较好的标本,来满足教学的需求.下面以一个实验室而言,谈点多年来的工作体会.

简介：阿尔茨海默病(Alzheimer'sDisease)是德国神经病理学家AloisAlzheimer于1907年首先加以描述,后人遂以其姓氏命名之,患者临床上主要表现为进行性加重的中枢性认知功能障碍及近远期记忆损害,病理上以大脑皮层、海马等脑区神经元减少、老年斑(SPs)及神经原纤维缠结(NFT)形成等典型性改变为特点.AD患者脑内乙酰胆碱(Ach)含量显著下降,其他神经递质,如多巴胺(DA)等,也会出现不同程度下降.近年来研究表明,中枢多巴胺系统在学习、记忆、认知及情感形成的过程中起着重要的作用,同AD发生、发展有着较密切的关系[1～2].

简介：目的评估采用小夹板外固定、石膏外固定治疗Colles骨折的优劣。方法通过检索CNKI、万方、维普、pubmed等文献数据库，收集应用随机对照试验进行小夹板外固定及石膏外固定治疗Ccolles骨折疗效对比的文献并进行系统评价，采用Revman5．3软件从疗效、并发症、愈合时间3方面对两种外固定方法进行疗效对比研究。结果①研究纳人10项随机对照试验，共纳入1166例患者（小夹板外固定组592例、石膏外固定574例）；②小夹板外固定在colles骨折固定愈合中优良率显著高于石膏固定EOR=2．85（1．73～4．7），P〈0．00013；③小夹板外固定并发症发生率显著低于石膏外固定[OR=0．33（O．20，0．56），p〈0．00017；④小夹板愈合时间低于石膏外固定但检验尚不显著[加权均数差WMD=-3．87（-8．93，1．18）天，P=0．13〉0．os]。结论小夹板外固定在Colles骨折治疗中有效率高于石膏外固定，同时并发症发生率、愈合时间均低于石膏外固定，通过文献检索目前各研究采用临床疗效评估标准不唯一，导致对Colles骨折疗效系统评价样本量较少，后期有待通过高质量、大样本的临床研究进一步验证。

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简介：本文介绍了Motie数码显微互动系统的特点，及其在医学形态学实验教学中的应用。结果显示，Motic数码显微互动系统的应用能克服传统实验教学互动少、缺指导、效率低的特点。经过两个学期的实验教学，学生的学习成绩和实验动手操作能力有了很大的提高，医学形态学实验教学水平得到明显地提升。

简介：系统解剖学是医学生学习的第一门医学课程,对建立系统的医学知识和思维方式具有重要的作用,而自主学习能力对医学生的未来职业发展具有重大影响,如何在系统解剖学教学中培养医学生的自主学习能力是一个值得探讨的问题。在解剖学教学中充分利用互联网教学平台等资源,开展翻转课堂,突出学生的学习主体地位,培养学生自主学习意识,逐步培养医学生的自主学习能力。

简介：中枢神经系统内从丘脑到延髓的整个脑干区域分布着许多氧化学感受器,并组成了一个复杂的感受氧气的网络,它们在氧浓度变化的过程中对心血管与呼吸系统起着重要的调节作用。目前关于中枢氧感受器化学传递过程的细胞机制中,仅有颈动脉体血管球细胞和肺血管平滑肌细胞的保护机制,而中枢性氧感受神经元需要何种的离子通道和氧感受器传导缺氧的机制目前还不很清楚,本文主要对此方面目前的相关研究作简要综述。

简介：目的探讨不同年龄发病的系统性红斑狼疮的临床及免疫指标特点。方法回顾性分析108例不同年龄发病（老年发病48例,非老年发病60例）的系统性红斑狼疮的临床及实验室资料。结果非老年发病组抗dsD-NA抗体、Sm抗体、抗SSA、SSB的阳性率,血液系统、肾脏损害发生率显著高于老年发病组（P〈0.05）;老年发病组肌肉及关节受累发生率高于非老年发病组（P均〈0.01）。结论老年发病较非老年发病的SLE患者体内有更弱的自身免疫应答,病情侵袭性更低。

简介：本文针对全加等卫校教材《解剖学及组织胚胎学》中“神经系统”一章的两个问题提出不同看法，并对“神经系统”的编写提出几点建议，与同仁磋商。

简介：目的探讨抗C1q抗体（C1qAb）与系统性红斑狼疮（SLE）患者病情活动的相关性及其临床意义。方法用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测98例SLE患者、108例其他风湿病患者及67例健康体检者中血清抗C1qAb，并对SLE患者的其他实验室检测结果进行统计学分析。结果SLE患者血清中抗C1qAb阳性率显著高于其他风湿病及健康体检者（P〈0．05）；其中，抗C1qAb阳性的SLE患者肾损发生率、活动性狼疮发生率及抗dsDNA抗体的阳性率均高于抗C1qAb阴性患者（P〈0．05）。结论血清抗C1qAb与SLE肾脏损害密切相关，其还可作为判断SLE病情活动的指标。

简介：人体解剖学是一门重要的医学基础理论课,而中枢神经系统又是解剖学教学中的重点和难点.此部分教学复杂、抽象,名词繁多,学生学习时负担重、压力大,难懂且易忘.而目前高校学生的扩招和教学时数的缩减等更增添了这部分内容的教学难度.

简介：将医学学习指导的科学原理运用于系统解剖学教学中，把学员式评论复习，精讲性主导教学，合作式自主学习，自学指导同科学思维，认知技能，记忆能力的培养有机地结合在一起，创立了系统解剖学的评论性思维合作教学法，它能够使绝大多数需要指导的医学生（系统解剖学教学中占总人数的77．05％）在各方面受益；（1）显著地促进医学生特有的形态学认知技能水平的提高，使76．54％的学生得到充分的支能培养；（2）促进医学生解剖学知识量的增加，促进医学生理论思维与表达能力的培养，可使40．59％的学生理论知识和思维表达能力明显提高，使极差生从传统教学法的10％以上降至接近于零；（3）有利于医学生学习兴趣，自主学习技能和协作技能的培养，使52．7％的学生学习兴趣明显提高并长期保持，它表明，根据医学学习原理进行分学科系统的学习指导应是各学科教学改革研究中极为重要的领域。