简介:摘要目的探讨环状RNA(circRNA)-PCAC1在胰腺导管腺癌中的表达水平及其与患者临床病理特征、预后的关系。方法鉴定circRNA-PCAC1,并通过功能实验观察其对胰腺导管腺癌侵袭转移能力的影响。采用RT-PCR检测76例胰腺导管腺癌组织与配对癌旁组织的circRNA-PCAC1表达水平,Cox回归模型和Kaplan-Meier曲线法分析circRNA-PCAC1与患者临床病理特征和预后的关系。结果功能实验证实circRNA-PCAC1过表达显著促进胰腺导管腺癌侵袭转移能力。胰腺导管腺癌组织中circRNA-PCAC1的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。circRNA-PCAC1过表达与胰腺导管腺癌患者不良预后相关(P<0.05)。circRNA-PCAC1是胰腺导管腺癌患者总生存期(HR=1.733,95% CI:1.066~2.991,P=0.030)和无病生存期(HR=1.636,95% CI:1.090~2.811,P=0.042)的独立影响因素。结论circRNA-PCAC1在胰腺导管腺癌中高表达并促进胰腺导管腺癌侵袭转移,提示其可能成为胰腺导管腺癌临床治疗的新靶点。
简介:摘要ciRS-7是一种特殊的环状RNA分子,在哺乳动物和人类的细胞中大量存在,在基因的转录与翻译中起到重要作用进而参与调控多种生命活动。ciRS-7是近年来RNA领域最新的研究热点。ciRS-7通过调控多条信号通路在细胞中发挥特定作用,将细胞外的分子信号经细胞膜传入细胞内发挥效应。ciRS-7富含MicroRNA(miRNA)结合位点,在细胞中作为miRNA的分子海绵(miRNA sponge),通过竞争性结合miRNA,抑制miRNA的功能,进而发挥其在细胞中的功能。文章对ciRS-7在细胞中的功能及调控机制方面的最新国内外研究进展进行综述。
简介:摘要胰腺癌起病隐匿、进展迅速、预后极差,在我国发病人群有年轻化的趋势。早期诊断和精准治疗能有效地改善胰腺癌患者的预后,延长患者的生存期。因此,探索新的诊断方法和开发新的药物靶点依然是胰腺癌研究的关键点。环状RNA(circRNA)作为一类重要的非编码RNA分子,在多种恶性肿瘤中被证实与肿瘤的发生、发展、预后相关。由于其结构稳定、分布广泛、组织特异等特点,circRNA作为分子诊断标志物和药物靶点比其他非编码RNA更有优势。由于circRNA与外泌体的密切联系,近年来外泌体相关研究能进一步推动circRNA在肿瘤领域的临床转化。本文就circRNA近年来的研究进展作一综述,并着重阐述其在胰腺癌领域的研究现状和应用前景。
简介:摘要环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种具有环状结构的RNA。circRNA独特的结构赋予了其多种细胞生物学功能与特性,成为近年来的研究热点。circRNA能通过微小RNA(microRNA,miRNA)海绵、RNA结合蛋白、肽段翻译以及调控基因转录等机制发挥作用。研究发现,circRNA与椎间盘退变、脊髓损伤、脊柱侧凸以及关节突关节炎存在一定的联系。利用生物信息学技术以及分子生物学技术,进行疾病组织的基因芯片或者高通量测序,预测并挖掘与疾病相关的circRNA,可以评估circRNA是否能够作为脊柱脊髓相关疾病的分子生物学标志。在明确circRNA作用的基础上,制定相应的治疗策略,在实验动物体内进行验证,为脊柱脊髓相关疾病的基因治疗提供理论依据。目前,circRNA在脊柱脊髓相关疾病中的研究相比其他领域尚显不足,主要研究方向集中在circRNA的miRNA海绵机制。由于脊柱外科涉及的疾病类型多样,相应的circRNA研究进展也有所差异。基因芯片和高通量测序技术的发展极大地推进了circRNA的研究,能否利用现有的公共数据库资源对研究脊柱脊髓相关疾病也具有重要意义。本文对目前circRNA在脊柱脊髓相关疾病中的研究情况作一综述,旨在帮助科研人员加深对circRNA在脊柱脊髓疾病中的作用的认识。
简介:摘要目的探讨环状RNA-7(circularRNA, ciRS)-7在食管鳞癌细胞放疗抵抗中的作用及生物学机制。方法采用慢病毒转染食管鳞癌细胞系KYSE410和KYSE510构建ciRS-7敲降细胞系(分为正常对照组和sh#1组、sh#2组)。不同剂量射线(2 Gy组、4 Gy组、8 Gy组)照射上述细胞,收集各组细胞染色,流式细胞术检测活细胞比例。双荧光素酶报告系统检测ciRS-7与微小RNA(microRNA,miR)-7的调控关系;KYSE410细胞分正常组、ciRS-7敲降组,RT-qPCR检测miR-7表达。shRNA转染KYSE410细胞,分为干扰组(正常对照组、敲降ciRS-7组);过表达组(ciRS-7和miR-7同时过表达组、阴性对照组、miR-7过表达组),蛋白质印迹法检测各组中B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(bcl-2)的表达。两组间比较采用独立样本的t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果KYSE410细胞sh#1组(0.36±0.03)、sh#2组(0.37±0.12)ciRS-7表达量低于正常对照组(1.00±0.01, t=24.460、8.910, P<0.05); KYSE510细胞sh#1组(0.40±0.08)、sh#2组(0.34±0.08)ciRS-7表达量低于正常对照组(1.00±0.08, t=8.514、9.550, P<0.05),差异均有统计学意义。4 Gy射线照射后,KYSE410细胞sh#1组[(37.00±3.07)%]、sh#2组[(39.50±0.70)%]活细胞比例低于正常对照组[(63.50±6.36)%, t=7.400、5.301, P<0.05]; KYSE510细胞sh#1组[(39.00±8.48)%]、sh#2组[(39.50±0.70)%]活细胞比例低于正常对照组[(73.50±6.36)%, t=4.600、7.509, P<0.05]。8 Gy射线照射后,KYSE410细胞sh#1组[(22.50±3.53)%]、sh#2组[(39.50±0.70)%]活细胞比例低于正常对照组[(50.50±2.12)%, t=9.604、11.800, P<0.05]; KYSE510细胞sh#1组[(33.00±2.82)%]、sh#2组[(31.00±2.82)%]活细胞比例低于正常对照组[(60.50±2.12)%, t=11.000、11.800, P<0.05],差异均有统计学意义。KYSE410细胞过表达ciRS-7组(1.00±0.23)的miR-7表达低于正常对照组(0.54±0.08, t=3.191, P<0.05),双荧光素酶报告系统证实ciRS-7吸附结合miR-7。同时过表达miR-7及ciRS-7组的bcl-2表达高于过表达miR-7组(0.59±0.11, t=6.013, P<0.05)、敲降ciRS-7组(0.83±0.08, t=3.717, P<0.05),差异均有统计学意义。结论ciRS-7通过靶向miR-7促进食管鳞癌细胞的放疗抵抗。
简介:摘要多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,POCS)是临床常见的生殖内分泌疾病,发病率逐年增高。PCOS的发生发展与多种因素有关,其中遗传因素可能起着关键作用。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种新型的通用且多样化的内源非编码RNA。circRNA的3'和5'末端可以通过共价键连接在一起,导致其形成环化结构。此外,circRNA在RNA核酸外切酶介导下,能够抵抗降解,保持了高度稳定性。circRNA还具有细胞特异性、组织特异性和时序特异性。与微小RNA相比,circRNA是更理想的疾病生物标志物,为后续治疗各种疾病提供了新的靶点。越来越多的研究表明circRNA与PCOS的病理生理有关,在内分泌激素分泌、卵泡发育、颗粒细胞增殖与凋亡、遗传倾向等中发挥作用,参与了PCOS发生发展的各个环节。本文综述了近年来circRNA与PCOS关系的相关研究进展,希望能为PCOS的诊断和治疗研究提供新的思路。
简介:摘要环状RNA(circRNA)是真核生物中普遍存在的一类特殊的非编码RNA分子,呈闭合环状结构,具有高度的保守性和稳定性,在多种疾病中具有调节作用。circRNA可参与调控视网膜炎症、细胞凋亡、血管生成以及氧化应激反应等,在眼部发育及疾病进展中发挥着重要调控作用。CircRNA的改变可能早于眼底改变,因此在组织、唾液、血液和外泌体中检测到的circRNA有望作为视网膜疾病(如青光眼、糖尿病视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等)的诊断及预后判定的生物标志物。对circRNA表达的干预可显著影响血管内皮细胞的生物学功能,调控血管通透性,有望作为一种基因治疗手段为视网膜疾病的治疗提供新方向。(国际眼科纵览,2020, 45: 455-458)
简介:摘要目的探讨环状RNA circHIPK3对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞中的表达及其在NB进度中的作用。方法采用实时定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCR)检测人NB细胞系SH-SY5Y、SK-N-SH和胚肾细胞系HEK-293中circHIPK3的表达,并选取circHIPK3表达量相对更高的NB细胞进行circHIPK3的功能实验。用干扰小RNA转染NB细胞,并分为circHIPK3敲降组(si-circHIPK3组)、阴性对照组(si-NC组)。通过CCK-8、平板克隆形成实验、划痕实验、Transwell侵袭实验检测circHIPK3对NB细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果circHIPK3在人NB细胞系SH-SY5Y和SK-N-SH中的表达量分别为6.06±0.11和4.94±0.26,均显著高于正常人胚肾细胞HEK-293中的1.00±0.01,且差异均有统计学意义(P均<0.05)。最终选取SH-SY5Y进行后续试验。CCK-8实验结果显示,si-NC组0、24、48、72、96 h时OD值分别为0.33±0.01、0.55±0.01、0.76±0.01、1.22±0.02和1.55±0.02,si-circHIPK3组各相同时间点OD值分别为0.33±0.02、0.44±0.01、0.51±0.01、0.75±0.01和0.85±0.01,组间比较,除0 h时外,其余时间点差异均有统计学意义(P均<0.01)。平板克隆形成实验结果显示,si-NC组的细胞克隆数为(112.67±5.51)个,si-circHIPK3组为(55.33±4.16)个,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示,si-NC组伤口愈合率为(4.0±0.1)%,si-circHIPK3组为(54.0±0.2)%,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭结果显示,si-NC组穿膜细胞数为(126.67±8.62)个,si-circHIPK3组为(72.00±6.56)个,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论circHIPK3在NB细胞中高表达,沉默circHIPK3可以抑制NB细胞的增殖、迁移和侵袭。
简介:摘要目的分析肥胖症内脏脂肪组织中环状RNA(circRNA)表达水平。方法留取北京朝阳医院2020年1月至9月收治患者的内脏脂肪组织,根据体重指数,分肥胖(>32.5 kg/m2)和正常组(<20.0 kg/m2),选取10份(肥胖组6份,正常组4份)行全转录组测序,比较circRNA表达水平并利用生物信息学方法分析其功能。以Log2(Fold change>1)且P<0.05筛选差异化表达的circRNA,以P<0.05为条件筛选富集的通路和分子功能。结果与正常组比较,肥胖组有52个差异表达的circRNA[Log2 (Fold change)>1,且P<0.05],其宿主基因主要富集在"胰岛素抵抗"、"肿瘤坏死因子通路"和"细胞因子-因子受体通路"等通路(P<0.05),筛选出上述通路中的关键基因,如趋化因子(CX3CL1)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、白细胞介素6(IL-6)、胰岛素受体底物2(ISR2)等,这些基因与慢性炎性反应密切相关。结论circRNAs可能通过调控慢性炎性反应在肥胖症发生发展中发挥作用。
简介:摘要环状RNA(circRNA)为一类具有连续共价闭环结构的新型非编码RNA(ncRNA),无3′及5′游离末端。其可作为微小RNA(miRNA)"分子海绵"调节转录或剪接,也可与RNA结合蛋白相互作用,在机体生理和病理过程中都起着关键作用。近来有研究表明,在与创面愈合相关的细胞(血管内皮细胞、角质细胞)增殖、迁移等活动中,有circRNA参与其中。本文回顾了circRNA在不同类型皮肤细胞中发挥的调节作用及其与皮肤相关疾病如皮肤鳞状细胞癌、基底细胞癌、重度痤疮的联系,旨在为阐释创面愈合的细胞分子机制提供新思路,以期为解决临床上创面治疗难题开拓新方向。
简介:摘要目的利用基因芯片筛选心房颤动(房颤)患者外周血单核细胞中差异表达的环状RNAs(circRNAs),初步探讨circRNAs在房颤发生发展中的作用。方法连续入选2019年10月1日至10日在泰州市人民医院拟消融治疗的4例房颤患者和4例正常对照者,应用芯片技术检测外周血单核细胞circRNAs差异表达,进行基因本体论(GO)、代谢信号通路(pathway)分析,建立circRNAs-miRNAs共表达网络。结果初步筛选出120条差异表达circRNAs,上调65条,下调55条。GO分析富集最大的生物过程包含磷脂酰乙醇胺酰基链重塑、磷脂酰胆碱酰基链重塑、磷脂生物合成等,富集最大的细胞组成包含特殊颗粒、细胞表面、细胞外区等,富集最大的分子功能包含2-酰基甘油-3-磷酸酰基转移酶活性、跨膜信号受体活性、1-酰基甘油-3-磷酸酰基转移酶活性等。京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析提示差异表达circRNAs相关信号通路主要涉及炎症和免疫系统。circRNA_7571、circRNA_4648、circRNA_4631和circRNA_2875是共表达网络中结合节点最多的前4个circRNAs,hsa-miR-128-3p是共表达网络中与circRNAs作用最多的节点。结论房颤患者外周血单核细胞存在差异表达circRNAs,与房颤的发病机制可能相关。circRNA_7571、circRNA_4648、circRNA_4631和circRNA_2875是共表达网络中结合节点最多的前4个circRNAs。circRNA-hsa-miR-123p在房颤发病机制中可能起关键性作用。
简介:摘要目的探讨环状RNA102958(circRNA_102958)在人胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法收集2017年9月至2018年3月江苏省肿瘤医院30例胃癌患者肿瘤组织及其配对正常胃黏膜组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织中circRNA_102958相对表达量。分析胃癌组织circRNA_102958表达水平与临床病理特征的关系。应用受试者工作特征曲线(ROC)判断circRNA_102958诊断胃癌的效能。结果胃癌组织circRNA_102958相对表达量高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(5.1±1.0比1.0±0.0,t=4.045,P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期患者胃癌组织circRNA_102958相对表达量高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(9.3±2.6比2.0±0.5,t=2.302,P=0.029),不同性别、年龄、肿瘤长径、组织分化程度、淋巴结转移患者间circRNA_102958相对表达量差异均无统计学意义(均P>0.05)。ROC分析显示,circRNA_102958诊断胃癌的敏感度和特异度分别为74%和61%,曲线下面积为0.74。结论circRNA_102958在胃癌组织中高表达,其表达水平与胃癌分期相关,可能与胃癌发生、发展具有相关性。circRNA_102958有望成为胃癌诊断的分子标志物。
简介:摘要环状RNA(circRNA)是一种新型的长链非编码RNA(ncRNA),具有共价闭环的特征,不受RNA外切酶影响,相较线性RNA更加稳定。研究表明,circRNA在调节细胞的生理病理过程中具有小分子RNA(miRNA)的海绵效应、调控基因剪接和转录、充当自噬调节剂与RNA结合蛋白的相互作用、翻译蛋白质等重要作用。甲状腺乳头状癌(PTC)是最常见的甲状腺恶性肿瘤类型,约占所有甲状腺恶性肿瘤病例的90%,PTC多数预后良好,但部分患者复发率高,预后差。近年来越来越多的研究发现circRNA在PTC的发生和发展中具有重要作用,表明circRNA作为生物标志物的功能及其在该疾病中的治疗意义。