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  • 简介:基因芯片是近年发展起来一种高通量核酸分析技术,已成为“后基因组时代”重要分析工具之一。本文简述了基因芯片概念、分类及特点,并基因芯片技术性传播疾病病原体淋球菌、沙眼衣原体、解脲脲原体和人乳头瘤病毒研究中应用作了综述。

  • 标签: 基因芯片 性传播疾病 病原体 核酸分析技术
  • 简介:基因芯片又称DNA微阵列,分为cDNA微阵列和寡聚核苷酸微阵列.DNA微阵列技术是探索基两组功能一种强有力工具.扼要介绍基因芯片、表达谱芯片技术和原理,以及基因芯片技术肿瘤基因组学中应用。

  • 标签: 基因芯片 DNA微阵列 表达谱芯片 肿瘤基因组学
  • 简介:东方田鼠(MicrotisfortisBuechner)作为一种野生鼠,具有天然抗日本血吸虫感染特性,本文就东方田鼠精子体外培养、冷冻、复苏做了初步研究.

  • 标签: 东方田鼠 精子 体外培养 冷冻复苏
  • 简介:2006年6月29日至7月1日,第五届国际病理生理学大会在北京国际会议中心隆重召开。此次大会由中国病理生理学会和国际病理生理学会主办,中国科协国际会议中心协办,是首次中国召开国际病理生理学大会,为国际病理生理学和中国病理生理学界一大盛事。

  • 标签: 国际会议中心 病理生理学 五届 中国科协 学会
  • 简介:目的观察硝酸甘油(glyceryltrinitrate,GTN)经消化道吸收后分解代谢机理.方法以实验兔为动物模型,应用电生理监测仪动态检测血压,血气分析仪检测高铁血红蛋白(MetHb),全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT),比色法检测硝酸盐、亚硝酸盐、还原型谷胱甘肽(GSH).结果GTN经消化道吸收后代谢产生亚硝酸盐,实验动物血压、红细胞GSH降低,MetHb、ALT未见明显变化.结论机体内GTN分解代谢过程中可消耗还原性巯基和产生亚硝酸盐,血红蛋白和肝脏功能无明显影响.

  • 标签: 硝酸甘油 消化道 吸收 动物 代谢 一氧化氮
  • 简介:BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统是一种快速、高效、便捷表达系统.将人可溶性CD14(sCD14)基因克隆入pFASTBAC1转移质粒中,重组质粒转化DH10BAC感受态细胞,目的基因通过同源重组插入BacmidDNA中,后者转染sf21昆虫细胞获得重组杆状病毒.利用重组蛋白C-末端6×His@Tag,经TALON金属螯合色谱将重组病毒感染昆虫细胞获得无血清培养上清--步纯化得到重组蛋白,计算表明从1L培养基中可纯化到约8mg纯度大于95%重组sCD14蛋白,免疫印迹结果表明重组蛋白具有与抗6×His单抗和抗CD14单抗结合抗原性.疑胶迁移实验和细胞活性实验表明重组sCD14蛋白能在体外与LPS结合,并能增强LPS诱导THP-1细胞产生细胞毒性因子.

  • 标签: CD14 细菌脂多糖 杆状病毒 昆虫细胞表达系统
  • 简介:目的观察不同来源嗜肺巴氏杆菌实验大鼠和小鼠中传染性.方法取源于野鼠、实验大鼠和小鼠嗜肺巴氏杆菌3株,30只受试大鼠和小鼠进行交叉人工感染,并于感染后不同时期取咽拭子分离培养,感染前后菌株,应用RAPD-PCR、SDS-PAGE和Westernblot进行基因型、蛋白和抗原成份比较,以及生物学特性比较.结果受试实验动物3株嗜肺巴氏杆菌均易感,被接种动物能稳定携带嗜肺巴氏杆菌直到试验结束,重新分离嗜肺巴氏杆菌在生物学特性、蛋白成份、抗原性和基因型方面无明显改变.结论同一株嗜肺巴氏杆菌能在实验大鼠和小鼠中相互传染.

  • 标签: 巴斯德菌属 大鼠 小鼠 感染 嗜肺巴氏杆菌
  • 简介:目的建立实验大小鼠金黄色葡萄球菌快速检测方法--PCR法.方法根据已公布金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因序列,设计并合成一特异性引物,利用PCR技术扩增nuc基因片段.金黄色葡萄球菌和其他非金黄色葡萄球菌菌株抽提DNA进行扩增.结果金黄色葡萄球菌PCR产物出现668bp特异性DNA扩增片段,而其他非金黄色葡萄球菌未出现扩增片段,证实了合成引物金黄色葡萄球菌具有特异性.将抽提金黄色葡萄球菌DNA进行系列稀释,测定此PCR体系敏感性,结果显示,该PCR体系能检出3pg金黄色葡萄球菌DNA,且从抽提DNA到PCR扩增及电泳结束仅需4h.结论本研究所建立扩增耐热核酸酶nuc基因检测鼠金黄色葡萄球菌PCR方法,具有快速、可靠、敏感和特异特点,可用于临床样品和金黄色葡萄球菌感染时检测,适合应用于实验大小鼠监测.

  • 标签: 大鼠 小鼠 葡萄球菌 金黄色 聚合酶链反应 j诊断技术
  • 简介:目前有关造血基因重组细胞因子不断出现,如EPO、TPO、G-CSF、SCF及多种白介素等等。如何评价这些细胞因子生物活性,已成为重要研究课题,基中造血祖细胞增殖分化影响是一个重要技术途径。本文就常用几种体外培养体系及方法作一探讨,以提供检测基因重组细胞因子活性有效方法。①培养体系选择,大致分为二大类:琼脂培养法主要用于粒-巨噬系祖细胞CFU-GM;培养甲基纤维素法,用于CFU-E、BFU-E、

  • 标签: 生物活性 重组细胞因子 细胞培养方法 放射医学研究所 基因重组 医学科学院
  • 简介:目的中国实验小型猪中内源性反转录病毒存在与mRNA表达进行检测,摸清中国实验小型猪中内源性反转录病毒携带情况.方法根据已发表PERV序列设计并合成了三引物,分别用于检测PERV核心蛋白基因(gag)、多聚酶基因(pol)及囊膜基因(env)存在与表达;同时,根据目前通用env基因分型方法合成了三用于分型检测引物env-A、env-B、env-C.应用PCR、RT-PCR扩增方法,来自于中国实验小型猪外周血淋巴细胞DNA和RNA样品进行了检测.结果在6个被检DNA样品中均检出了PERV特异性DNA存在;同样,在被检RNA样品中均有PERV特异性RNA表达,且所表达PERV均为A型和B型,在所有样品中均未检出C型PERV表达.结论初步表明中国实验小型猪中存在内源性反转录病毒序列,且能以mRNA形式表达,这一结果为我国特有小型猪开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础.

  • 标签: 内源性逆转录病毒 中国实验小型猪 聚合酶链反应
  • 简介:利用ISSR分子标记技术59份玉米自交系和1份大刍草材料进行遗传多样性分析.21ISSR引物共扩增出475条不同位置带,平均22.6条;多态性带469条,平均22.3条,百分率高达98.7%;不同引物多态性信息指数(PIC)0.84~0.94之间.60份材料遗传相似系数0.23~0.48之间.经聚类分析,可将这些材料分成两大组,共9个亚组,并且在一定程度上与血缘和系谱是一致,也存在一些例外.结果表明,ISSR标记尽管可以用于进行遗传多样性分析,但并不是最好分子标记类型.综合考虑不同分子标记类型优缺点,认为ISSR标记在遗传研究较少作物上应用潜力较大.

  • 标签: 遗传多样性 玉米 自交系 种质资源 ISSR ISSR分子标记技术
  • 简介:细胞培养过程中细胞自然凋亡是细胞受环境压力影响而发生现象。随着细胞自然凋亡分子生物学和生物化学研究深入,以动物细胞产品生产为目的细胞培养产业将产生极有价值影响。采用DNA重组技术把预防细胞自然凋亡基因导入细胞和在培基中加入具有抗细胞自然凋亡化合物等手段已用于预防或减缓细胞培养过程中细胞自然凋亡。这些技术将大大延长细胞达到饱和密度后培养时间,从而使细胞培养系统生产效率得以显著提高。

  • 标签: 动物细胞 细胞培养 细胞自然凋亡
  • 简介:通过尖顶羊肚菌液体培养基质与条件研究,明确其菌丝生长最适pH值、最适温度、适宜光照条件、适宜葡萄糖和蛋白胨浓度、适宜培养基,以便应用于尖顶羊肚菌液体菌种生产和工业发酵.结果表明:菌丝最适生长温度为25℃;最适生长pH值为6;葡萄糖和蛋白胨最适浓度分别为200g/L和10g/L;菌丝黑暗环境下生长良好,光照菌丝生长具有抑制作用;用胡萝卜酵母膏培养基振荡培养形成菌丝球多,菌丝生长量大;菌丝球不同培养基中生长,可引起培养液pH值上升或者下降;菌丝球可利用培养基内氨基酸,使氨基酸降解,胡萝卜酵母膏培养基中振荡培养8d菌液总氨基酸含量较原液减少了36.71%,亮氨酸、异亮氨酸和甲硫氨酸含量下降幅度最大.

  • 标签: 尖硕羊肚菌 液体培养 培养条件
  • 简介:利用氨基酸密码子简并性及大肠杆菌中高表达真核基因时,转录起始区结构特点:①起始密码子ATG后使用富含嘌呤密码子延长其mRNA同tRNA反密码子loop互补;②通过应用富含A/U密码子,避免mR-NA形成稳定二级结构;③减少潜在第二个Shine-Dalgarno序列。通过聚合酶链式反

  • 标签: 人甲状旁腺激素 肠杆菌 反密码子 医学研究所 南京军区 简并性
  • 简介:SDS-PAGE将SDS所带大量阴性电荷和聚丙烯酰胺凝胶高分辨率相结合,使蛋白自身电荷被大量阴性电荷所淹没,这样蛋白电泳时迁移率仅与其分子大小有关。蛋白电泳时凝胶孔径大小和电泳介质对不同大小分子分辨率有不同影响,特别对相对分子量小于10000低分子量蛋白,常规电泳方法完全不能分辨,国外报道尿素、缓冲液浓度及聚丙烯酰胺中单体和双体比例蛋白分辨率有较大影响,但将几种不同因素进行综合研究,未见报道。

  • 标签: 聚丙烯酰胺 凝胶电泳 分离胶 小分子物质 低分子量 蛋白分子
  • 简介:单核苷酸多态性(SNP)是继限制性片段长度多态性、微卫星标记之后第三代分子标记,通常呈双等位基因多态.本文从SNP特点、SNP发现与检测、SNP数据库、SNP频率及其与表型关系等方面简述了SNP鸡遗传变异中研究及应用进展.

  • 标签: 单核苷酸多态性 遗传变异
  • 简介:真菌自然界物质循环与降解等生态过程中发挥着重要作用,是生态系统重要组成部分.然而约90%真菌种类仍然未知,且大部分难于分离和培养.因此核酸杂交;核酸序列分析;DNA指纹分析等分子生物学技术被用于真菌分类、鉴定、种群结构、群落多样性研究.本文综述了这几种主要分子生物学技术基本原理及其真菌生态学研究中应用现状.

  • 标签: 真菌生态 分子生物学技术 DNA指纹分析 应用