简介:目的研究体外谱系选择法诱导胚胎干细胞(ES)神经分化的特点,建立ES细胞体外神经分化的模型。方法通过悬滴和悬浮培养、Nestin阳性筛选培养、神经样细胞增殖培养以及神经细胞分化培养的方法,建立体外诱导未分化的ES细胞分化为多巴胺能神经元模型;观察各神经分化及各阶段的ES细胞形态,并通过RT-PCR以及荧光免疫化学方法检测各分化阶段ES细胞神经特异表达基因和蛋白的表达特点;通过高效液相检测各阶段分化细胞分泌神经递质多巴胺的能力。结果随着分化培养阶段的延长,分化的ES细胞中可见大量神经样细胞出现,分化末期可见清晰的神经元结构(包括突触);分化早期,仅有部分神经细胞特异基因和蛋白表达,且表达水平低,随着培养阶段延长,特异基因和蛋白均表达,且表达水平明显增加;神经递质多巴胺的水平在未分化和分化早期细胞中未检出,分化的中后期可检测出并呈现随分化时间延长而增加的趋势。结论建立的体外谱系选择培养方法可诱导ES细胞分化获得具有多巴胺能神经元特性的细胞,可为神经发育毒性研究提供模型。
简介:按照国际惯例,不宜摄入食糖的病人所能食用的无糖甜食品(SugarFree)指的是用山梨醇、麦芽糖醇、甘露醇、木糖醇等糖醇代替食糖制造的甜食品。欧美最流行的无糖口香糖,就是用这些糖醇制造的。北欧一家果糖厂生产的这种口香糖,每年出口至美国,创汇值达1600万美元。这些糖醇可代替食糖,工艺上无特殊要求,所得产品不会变形,口感却同样美满。作为食糖替代品的糖醇,如山梨醇、麦芽糖醇、木糖醇、甘露醇、乳糖醇等,能被人体消化、吸收和代谢,有一定的甜度和热量,一般不龋齿,不会引起血糖值的升高,所以称为营养性甜味剂。而高倍甜味剂则一般指非营养性甜味剂,如化学合成的糖精、甜蜜素