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  • 简介:乙烯作为植物激素在生长、发育、抗逆过程中发挥了其独特调节作用。本文分子生物学水平概述了植物乙烯合成途径信号转导途径机制。乙烯合成由甲硫氨酸开始,经过重要中间代谢产物ACC氧化裂解形成乙烯,其中ACC合成酶催化反应为限速反应,为调控乙烯合成重要环节。乙烯信号转导由内质网上乙烯受体识别乙烯开始,胞质中经一条保守途径,由EIN3将转录信号传递至细胞核,最后ERF类转录因子激活或抑制相关基因表达。ERF转录因子参与防卫反应诱导寄主病原菌不亲和互作建立,受其调控防卫基因被诱导表达后随后防卫应答过程中发挥了不同作用。

  • 标签: 乙烯合成 信号转导 诱导抗性
  • 简介:本研究探讨滴灌施肥条件下灌水量施肥量温室番茄品质影响,优化陕北地区温室番茄水肥供应技术,为该地区优质番茄生产提供技术支持。通过田间试验,采用完全随机组合方法,试验由3个灌水水平(100%ET,80%ET60%ET)3个施肥水平(N-P2O5-K2O分别为240-120-150kg/hm2,180-90-112.5kg/hm2120-60-75kg/hm2)进行完全随机组合,采用主成分分析法番茄果实6项品质指标(可溶性糖,维生素C,硝酸盐,糖酸比,有机酸番茄红素)进行综合评价,提出相对较优水肥供应量。分析表明,灌水单因素可溶性糖含量、维生素C番茄红素影响极显著(p〈0.01),硝酸盐有机酸影响显著(p〈0.05);相同施肥水平下,随着灌水量增加,番茄可溶性糖含量、维生素C、番茄红素、硝酸盐有机酸含量随着灌水量增加而降低;施肥单因素维生素C、硝酸盐番茄红素影响极显著(p〈0.01),随着施肥量增加,维生素C、硝酸盐番茄红素随之增加;水肥供应仅对番茄维生素C、硝酸盐含量番茄红素含量有显著交互作用(p〈0.05)。主成分分析法表明,灌水量为60%ET氮磷钾施用量为240-120-150kg/hm2时得分最高,综合品质相对较优,推荐该处理为陕北地区温室番茄水肥供应技术优选方案,能够为该地区优质番茄生产提供技术支持。

  • 标签: 番茄(Solanum lycopersicum L.) 维生素C 番茄红素 主成份分析法
  • 简介:葡萄浆果颜色由花色素苷量来决定,UFGT控制花色素苷合成,Myb相关基因通过时空表达调节UFGT,从而使花色素苷葡萄发育不同阶段不同部位表达。不同葡萄品种调节花色素苷合成强度模式差异造成了有色葡萄品种果皮有多种颜色,白色葡萄品种果皮由于没有花色素苷合成。Myb相关基因家族主要有八个成员,其中MybA三个种类VlmybA1-1,VlmybA1-2VlmybA2以及MybB两个种类VlmybB1-1VlmybB1-2得到了较深入研究。

  • 标签: 葡萄 花色素苷 MYB UFGT 色素形成
  • 简介:针对多浆旱生植物霸王富含多酚多糖类物质特点,常规异硫氰酸胍方法基础进行改进,摸索出一种霸王叶根总RNA提取方法。本方法主要通过提取缓冲液中加入4%β-巯基乙醇去除多酚物质干扰;用2mol/L醋酸钠(pH4.0)、水饱和酚氯仿:异戊醇(24:1)抽提去除多糖蛋白物质。采用该方法提取霸王总RNA纯度高、完整好,电泳条带清晰,OD260/OD280值1.8~2.0之间,其质量完全可以满足进一步分子生物学研究要求。

  • 标签: 霸王 多酚 多糖 改进的异硫氰酸胍法 RNA提取
  • 简介:Bar基因转基因商品化作物应用最多目标基因,也是水稻遗传转化应用较多选择标记基因,因此,建立Bar基因为选择标记通用高效遗传转化体系非常必要。本研究籼型水稻明恢63为受体,Bar基因作选择标记,采用农杆菌介导遗传转化法,将Bar基因转入其中,获得了一批转化子,初步建立了稳定、高效水稻遗传转化体系。随后,以此体系为基础,将装有不同基因两个载体pBar-1C^*pBar-1Ab进行了转化,分别从5400块4800块愈伤组织获得156个115个抗性愈伤,其抗性愈伤率分别为2.8%2.4%,分化率分别为80.7%87.8%,由此说明,此转化体系相对稳定,且分化率高、抗性愈伤率也较高,可用于同类选择标记遗传转化,加快水稻转基因育种步伐。

  • 标签: 选择标记 BAR基因 农杆菌介导的遗传转化 水稻
  • 简介:本文综述了棉铃虫对转眈基因棉花抗性机制抗性风险,重点讨论了基因策略包括转入多个杀虫基因、定向器官特异表达、侵害诱导表达、调控表达、高杀死与低表达策略,田间策略如助棉品种轮作混植、降低化学防治经济阈值、农艺措施庇护策略,国家宏观调控如实施分区种植管理、加强种子生产经营管理、强化抗性动态检测、严格安全评价等抗性治理策略与技术

  • 标签: 棉铃虫转Bt基因棉花 抗性预防 治理策略
  • 简介:近年来,抗除草剂转基因作物研究取得了一些进展。本文简述了抗除草剂转基因作物发展历史以及除草剂作用机理,分别介绍了抗EPSPS抑制剂基因、抗ALS抑制剂基因、乙酰CoA转移酶基因、阿特拉津氯水解酶基因、细胞色素P450基因原卟啉原氧化酶基因这6类抗除草剂基因来源,抗性机理以及目前它们转基因水稻应用。最后,对转基因水稻食用安全,转基因释放、飘移对生态影响进行了探讨,对转基因水稻未来发展进行了展望。

  • 标签: 转基因水稻 抗除草剂基因 研究进展 安全性与风险
  • 简介:根据黄瓜基因组数据库CsaO20719基因编码区全序列设计引物,通过RT—PCR扩增方法从黄瓜品种津研四号叶片中克隆得到寡肽转运蛋白基因(oligopeptidetransportergene,OPT)。基因编码区全长为2013bp。该基因编码蛋白由20种氨基酸组成,含有670个氨基酸残基,分子量理论等电点分别为73kD8.65。预测由该基因转录寡肽转运蛋白为疏水蛋白,有14个连续疏水片断。预测该蛋白不存在信号肽,为非分泌蛋白,存在OPT家族保守结构域,亚细胞定位在细胞膜,主要功能为参与转运底物结合。同源进化树预测分析显示,OPT蛋白与毛果杨蓖麻寡肽转运蛋白同源分别达到了81%79%,转运底物除有寡肽外,还包含有金属离子-烟草胺螯合物等。qRT—PCR分析同一氮浓度处理OPT基因在不同部位表达结果显示,无氮及低氮条件下,OPT基因在茎中表达量最高,其次为叶茎尖。高氮条件下,OPT主要在茎尖叶中表达量较高,其次为茎,说明OPT基因在氮胁迫下存在于植物各个部位,主要集中在生长旺盛部位,为黄瓜生长提供所需能量。不同氮浓度下OPT茎中表达分析结果显示,OPT基因在无氮及低氮下表达量增加,明显高于正常水平,并且随着氮浓度降低,OPT表达量增加,说明黄瓜OPT基因参与低氮胁迫应答反应,增强黄瓜耐低氮能力。

  • 标签: 黄瓜 寡肽转运蛋白基因(OPT) 克隆 低氮 生物信息学分析
  • 简介:长链酰基辅酶A合成酶(longchainacyl-CoAsynthetase,LACS)油脂代谢重要催化酶。本研究采用RT-PCR技术,从花生(ArachishypogaeaL.)克隆到LACS1(GenBank登录号:KT932703),分析了该基因结构组成,预测编码氨基酸与其他植物同源,采用实时Real-TimePCR技术LACS1组织表达进行研究。结果显示,花生LACS1基因全长2219bp,包含1992bpORF,编码663个氨基酸,有22个外显子21个内含子。氨基酸序列比对显示花生LACS1有真核生物酰基辅酶A合成酶保守结构域,含有保守激活位点绑定位点。同源分析发现花生LACS1与大豆、野生大豆、鹰嘴豆、绿豆、甜橙等15种物种氨基酸序列同源68%~86%之间,进化树分析显示,花生LACS1与鹰嘴豆等豆科植物亲缘较近。实时荧光PCR分析表明,花生LACS1花生根、茎、叶、针、仁和花等组织均有表达,但差异明显,其中花表达量最高,表达量大小顺序为花>针>叶>茎>根>仁,地上组织表达量高于地下组织。花生LACS1可能参与花生角质层脂质合成。本研究结果为揭示植物脂肪酸代谢提供理论依据。

  • 标签: 花生 长链酰基辅酶A合成酶 组织表达 油脂
  • 简介:模板DNA质量直接影响PCR扩增结果,而不同提取方法及其缓冲液成份与浓度提取DNA质量有重要影响.本文5个栽培大豆品种叶片为材料,比较分析了SDS与CTAB两种提取方法以及不同浓度CTAB提取缓冲液所提取DNA质量影响,通过PCR进行检验.实验结果表明:用1%(W/V)、2%(W/V)浓度CTAB提取缓冲液1.25%(W/V)SDS提取缓冲液所提取大豆叶片DNA质量较好,均能满足PCR扩增模板需求,其中1.25%(W/V)SDS提取得到大豆叶片DNA质量最好,以其为模板扩增效果最佳,而4%浓度CTAB不适宜提取大豆叶片DNA.

  • 标签: PCR 大豆 叶片 DNA 提取方法 缓冲液
  • 简介:了解烟草杂交组合Florda301×GDH94杂种优势表现及其形成原因,我们分析了该组合6个农艺性状杂种优势表现,利用主成分分析法各农艺性状贡献进行了分析;利用6SRAP引物,Florda301×GDH94及其亲本进行cDNA-SRAP差异表达分析,差异表达片段进行克隆测序分析。结果表明:超高亲优势表现为株高〉叶数〉叶厚〉叶长〉叶宽〉叶面积;亲优势表现为株高〉叶数〉叶面积〉叶长〉叶宽〉叶厚。叶面积叶长、叶宽,叶长与叶宽呈极显著相关。主成分分析将6个农艺性状简化为3个主成分,即叶产量因子、长势因子、叶数因子,提供信息占全部信息量95.99%。6SRAP引物Florda301×GDH94及其亲本中共扩增出66条带,其中差异条带32条,占48.48%;差异表达类型分为UNF1、ABF1、UNP1、UNP2、DMP、DMP2六种,分别占:19.20%、8.04%、4.60%、5.75%、2.30%、6.90%。从杂种特异表达片段中分离两条片段分别与GDP-甘露糖4,6-脱水酶蔗糖6-果糖基转移酶同源。本研究结果为烟草农艺性状杂种优势研究提供基础理论参考。

  • 标签: cDNA-SRAP 农艺性状 杂种优势
  • 简介:转录组连接基因组遗传信息与蛋白质组,也是基因功能研究基础出发点。单分子测序技术近年逐渐成熟新一代测序技术,也称为第三代测序技术,转录组学研究方面较前代测序技术具有独到优势,应用前景广阔。非模式植物功能基因组学研究,全长转录本获得可有力地推进相应基础研究水平,而第三代测序技术为此提供了较好解决方案。本研究就目前技术较为成熟且应用较广泛SMRT等单分子测序技术原理进行了介绍,综述了该技术非模式植物转录组学研究应用现状,其应用前景进行了展望。

  • 标签: 单分子测序 全长转录组 SMRT 非模式植物
  • 简介:尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusariumoxysporumf.sp.cubense)引起香蕉枯萎病病原菌,其中1号生理小种(Foc1)侵染粉蕉品种,而4号生理小种(Foc4)则危害粉蕉香牙蕉品种。为探讨Foc1Foc4致病差异遗传基础,本文根据已经公布番茄枯萎病菌(Fusariumoxysporumf.sp.radicis-lycopersici)基因组序列,利用同源克隆方法,分离到一个重要致病基因——fga1,比较了不同区域Foc1Foc4fga1基因cDNAgDNA序列差异。结果表明Foc1fga1基因保守很强,含有3个内含子4个外显子,蛋白产物含353个氨基酸;研究材料中Foc4fga1基因80%都有2个转录本,小转录本与Foc1fga1一致,而大转录本第三个内含子由于可变性剪切使得其成为外显子,预测编码一个372个氨基酸多肽;来自海南三亚Foc1Foc4fga1基因gDNAcDNA长度分别为1286bp1092bp,相似均为100%。

  • 标签: 香蕉枯萎病 生理小种 fga1基因 可变性剪切
  • 简介:本研究基因枪导入了pBAC128F/R质粒(含有玉米Adh1内含子1CaMV35S启动子驱动bar基因作为选择标记,以来自拟南芥菜逆境诱导表达类型——亲水蛋白rd29b基因启动子驱动脱水应答转录因子DREB1B基因逆境诱导表达类型质粒)T4代转基因小麦进行了稳定表达研究。PCR、PCR—SouthernSouthern杂交分析表明,外源转录因子DREB1B基因已稳定整合到转基因株系基因组。半定量RT—PCR结果表明,部分转基因株系DREB1B基因相对表达量有所增强。叶片除草剂抗性检测结果显示有8个转基因株系可抗到150mg/L。叶片脯氨酸含量测定结果表明,有4个株系(编号为1,18,3076)脯氨酸含量提高幅度较大,同一株系,干旱与未干旱处理相比,脯氨酸含量提高了3~5倍。干旱处理转基因植株与非转基因植株相比,脯氨酸含量高2~3倍。干旱条件下,T4代田间小区产量统计数据分析结果表明,有4个转基因株系(编号为30,51,7076)产量与非转基因植株相比有显著增加。研究表明,利用逆境诱导型rd29b基因启动子来增强外源DREB1B基因表达,能显著改良小麦抗旱

  • 标签: 小麦 转基因 DREB1B基因 脯氨酸 抗旱性
  • 简介:丝氨酸乙酰转移酶(serineacetyltransferase,SAT)甲硫氨酸半胱氨酸合成途径关键酶,利用该基因提高作物甲硫氨酸水平具有广阔应用前景。为了研究拟南芥SAT1(ArabidopsisthalianaSAT1)基因蛋白表达情况及相关功能,构建了带有His标签AtSAT1基因原核表达载体pET-30b(+)-SAT1-His(6)。将其导入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经固定化金属离子亲和层析(IMAC)纯化获得了抗原蛋白SAT1-His(6)。该抗原蛋白经免疫兔子,成功制备了具有较高特异性灵敏SAT1蛋白多克隆抗体。Westernblotting表明,该抗体可用来检测转AtSAT1基因转基因玉米株系SAT1蛋白积累量,为后期该基因开展进一步深入研究具有重要意义。

  • 标签: 拟南芥 丝氨酸乙酰转移酶 原核表达 多克隆抗体
  • 简介:通过增加外源CaCl2钙离子螯合剂EGTA处理后,研究香蕉幼苗60mmol/LNaCl人工模拟盐胁迫0、4h、8h、12h、24h48h不同时间下,测定其叶片CaMCa^2+-ATPase基因相对表达量。结果表明,NaCl胁迫过程,香蕉幼苗正常生长条件下,其根叶片CaM基因Ca^2+-ATPase基因均有表达。巴西蕉幼苗根盐胁迫过程CaM基因没有发生显著变化,但是粉蕉根却发生了显著变化,这可能与粉蕉耐盐高于巴西有关。随着盐胁迫时间延长,巴西蕉粉蕉幼苗根Ca^2+-ATPase基因相对表达量均呈现先上升后下降趋势。

  • 标签: 香蕉幼苗 盐胁迫 CaM基因 Ca2+-ATPase基因 荧光定量
  • 简介:为了利用关联分析发掘与重要农艺性状相关数量性状基因位点,本研究采用全基因组扫描方法,利用分布基因组60SSR引物,140份东北三省水稻种质资源进行群体结构连锁不平衡分析。结果表明:本研究中东北粳稻可分为2个类群,线性非线性组合,都有一定连锁不平衡存在。群体,19.2%标记位点可以观察到显著LD(P〈0.05),其中第一类群第二类群基于D’统计概率(P〈0.05)支持LD成对位点比例分别为2.1%16.6%。第2类群连锁不平衡衰减(D’〈0.5)延伸遗传距离变幅为0.32—120.4cM,回归方程为:y=-0.0276ln(x)+0.3994。

  • 标签: 粳稻 种质资源 群体结构 连锁不平衡
  • 简介:WRKY转录因子高等植物中最重要转录因子基因家族之一,植物应对生物胁迫(病原菌病毒等)非生物胁迫(干旱,盐害,冷害热害等)等一系列逆境应答进程中发挥重要作用。目前高等植物WRKY转录因子调控植物应答生物胁迫非生物胁迫相关功能进行了总结。目前已经报道WRKY转录因子功能基础,分析了不同植物WRKY转录因子逆境应答模式功能特征,为未来探索作物WRKY转录因子逆境应答调控机理奠定基础

  • 标签: 植物 WRKY转录因子 胁迫应答 功能
  • 简介:自交不亲和一种普遍存在于显花植物生殖隔离现象,可以抑制近亲繁殖而促成异交。由S-核酸酶介导植物配子体自交不亲和机制类型花柱S决定子基因编码S-核酸酶进入花粉管,异花授粉下则会被花粉SCF复合体标记泛素后被26S蛋白酶体分解,从而发生异交亲和;然而自花授粉过程,自我花粉SCF复合体不会泛素标记花柱S基因编码S-RNase,从而拥有活力,分解花粉管RNA导致花粉管生长发生障碍,进而蛋白质合成受阻,引起自交不亲和。Cullin1SCF复合体一个基因,SCF复合体SKPl-Cullin1-Rbx1-F-box晶体结构当中充当重要角色,该综述将主要介绍讨论基于S-核酸酶自交不亲和Cullin1基因研究进展。

  • 标签: 自交不亲和性 SCF复合体 Cullin1基因 泛素
  • 简介:植物受体蛋白激酶参与植物生长发育,抗逆抗病防御反应、细胞分化、宿主与病原菌互作过程起着重要作用。目前花生蛋白激酶基因研究较少。本研究基于前期多态SNP标记开发QTL定位,获得了一个抗青枯病候选蛋白激酶基因;通过RT-PCR克隆技术获得了一段长为2154bpORF序列,暂命名为AhLRPK1;采用生物信息学方法预测分析AhLRPK1基因编码蛋白质常规理化性质,跨膜结构域、进化分析高级结构等。结果表明AhLRPK1基因编码717个氨基酸为稳定亲水性蛋白,含有一个信号肽、跨膜结构域、多个LRR基序以及一个激酶结构域;与拟南芥LRR亚家族进化同源分析显示AhLRPK1属于LRRⅤ亚家族,与拟南芥AT3G13065蛋白亲缘关系最近;AhLRPK1基因在花生基因芯片中表达模式分析表明,花中表达量最大,在青枯菌诱导情况下,AhLRPK1基因在抗感花生品种中都表现出下调表达趋势,AhLRPK1基因受乙烯利表达下调。这些结果有助于进一步验证其生物功能。

  • 标签: AhLRPK1 受体蛋白激酶 抗病防御 生物信息预测 表达分析