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  • 简介:Objective:ToobtainrecombinantTreponemapallidumsubsp,pallidum(TP17KD)lipoproteininlargequantitiesbyamplificationandtofurtherpurifyantigensforlaboratorydiagnosisofsyphilisanddevelopmentofasyphilisvaccine.Method:TheTppl7lipoproteingenewasamplifiedfromtheTP(strainNichols),andthenitwasrecombinatedintoaplasmidpMAL-2candclonedwithinE.coli12-TB1.ThehostbacteriacontainingrecombinantplasmidswereinducedwithIPTG.TheTpp17KDlipoproteingenewasamplifiedbyus-ingPCRandpositivecloneswerescreenedwithdoubledigestionandPCR.RecombinantplasmidsweretransformedintoE.coliandtheE.colicarryingrecombinantplasmidswereinduced.TheexpressionofTP17KDwasdetectedbysodiumdedecylsulfate-polyacrylamidegelelectrophoresis(SDS-PAGE)andimmunoblot.Results:GelstainingwithCoomassieblueG-250showedthattheinducedE.colicarryingrecombinantplasmidcouldproduce60KDfusionproteinathighlevels.Gelscanningshowedthat17KDproteinexpressioninE.coliaccountedfor10%oftotalcellularprotein.Therecombinantproteinantigenreactedwiththeseraofsyphilispatients.Conclusion:Ourstudylaysacornerstonefordevelopingnewtechniquesoflaboratorydiagnosisforsyphilisandnewvaccines.Preliminaryclinicalapplicationshowedthatthefusionproteincouldbeusedforthediagnosisofsyphilis.

  • 标签: 基因克隆 基因表达 Tppl7 密螺旋体 临床应用 脂蛋白
  • 简介:目的评价解脲脲原体(Uu)培养方法的特异性,了解解脲脲原体的耐药性.方法用A7琼脂固体培养基平板分离鉴定法和肉汤稀释法检测2230例临床标本.结果2230例临床标本,固体培养阳性448例,液体培养阳性593例.两者比较(χ2=128.8,P<0.001)差异有显著性.药敏试验四环素类和喹诺酮类药物有较高的耐药性.结论固体培养和液体培养联合应用可提高解脲脲原体检验的特异性,并能了解其药物敏感性,对临床治疗具有重要指导意义.

  • 标签: 解脲脲原体 联合应用 泌尿生殖道 临床标本 阳性 耐药性
  • 简介:目的:调查研究井街道外来女工人工流产患者术后保健知识需求程度。方法:选取2012年1—12月于本院进行人工流产术的1019例外来女工为研究对象,将其中不同年龄段及不同文化程度者对流产危害知识掌握程度和术后保健知识需求的程度进行比较。结果:年龄较大及文化程度较高者流产危害知识掌握程度及术后保健知识需求程度均高于年龄较小及文化程度较低者,P均〈0.05,有显著性差异。结论:井街道外来女工人工流产患者的年龄及文化程度均对其术后保健知识需求程度有较大影响。

  • 标签: 外来女工 人工流产 术后保健知识 需求程度
  • 简介:目的:观察自制复方烟酰胺星软膏联合0.1%阿达帕林凝胶治疗寻常痤疮的临床疗效。方法:将按入选标准入选的90例寻常痤疮患者随机分为2组,每组45例。治疗组每天早晨、中午各点涂复方烟酰胺星软膏1次,晚上薄涂0.1%阿达帕林凝胶1次;对照组每晚薄涂0.1%阿达帕林凝胶1次,疗程均为8周,治疗结束后观察疗效并进行比较。结果:治疗8周疗程结束时治疗组有效率为91.1%,明显高于对照组(71.1%),差异有统计学意义(χ2=4.66,P<0.05)。结论:自制复方烟酰胺星软膏联合0.1%阿达帕林凝胶治疗Ⅰ~Ⅱ级轻中度寻常痤疮,可协同作用于炎症性和非炎症性皮损,疗效显著。

  • 标签: 自制复方烟酰胺沙星软膏 阿达帕林 寻常痤疮
  • 简介:目的研制人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1/E7CTL重组杆状病毒载体。方法以包含HPV16标准病毒株的质粒pHPV16为模板,采用PCR技术扩增HPV16主要衣壳蛋白L1(1-471aa)的基因序列,同时人工合成E7蛋白CTL表位E749-57的编码序列,将两个目的基因逐步连接构建重组质粒pUC19HPV16L1/E7CTL,HPV16L1/E7CTL片段经质粒pFastBac1转位至BacmidDNA后通过PCR鉴定重组杆粒。结果成功构建了包含融合基因HPV16L1/E7CTL片段的克隆质粒puc19HPV16L1/E7CTL,制备了L1/E7CTL重组杆状病毒载体杆粒BACMIDDNA。结论采用分子克隆技术构建了包含L1/E7CTL的重组杆粒BACMIDDNA,有利于下一步融合蛋白的表达,制备一种能够更有效激发CTL杀伤作用的嵌合病毒样颗粒疫苗,为疫苗研制打下基础。

  • 标签: 乳头瘤病毒16型 重组杆状病毒 疫苗
  • 简介:目的观察来氟米特对慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠肾组织中骨形成蛋白-7(BMP-7)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的干预作用,探讨来氟米特对狼疮肾炎(LN)的保护机制。方法B6D2F1杂交鼠随机分为4组(各组均n=6):正常对照组、模型组、泼尼松组和来氟米特组。建立cGVHDLN小鼠模型后,泼尼松组、来氟米特组分别给予相应药物灌胃,正常对照组、模型组给予等体积生理盐水灌胃。观察、比较各组小鼠的尿蛋白排泄率(UPE)、肾功能、肾脏病理改变以及肾组织中BMP-7、TGF-β1的表达情况。结果与正常对照组相比,模型组小鼠UPE、尿素(BUN)、肌酐(Scr)显著升高,肾脏病理改变明显加重,BMP-7表达显著减少、TGF-β1表达显著增加(P〈0.01)。与模型组相比,泼尼松组、来氟米特组UPE、BUN、Scr显著降低,肾脏病理明显改善,BMP-7表达增加、TGF-β1表达减少(P〈0.05或0.01)。狼疮样模型小鼠肾组织中BMP-7表达水平与UPE、BUN、Scr均呈显著负相关(P均〈0.01),TGF-β1表达水平与UPE、BUN、Scr均呈显著正相关(P均〈0.01)。结论上调BMP-7、下调TGF-β1在肾脏的表达,可能是来氟米特对对LN的保护机制之一。

  • 标签: 移植物抗宿主病 狼疮肾炎 来氟米特 骨形成蛋白-7 转化生长因子-β1
  • 简介:目的:探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)诱导人永生化阴道上皮细胞(VK2/E6E7)凋亡的作用及机制.方法:取对数期生长VK2/E6E7细胞,分别加入POD-NLC和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养24小时.实验分为4组:A组:空白对照组;B组:0.25μg/mLPOD-NLC+Caspase抑制剂组;C组:1μg/mLPOD-NLC+Caspase抑制剂组;D组:空白NLC+Caspase抑制剂组.采用流式细胞仪检测ROS水平,qPCR检测AIFmRNA表达,蛋白印迹检测各组细胞AIF、cyt-C蛋白表达.结果:B组、C组均可以上调ROS、AIF、cyt-C水平,与A组及D组相比均有统计学差异(P值均〈0.05);B组与C组AIFmRNA及AIF蛋白表达无统计学差异(P值均〉0.05);ROS、cyt-C各组间比较均有统计学意义(P值均〈0.05).结论:鬼臼毒素纳米脂质载体可以通过非Caspase依赖途径诱导永生化阴道上皮细胞凋亡.

  • 标签: 鬼臼毒素纳米脂质载体 凋亡机制 非Caspase依赖途径 VK2 E6E7细胞
  • 简介:目的观察不同浓度葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对长波紫外线(UVA)诱导人皮肤成纤维细胞表达转化生长因子-β(TGF-β)Ⅱ型受体和Smad7蛋白的影响。方法本实验选用体外培养的人皮肤成纤维细胞株(HSFs)为研究对象,实验主要分3组,空白对照组,单纯光照组(UVA照射人皮肤成纤维细胞),照光加药组(UVA照射细胞后予不同浓度GSPE干预)。应用免疫细胞化学技术检测UVA照射前、后及不同浓度GSPE干预后对皮肤成纤维细胞TGF-βRⅡ和Smad7蛋白表达的情况。结果与空白对照组相比,单纯UVA光照组人皮肤成纤维细胞TGF-βRⅡ蛋白表达下降(P〈0.05),Smad7蛋白表达升高(P〈0.05);与单纯光照组相比,UVA照射后经25μg/mL、50μg/mL和100μg/mL浓度GSPE处理后,成纤维细胞TGF-βRⅡ蛋白表达水平均升高(P〈0.05),Smad7蛋白表达水平均下降(P〈0.05),且于50μg/mL和100μg/mLGSPE处理后,成纤维细胞TGF-βRⅡ和Smad7蛋白表达量均接近正常水平(P〉0.05)。结论适当浓度GSPE可通过显著上调TGF-βRⅡ蛋白水平以及下调Smad7蛋白水平的表达来对抗UVA抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,进而减轻UVA所致细胞外基质的降解,延缓了皮肤光老化的进程。

  • 标签: 长波紫外线 皮肤光损伤 光老化 葡萄籽提取物原花青素 转化生长因子-βⅡ型受体 SMAD7