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  • 简介:选择60Coγ射线5Gy照射后第7天的人胚肺成纤维细胞(HELF),采用聚阳离子脂质体LipofectAMINE介导基因转染法将人TGFβ1正、反义基因表达载体pMAMneo-TGFβ1和pMAMneo-AntiTGFβ1转入HELF,转染细胞经G418抗性筛选出来.提取培养细胞染色体DNA,用DNA斑点印迹分析表明,它们能与neo基因特异杂交.用neo基因特异PCR引物能从转染细胞扩增出276bp阳性片段,而未转染细胞则扩增阴性.

  • 标签: 人胚肺成纤维细胞 基因转染 脂质体 钴60γ射线 放射性间质性肺炎 TGFΒ1
  • 简介:目的:构建GFE-1多吠与重组人肿瘤坏死因子d(rmhTNF一仅)融合蛋白(GFE-1-rmhTNF),研究该融合蛋白体外活性和体内分布。方法:利用基因工程方法,将人工合成编码GFE—l寡核苷酸片段连接在rmhTNF—d序列3’端,转入大肠杆菌中诱导表达,采用Q—SepharoseFF阴离子层析柱和SP—SepharoseFF阳离子层析柱纯化蛋白,SDS—PAGE和Western印迹鉴定,测定该融合蛋白体外活性,观察其在小鼠体内分布情况。结果:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF,并在大肠杆菌中获得高效表达。体外活性实验显示,GFE-1-rⅢhTNF对L929细胞明显杀伤活性;体内分布实验证实,GFE-I-rmhTNF在小鼠肺组织富集远高于肝肾组织。结论:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF.,可显著杀伤L929细胞并特异性富集于小鼠肺组织。

  • 标签: 人肿瘤坏死因子 GFE-1多肽 融合蛋白 体外活性 体内分布
  • 简介:与许多在细胞浆内复制RNA病毒不同,流感病毒复制及转录都在细胞核内进行。流感病毒感染细胞进入细胞浆后,经病毒脱壳将病毒核糖核蛋白体复合物(vRNP)释放到细胞浆。vRNP含有病毒RNA基因和碱性聚合酶1(PB1)、碱性聚合酶2(PB2)、酸性聚合酶(PA)及核蛋白(NP)。vRNP被主动运送到细胞核内,开始病毒基因组复制和转录。流感病毒感染细胞晚期,在细胞浆中新合成PB1、PB2、PA及NP蛋白也需要进入细胞核,参与新vRNP装配。我们简要介绍有关流感病毒vRNP和新合成PB1、PB2、PA及NP蛋白进入细胞核机制。

  • 标签: 甲型流感病毒 病毒核糖核蛋白体复合物 蛋白核内运
  • 简介:目的:探讨脑胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MGMT和错配修复基因hMLH1、hMSH2启动子CpG岛甲基化状态,及其在烷化剂化疗中意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化状态,免疫组化方法测定蛋白表达。结果:脑胶质瘤患者组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,3种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似,并与患者性别、年龄、病理类型和病理分级无明显相关性。回顾性分析患者资料,显示39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化患者生存期显著高于MGMT基因未甲基化患者(P〈0.05,Log-rank检验)。结论:MGMT及错配修复基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见分子事件,可能与肿瘤发生有关;检测MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态,在判断脑胶质瘤患者预后和预测烷化剂化疗耐药性中可能具有重要意义。

  • 标签: 脑胶质瘤 启动子CPG岛甲基化 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因 错配修复基因
  • 简介:目的:构建一个牛dSl酪蛋白调控序列指导人溶菌酶(hLYZ)基因组序列杂合基因座。方法:采用本实验室发明连续3步缺口修复技术。将6个无痕连接同源臂插入以pBR322为载体骨架中,构成能进行3次连续基因抓捕载体,利用Red同源重组系统介导缺口修复技术,分别抓捕牛aSl酪蛋白3’端调控序列(9kb)、hLYZ基因座序列(5kb)、牛axSl酪蛋白5’端调控序列(20kb),使这3个基因片段自动无痕地连接在基因抓捕载体上,形成牛oLSl酪蛋白一hLYZ杂合基因座。结果:实验经过PCR扩增、限制性内切酶酶切验证和序列测定,验证了hLYZ基因组序列对牛仪S1酪蛋白编码基因组序列精确置换。结论:这种修复技术为乳腺生物反应器高效表达大载体制备提供了可行思路及方法。

  • 标签: 牛αS1酪蛋白 人溶菌酶 杂合基因座 缺口修复技术
  • 简介:HLA-B27阳性患者人群中,内质网氨基肽酶1(ERAP1)基因多态性与强直性脊柱炎(AS)密切相关。内质网中,ERAP1可有效剪切抗原肽,使其成为适合HLA-Ⅰ类分子提呈寡肽。ERAP1基因多态性决定N端抗原肽修剪功能正常与否以及HLA-B27分子稳定表达。细胞水平研究表明,不同ERAP1等位基因组合对于抗原肽底物修剪能力决定了B27分子能否在细胞表面稳定表达。但是,功能型与功能异常型ERAP1如何影响HLA-B27抗原肽加工、B27稳定表达,以及如何影响AS疾病进程和免疫病理学改变等均未得到阐明。

  • 标签: 强直性脊柱炎 内质网氨基肽酶1 HLA-B27
  • 简介:现代林业对于社会可持续发展,保持生态环境有着极为重要价值与意义,成为当今社会发展中十分重要方面。尤其是近几年来,随着我国经济社会不断发展,环境问题日益突出,林业建设与发展引起了国家和社会广泛重视。

  • 标签: 现代林业 生态环境 可持续发展 环境保护
  • 简介:母体胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)是蔗糖非发酵1/AMP活化蛋白激酶(Snfl/AMPK)家族中一个独特成员,是一种周期依赖性激酶。与家族其他成员不同,MELK并不参与代谢应激状态下细胞生存调控,而更多参与细胞周期、细胞增殖、肿瘤生成和细胞凋亡等过程。MELK在人体多种肿瘤中表达升高,与肿瘤预后密切相关。MELK在肿瘤干细胞中被异常激活,使肿瘤细胞获得生长、侵袭、迁移等能力,因此,MELK可以作为肿瘤治疗重要靶点。我们就MELK基因生物学功能、作用机制及其在肿瘤研究中进展做简要综述。

  • 标签: 母体胚胎亮氨酸拉链激酶 细胞周期 胚胎发育 肿瘤形成 靶向治疗
  • 简介:蓝靛果忍冬又名蓝靛果、黑瞎子果、山茄子等,果实出汁率高,是制作饮料极好原料,被誉为“饮料之王”.经深入研究发现蓝靛果中含有丰富Vp活性物质,如花青甙、芸香甙,儿茶酸等,具有很高药用价值.蓝靛果不但有较高抗氧化性、抗肿瘤作用,还可以治疗胃溃疡、预防心脑血管疾病等.

  • 标签: 蓝靛果忍冬 花色苷 类黄酮 抗肿瘤
  • 简介:讨论速生桉施肥原因、现状和连续几代营林过程中林木生长变化,结合农田几十年来用肥和土壤理化性质和生化性质变化情况,提出开发利用有机肥、减少化肥在林地上使用,既提高木材生产能力,又维护桉树林区生态安全新思路。

  • 标签: 桉树 化肥 有机肥 速生 土壤
  • 简介:基于表观遗传性药物能够让癌症治疗进入新时代吗?我们接下来要提到生物公司名叫Epizyme,该公司创立于2007年一个加州夏日,当时正值全球最大生命科学投资公司之一MPMCapital举办年会。这家位于剑桥地区公司主要研发表观遗传学相关药物和疗法。每年,

  • 标签: 表观遗传学 生命科学 遗传性 MPM 药物 生物
  • 简介:目的:经慢病毒载体介导,制备转人α血红蛋白稳定蛋白基因(ahsp)β654地中海贫血小鼠。方法:用巢式PCR从人血DNA中获得人ahsp基因,构建含有人ahsp基因慢病毒载体,制备假病毒,通过卵周隙显微注射手段将其导入β654地贫小鼠受精卵,经移植至假孕母鼠输卵管,最终孕育出转人ahsp基因β654地贫小鼠;分析小鼠体内外源ahsp基因表达情况及其遗传稳定性。结果:共获得了8只人ahsp阳性小鼠,转基因阳性率为32%(8/25),其中3只同时具有β654突变基因;人ahsp基因在小鼠体内表达水平维持在小鼠自身ahsp表达量1%左右,且可稳定遗传至子代。结论:制备了转人ahsp基因小鼠,并可遗传至子代,为在个体水平上研究α血红蛋白稳定蛋白与β地贫之间关系提供了工具。

  • 标签: α血红蛋白稳定蛋白基因 β654地中海贫血 慢病毒载体 转基因小鼠
  • 简介:通过盆栽实验研究污泥湿式氧化处理后对小麦种子萌发情况及幼苗生长生理生化指标和对重金属吸收影响。结果表明施用湿式氧化处理后污泥,能够显著促进小麦种子萌发和幼苗生长,且小麦中重金属Cu、Zn含量均未超过国家食品卫生标准范围内。

  • 标签: 污泥湿式氧化 小麦 种苗实验 重金属
  • 简介:利用O-超家族芋螺毒素具有保守信号肽编码序列特性,采用RACE方法,对线纹芋螺O-超家族芋螺毒素cDNA进行克隆、序列测定,并经化学合成,获得一种新型高活性芋螺多肽毒素SO3。该肽含25个氨基酸残基,其序列为CKAAGKPCSRIAYNCCTGSCRSGKC-NH2,三对二硫键。对其进行了正确折叠及活性筛选。结果表明,该肽折叠主峰对小鼠脑内给药100ng,可明显观察到小鼠颤抖现象,对小鼠明显镇痛作用,而非正确折叠则无反应。

  • 标签: O-超家族芋螺毒素 线纹芋螺 SO3 折叠 活性
  • 简介:海洋微生物多糖主要是从海水、海泥和海藻中细菌中分离出来多糖,大多是微生物胞外多糖。海洋微生物资源丰富多样,由于其生存环境所限,微生物物种之间竞争十分激烈,多数微生物通过代谢产生了一些小分子有机化合物,此活性物质便可提炼出结构迥异、作用独特活性多糖。本文综述了海洋微生物多糖药用功能,对海洋微生物多糖药用价值进行了系统分析。

  • 标签: 海洋微生物 多糖 免疫调节 作用机制 药用价值
  • 简介:颗粒剂灌装是制药生产中关键一环内容,设计和采取科学合理灌装方式可以更好地提高制药生产水平和效率.本文就对于制药生产中颗粒剂灌装相关问题进行了分析与探讨.

  • 标签: 制药生产 颗粒剂 灌装方式
  • 简介:基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道一种表型克隆新方法,是目前寻找差异表达基因较有效方法,较过去方法许多先进之外。本文对此方法原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

  • 标签: 抑制消减杂交 表型克隆 定位克隆
  • 简介:目的探讨创伤病人急救护理措施。方法对本院急救护理措施进行总结。根据创伤救治原则,首先正确评估患者伤况同时,将护理人员合理分工,分别紧急施行止血、建立静脉通路以及严密观察病情等措施。结果治愈102例,治愈率89.47%;好转6例,好转率2.63%;伤残4例,伤残率4.38%;死亡2例,死亡率1.75%。结论护理合理分工能为抢救争取时间,提高抢救成功率。

  • 标签: 创伤 急救 护理体会
  • 简介:来自生物谷报道称:2010年两会期间,政协委员在关于“低碳”提案,据粗略统计约占10%。而关注“低碳”问题,换言之也就是关注民生问题。这对正处于高速发展之中,同时国力不断强大中国来说,完全是情理之中事情。

  • 标签: 转基因 战争 政协委员 低碳 生物
  • 简介:以探讨高职医学专科大学生心理健康状况为目的,对580名在校学生进行症状自评量表(SCL-90)、青少年心理价值取向研究。结果表明,医学专科大学生SCL-90总分高于全国常模,也高于非医学专业学生,心理障碍检出率为43.63%;家庭经济、学业成绩、就业去向为影响其心理健康主要因素。因此,医学专科大学生心理健康水平要引起心理健康工作者重视。

  • 标签: 医专学生 心理健康 健康教育 健康状况