简介：摘要目的本研究检测胃癌组织中端粒酶活性蛋白的表达，旨在探索端粒酶表达与胃癌的生物学行为和患者预后的关系。方法应用TRAP-PCR银染法检测40例胃癌组织和15例正常胃组织中端粒酶活性。同时收集每一例胃癌患者的临床病理资料，并将上述标记物与患者的临床病理参数（年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、病理类型、组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况、pTNM分期）进行相关性分析。结果端粒酶在正常胃粘膜的表达为13.3%(2/15)，胃癌组织中端粒酶阳性表达率为77.5%（31/40）,差异有显著性P＜0.01；端粒酶的表达与肿瘤浸润深度、pTNM分期及有淋巴结转移呈正相关P＜0.01。Logistic多因素回归分析示端粒酶活性是与肿瘤浸润深度相关的危险因素（P﹤0.05）。结论胃癌组织中端粒酶活性与胃癌的浸润转移密切相关，对它的检测有助于对胃癌患者的转移和预后做出更准确地判断，更好的指导胃癌的治疗。

简介：在表达端粒酶活性的细胞中,　　已知85％的人肿瘤组织中已发现了端粒酶活性的表达,在诸多其他肿瘤中同样有很高的端粒酶活性表达

简介：目的探讨端粒酶RNA（hTR）和反转录酶（hTERT）在银屑病皮损中的表达情况以及它们与角质形成细胞增殖关系。方法应用原位杂交方法检测银屑病皮损hTR、hTERTmRNA的表达，应用免疫组织化学方法检测Kj-67抗原表达，并对hTR、hTERTmRNA的表达与Ki-67抗原表达进行相关性分析。结果hTR表达在基底细胞、棘细胞、颗粒层细胞和所有有核细胞的胞浆，与细胞的增殖情况无关；其表达强度和阳性细胞百分率各组之间无明显差异（P〉0．05）。而hTERT的表达与细胞增殖状态有关，主要表达在基底细胞层和棘细胞层下方，表达强度和阳性细胞百分率要明显高于正常皮肤（P〈0．05）。Ki-67抗原主要表达在细胞生发层和分裂旺盛的组织；它的表达与hTERT的表达呈正相关（r=0．674，P〈0．01）；而与hTR（r=-0．295，P〉0．05）无关。结论hTERTmRNA在银屑病皮损中的表达明显升高，与细胞增殖活性有关。hTR的表达和细胞增殖活性无关。

简介：端粒酶不仅在肿瘤组织中高表达，在多种干细胞中亦有表达，该酶活性与干细胞维持自我更新的潜能密切相关。表皮干细胞（ESC）具有自我复制能力和多向分化潜能，是皮肤组织工程理想的种子细胞^[1-3]。

简介：

简介：端粒一端粒酶在肿瘤发生发展中起着重要的作用，因而成为近年来生命科学研究的热点之一。端粒（Telomeres）是Muller根据黑腹果蝇染色体末端保护功能而于1938年首次定义。端粒酶（Telomerase）则于1984年为Greider和Blackbum所发现。现就端粒一端粒酶系统及其在造血干细胞及血液系统恶性肿瘤中的表现综述如下。

简介：

简介：目的探讨外源性人端粒酶蛋白催化亚单位(hTERT)基因转染对人胚胎成纤维细胞(hEF)增殖的影响.方法体外培养hEF.应用脂质体转染法将pIRES2-增强性绿色荧光蛋白(EGFP)-hTERT正义重组质粒及pIRES2-EGFP空载质粒分别导入hEF中,相应称为hEF-hTERT和hEF-EGFP.采用蛋白质印迹法(Westernblot)检测正常hEF、hEF-hTERT、hEF-EGFP中hTERT蛋白、分化抑制因子Id1、增殖细胞核抗原(PCNA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达水平.用噻唑蓝(MTT)法测定3种细胞的生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期并计算增殖指数(PI).结果(1)Westernblot:与hEF-EGFP和hEF比较,hEF-hTERT中的hTERT蛋白、Id1、PCNA和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平均较高.(2)MTT法:细胞接种后第4-6天,hEF-hTERT的吸光度(A)值明显高于hEF和hEF-EGFP(P<0.05),接种后1-6dhEF与hEF-EGFP的A值比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(3)细胞周期:与hEF-EGFP和hEF比较,hEF-hTERTG0/G1期细胞较少,S、G2/M期细胞较多;其PI为57.47%,高于hEF-EGFP(13.13%)和hEF(17.38%).结论外源性hTERT基因转染可使hEF增殖能力增强.

简介：目的探讨卵巢癌组织与癌旁组织端粒酶的表达情况。方法利用TRAP-银染方法对36例卵巢癌组织标本及对应32例癌旁正常组织和30例卵巢良性肿瘤组织标本检测分析。结果卵巢癌组织，癌旁组织和卵巢良性肿瘤组织端粒酶表达活性分别为91.67%，3.13%和6.67%，卵巢癌组明显高于其他两组，有显著性差异（P<0.01)；癌旁组织与卵巢良性肿瘤之间无显著性差异（P>0.05)；结论卵巢癌组织与癌旁组织端粒酶活性表达存在显著性差异。为卵巢癌患者保留卵巢功能手术提供理论依据。

简介：目的检测卵巢上皮性癌患者化疗前后端粒酶活性的变化，探讨以顺铂为主的联合化疗对卵巢癌端粒酶活性的抑制作用。方法43例原发性卵巢上皮性癌患者行首次卵巢癌细胞减灭＋淋巴结清扫术，采用TRAP-PCR-银染法测定癌组织的端粒酶活性；RT—PCR法测定hTERT基因的表达；抗生素一生物素过氧化酶复合物（SP）免疫组化法检测hTERT蛋白的表达。术后予顺铂＋环磷酰胺（A组）、顺铂＋紫杉醇（B组）、顺铂＋环磷酰胺＋多柔比星（C组）全身化疗6．5（6～8）个疗程，选取临床检查和影像学检查未发现肿瘤残存、血液CA125水平在正常范围者30例（A组13例，B组11例，C组6例）行二次探查术，术中取原病灶周围组织活检，测定其端粒酶活性、hTERT基因及其蛋白的表达变化。随访3组患者的5年生存率。结果43例卵巢上皮性癌患者化疗前端粒酶活性的高低与病理类型、病理分级、FIGO分期无关，差异无统计学意义（P〉0．05）。化疗后3组化疗方案均有下调端粒酶活性的作用，化疗前后端粒酶活性阳性率分别为88．37％、36．67％，差异有统计学意义（P〈0．05），其中B组下调端粒酶hTERT蛋白的表达较明显（P〈0．05）。化疗后hTERT蛋白的表达较化疗前明显下调（P〈0．05），但患者5年生存率无明显提高（P〉0．05）。结论卵巢上皮性癌以顺铂为主的联合化疗具有抑制端粒酶活性的作用，顺铂＋紫杉醇化疗后端粒酶活性下调明显，但未能提高患者5年生存率，可能与化疗药物的耐药性有关。

简介：

简介：摘要目的研究端粒酶逆转录酶（hTERT）基因对纤维肉瘤生长的影响。

简介：临床上肾上腺肿瘤的良、恶性难以鉴别，缺乏早期诊断依据，给临床治疗带来一定困难。端粒酶是由蛋白质和RNA构成的逆转录酶。与细胞周期、衰老、凋亡和永生化密切相关，恶性肿瘤中端粒酶激活而使细胞获得永生化。细胞周期蛋白依赖激酶抑制在蛋白细胞周期调控网络中发挥负调节作用，而细胞周期调控网络的异常与肿瘤的发生发展密切相关。目前研究提示二者在肾上腺肿瘤中的表达均有异常，可能联合参与肾上腺肿瘤的发生、发展，为肾上腺肿瘤的诊断和治疗提供依据。

简介：为探讨端粒酶活性对急性髓细胞白血病(AML)的诊断、治疗及预后的临床意义,采用TRAP-ELISA定量检测AML端粒酶活性。14例AML端粒酶活性A值为0.238±0.042,明显高于正常对照组(0.094±0.003),而化疗前明显高于化疗缓解后病例。上述结果提示端粒酶活性测定是诊断AML的辅助手段,对于判断预后有一定临床意义。

简介：摘要目的探讨端粒酶活性检测对慢性粒细胞白血病（CML）的临床意义。方法选取20例慢性期和10例急性转化期（加速期或急变期）的CML病例，以良性血液病病人和正常人作对照，采用改良TRAP-银染法及亚利恩凝胶成像系统分析检测其骨髓标本内的端粒酶活性水平并随访。结果良性血液病端粒酶阴性或低水平表达；CML慢性期端粒酶活性中等增高（F=36.38，q=5.84，P<0.01），阳性率达35%（7/20）；急性转化期时端粒酶活性较慢性期显著升高（q=12.06，P<0.01），阳性率达80%（8/10）。端粒酶活性水平与CML预后相关，活性高者往往预后较差。结论端粒酶活性与CML的发生发展密切相关。端粒酶活性检测可以作为CML诊断、病程监测及预后判断的一个有用的生物学指标。

简介：摘要端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的RNA酶，其基本组成成分主要有两种一种为功能性RNA，作为合成端粒DNA的模板；另一种是一类特殊蛋白（端粒酶催化亚基，hTERT），具有高活性催化作用和逆转录活性。近年来的研究发现，作为人端粒酶催化组分的hTERT在正常细胞中的表达受到多种相关机制的抑制，但在永生化细胞、肿瘤细胞等分裂不受抑制的细胞中却存在过表达现象，提示hTERT是控制端粒酶活性的重要因素，因此，研究端粒酶蛋白催化亚基在头颈肿瘤细胞分裂周期中的活性表达对于该类疾病的治疗与控制均有十分显著的意义。

简介：目的研究miR-34a对脐静脉内皮细胞端粒酶活性及细胞衰老的影响。方法原代培养人脐静脉内皮细胞（Humanumbilicalveinendothelialcells，HUVECs），通过传代培养，计算细胞群体倍增水平（Populationdoublings，PDL），得到年轻的内皮细胞（PDL8）及衰老细胞模型（PDL44），检测两组细胞SIRT1、hTERT、c-myc、p53及miR-34a表达水平的差异。并在PDL8细胞中过表达miR-34a，PDL44细胞中抑制miR-34a的表达，qmCR检测以上基因表达水平、TRAP-qPCR法检测端粒酶活性、SA-β-gal法显示细胞衰老状态的变化。结果SIRTl、hTERT、c-myc基因在PDL44的HUVECs细胞中表达下调，p53及miR-34a表达上调。PDL8HUVECs过表达miR-34a48h后，SIRT1和hTERT表达分别下调43％和25％，TRAP．qPCR显示端粒酶活性降低21％，SA-β-gal法染色阳性细胞百分比由5．1％上升至8．7％；PDL44HUVECs抑制miR-34a的表达，SIRT1和hTERT表达水平分别上调63％和30％，端粒酶活性上升20％，SA-β-gal法染色显示衰老细胞数量未见显著性变化。结论MiR-34a可以抑制内皮细胞SIRT1、hTERT基因表达及端粒酶活性，加速细胞衰老；抑制miR-34a可以上调SIRT1及hTERT表达，端粒酶活性升高；因此miR-34a可能通过抑制SIRT1表达和端粒酶活性的共同作用，参与内皮细胞衰老的调节。

简介：目的：检测外源性骨形成蛋白4（bonemorphogeneticprotein4，BMP4）对体外连续传代培养人骨髓基质细胞（bonemarrowstromalcells，BMSCs）生长和人端粒酶反转录酶催化亚单位（humantelomerasereversetranscriptase，hTERT）表达水平的影响，探讨BMP4对BMSCs体外传代培养过程中细胞老化的调控作用。方法：取第1、3和7代rhBMP4诱导组和对照组BM—SCs，细胞计数，免疫荧光染色检测hTERT表达，实时荧光定量聚合酶链反应检测第3和7代BMSCs中hTERTmRNA表达，统计学分析。结果：rhBMP4诱导组各代BMSCs细胞数均显著高于对照组（P〈0．05）：免疫荧光示hTERT在第1和第3代rh—BMP4诱导组和对照组BMSCs均为细胞核表达，在第7代诱导组保持细胞核表达，而第7代对照组则表现为细胞浆表达。实时荧光定量聚合酶链反应显示，hTERT在第3和第7代诱导组BMSCs的表达均显著高于对照组（P〈0．05）。结论：BMP4可促进BMSCs生长，维持传代后期hTERT表达，延缓细胞老化。

简介：摘要目的研究核酸内切酶RNaseH-1对使用端粒的替代延长(ALT)机制来延长端粒的骨肉瘤细胞放射敏感性影响及机制。方法通过慢病毒转染构建过表达RNaseH-1的ALT骨肉瘤细胞U2OS和端粒酶阳性骨肉瘤细胞143B。对转染后的细胞使用CCK8法检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期。克隆形成实验检测放射敏感性，免疫荧光实验检测细胞DNA损伤(γ-H2AX灶点)情况，蛋白印迹法实验检测相关蛋白表达水平。结果过表达RNaseH-1后U2OS细胞的增殖能力显著降低，且细胞周期阻滞于G1期(均P<0.05)。U2OS细胞中RNaseH-1的过表达使ATM和Chk2的磷酸化水平显著升高、同源重组相关蛋白RAD51和BRCA1的表达显著降低，并导致细胞中DNA损伤水平显著上升、细胞放射敏感性增强(均P<0.05)。而过表达RNaseH-1不对端粒酶阳性的143B细胞产生抑制效应(P>0.05)。结论过表达RNaseH-1抑制了端粒酶阴性骨肉瘤细胞并增强了放射敏感性，其机制可能是RNaseH-1在ALT细胞中抑制同源重组修复并激活ATM信号通路。

简介：目的探讨幽门螺杆菌（Hp）、端粒酶基因（hTERT）、p53在胃癌及癌前病变中的表达及相关性。方法采用特殊染色、免疫组化和原位杂交方法，分别检测130例石蜡包埋标本中的Hp感染、p53蛋白和hTERTmRNA的表达。结果①在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、非典型增生和胃癌患者中Hp的感染率分别为40％、60％、70％和72．5％。胃癌与慢性浅表性胃炎比较差异有统计学意义（P〈0．05）。四种病变中p53蛋白的表达率分别为5％、25％、50％、62．5％，其中胃癌与慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎比较差异有统计学意义（P〈0．01）。hTERTmRNA的表达率分别为0、10％、30％、78．75％，胃癌与慢性萎缩性胃炎、非典型增生相比差异有统计学意义（P〈0．05）。②Hp感染阳性的胃癌病例，p53、hTERTmRNA阳性的表达率明显高于Hp阴性胃癌病例（P〈0．05）；p53阳性的胃癌中端粒酶基因表达均为阳性，p53阴性的胃癌中有部分端粒酶基因表达阳性（66．7％）。结论Hp感染与p53基因的突变、hTERT活性密切相关；p53基因突变可导致端粒酶活化，但端粒酶激活可能不完全依赖于p53基因的调控。