简介:【摘要】目的 探讨ALPPS(联合肝脏分隔和门静脉结扎二步肝切除术)术后大鼠残余肝脏再生的机制研究。方法 第一部分将72只成年雄性SD大鼠按1:1:1随机分为3组。按试剂说明书将1mg C59溶解于100ml DMSO后,分别按1mg/kg;1.5mg/kg;2mg/kg(C59剂量/大鼠体重)腹腔注射于大鼠后,每组分别于1天、2天、4天、7天后将大鼠麻醉,收集肝脏组织标本。western blot法对各组大鼠肝脏中Wnt2、Wnt3a量进行定量,决定Wnt信号通路抑制剂C59抑制肝脏Wnt信号通路的最佳反应剂量及反应时间。第二部分将成年雄性SD大鼠18只,按1:1:1随机分为假手术Sham组、ALPPS组和ALPPS+Wnt抑制剂C59组三组,每组6只。计算各组大鼠的死亡率并绘制生存曲线;用ELISA法对各组大鼠血清中的ALT、AST等肝功能指标进行测定;HE染色观察肝脏病理学变化。通过计算各组大鼠术后肝右中叶质量与大鼠体重比。western blot方法对各组肝脏组织中MYC、周期蛋白Cyclin-D1等增殖相关蛋白、Wnt2、Wnt3α、β-catenin、phosphorylation-β-catenin等通路蛋白进行定量检测;用免疫组化方法对MYC、周期蛋白Cyclin-D1、肝细胞生长因子( hepatocyte growth factor,HGF)、Ki-67进行检测。结果 (1)C59在浓度为1mg/kg反应至第7天时对Wnt信号通路抑制最为明显。(2)ALPPS组大鼠的存活率较其他组相比差异无统计学意义(P>0.05),肝功较假手术组相比明显升高,但随着时间推移呈现出逐渐下降好转趋势。(3)ALPPS组肝脏再生更为显著较ALPPS+C59组及假手术组。(4)在术后第7天,ALPPS组肝脏组织增值相关蛋白MYC、周期蛋白Cyclin-D1、肝细胞生长因子( hepatocyte growth factor,HGF)、Ki-67表达水平显著升高(P<0.05)。(3)术后第7天,ALPPS+C59组较ALPPS组,Wnt-β-catenin信号通路关键分子Wnt2、Wnt3α、phosphorylation-β-catenin表达水平显著下降(P<0.05)。结论 ALPPS术后促进肝脏细胞增殖再生是安全且有效的,并和Wnt-β-catenin信号通路信号通路被激活有关,该研究为ALPPS策略治疗肝癌提供了新的理论依据。
简介:烟曲霉是一种通过空气传播的机会性致病真菌。其感染免疫功能低下患者肺部并引起严重的侵袭性曲霉病。锌是微生物生长所必需的微量元素,所有真菌包括烟曲霉生长都需要锌元素。有研究表明宿主体内的真菌毒力高低与真菌摄取锌的能力直接相关。由于元素锌在人体内大部分与锌结合蛋白结合导致在宿主组织微环境中的离子浓度远低于真菌最适生长浓度。烟曲霉演化出几种锌转运蛋白,使烟曲霉能够在锌缺乏的条件下有效吸收锌元素,同时抵抗锌元素过量,防止对烟曲霉细胞造成损害。本文将总结概述烟曲霉锌稳态调控对其生长发育及毒力的作用以及相关基因。明确烟曲霉对元素锌水平调控基因的研究现状并探讨干扰烟曲霉锌稳态是否会成为开发治疗侵袭性曲霉病的新一代辅助治疗措施和真菌治疗方案。