简介:Objective:ToconstructamutantpEGFP-hTERTexpressionvector,toobserveitssteadyexpressionintransfectedhumanbladdercarcinomacelllineT24anditsroleinmolecularregulatorymechanismsoftelomerase,andtoprovideanewtargetgeneforbladdercancer.Methods:PCRamplificationwasperformedbyusingprimersbasedontheknowngenesequenceofhTERT.PCRproductionwasclonedintoplasmidpGEMT-TeasyandthesequenceofmutanthTERTgenewasanalyzed.ArecombinantmutanthTERTvector(pEGFP-hTERT)wasconstructedattheEcoRIandSalIsitesofthepEGFP-C1vector.AftertransfectingthefusiongeneintobladdercarcinomacelllineT24bycalciumphosphate-DNAcoprecipitation,thesteadyexpressionofGFP-hTERTfusionproteinwastestedbyfluorescentlightmicroscopy.TheproliferationchangesofbladdercarcinomacelllineT24weredetectedbylightmicroscopyandsenescencecorrelatedβ-galactosidasestaining.Results:IdentificationofpEGFP-hTERTbyenzymedigestionshowedthatmutanthTERTfragmenthadbeenclonedintoEcoRIandSalIsitesofthepEGFP-C1vector.ThesteadyexpressionofGFP-hTERTfusionproteinwaslocalizedinthenucleusoftransfectedcells.Expressionofsenescence-associatedβ-galactosidaseintransfectedcellsgraduallyincreasedwithextendedculturedtimeandcellgrowthwassuppressed.Conclusion:Themutant-typehTERTgenesuppressestheproliferationofbladdercarcinomacelllineT24bycompetitiveeffectontelomeraseactivity.ThissuggeststhathTERTgenemightbeasuitablegenetargetforbladdercancertherapy.
简介:Objective:MemorystemTcells(Tscm)haveattractedattentionbecauseoftheirenhancedself-renewal,multipotentcapacity,andanti-tumorcapacities.However,littleisknownaboutTscminpatientswithrenalclearcellcarcinoma(RCC)andtheroleofWntsignalinginthesecells.WeevaluatedTscmfromRCCpatientsconcerningtheiractivationofWntsignalinginvitroandexploredthemechanismofpreferentialsurvival.Methods:FlowcytometryidentifiedsurfacemarkersandcytokinesproducedfromaccumulatedTscminthepresenceoftheglycogensynthasekinasebetainhibitorTWS119.Apoptosiswasevaluatedafterinductionusingtumornecrosisfactor-alpha.ImmunofluorescenceandWesternblotanalyseswereusedtoinvestigatetheactivationofthenuclearfactor-kappaB(NF-КB)pathway.Results:RCCpatientshadasimilarpercentageofCD4~+andCD8~+Tscmashealthydonors.ActivationofWntsignalingbyTWS119resultedintheaccumulationofTscminactivatedTcells,butreversalofdifferentiatedTcellstoTscmwasnotachieved.PreferentialsurvivalofTscmwasassociatedwithincreasedanti-apoptoticabilitymediateddownstreamoftheNF-КBactivationpathway.Conclusions:ThefindingthatTscmcanaccumulatebyWntsignalinginvitroinbloodfromRCCpatientswillhelpindevisingnewcancertherapystrategiesofTscm-basedadoptiveimmunotherapy,suchasdendriticcell-stimulatedTscm,andTcellreceptororchimericantigenreceptor-engineeredTscm.
简介:TheeffectofTPA,apotenttumorpromoter,onSSV-NIH3T3cellsinserum-freemediumwasinvestigated.TPAstimulatedDNAsynthesisofSSV-NIH3T3cellsonthethirddayofcultureinSFM.InSDS-PAGFofmediumconditionedbyTPA-treatedSSV-NIH3T3cells(inSFM+TPA),theamountsoffourproteinsof31.0Kd,28.5Kd,25.5Kdand13.5Kdstrikinglyincreasedoverthatofnon-TPA-treatedcounterpart(inSFM).ThePDGF-likeactivitywasalsodetectedinCMofSFM+TPA.WheninsulinandEGFweredrownofftheSFM+TPA(SFM-Ins-EGF+TPA),TPAlostitsabilitytostimulateDNAsynthesisofSSV-NIH3T3cellsonthethirddayandSDS-PAGEoftheconditionedmediumshowedthattheamountsofthefourproteinsnotedabovegratelyreduced.However,cellsinSFM-Ins-EGF+TPAwereinalmostthesamegrowthconditionascellsincompleteSFM+TPAonthethirddayofculture.Resultswerediscussedinthepaper.
简介:目的探讨恶性淋巴瘤患者T淋巴细胞亚群的变化特点。方法采用流式细胞术检测24例各型恶性淋巴瘤患者及20例正常人的外周血中T淋巴细胞(CD3+细胞)、辅助性T细胞(CD4+)、抑制性细胞毒T细胞(CD3+/CD8+)、NK细胞(CD3-/CD16+56)和NKT细胞(CD3+/CD16+56),对两者百分比进行比较分析。结果患者组中辅助性T细胞(CD3+/CIM+/CD8-)的百分比和绝对值明显低于正常对照组(P〈0.01),而患者组中CIM/CD8细胞亦明显低于正常对照组(P〈0.01)。结论在恶性淋巴瘤发生发展的过程中了解淋巴细胞亚群的变化,可为后期病情判断及可能采取的相关治疗提供依据。
简介:目的:比较Deauville5分法及△SUV法在化疗中期滤泡性淋巴瘤(follicularlymphoma,FL)患者预后评估中的作用。方法:回顾性分析2009年5月至2017年3月病理确诊为FL的患者共22例,其中男性10例,女性12例,年龄22~88(中位年龄56)岁。患者化疗前、4程化疗后均行18F-FDGPET/CT显像。以Deauville评分4分为界点分成2组,行组间Kaplan-Meier生存分析。分别计算治疗前后SUVmax的差值(△SUVmax)及SUVmax下降百分比(△SUVmax%),ROC曲线计算最佳临界值并分组,行组间Kaplan-Meier生存分析。结果:Deauville评分<4分组较Deauville评分≥4分组2年无进展生存期(progressfreesurvival,PFS)明显延长,且有统计学差异(P=0.000)。22例患者进展12例(12/22,54.5%),无进展10例(10/22,45.5%)。进展组与无进展组△SUVmax分别为2.8±3.4、6.9±2.6,两者有统计学差异(P=0.005);进展组与无进展组△SUVmax%分别为(29.9±0.35)%、(80.6±0.09)%,两者有统计学差异(P=0.001)。结论:Deauville5分法在中期化疗后评分对于预测FL患者预后有一定价值。
简介:目的:本文通过对12例采用颞浅动脉逆行插管灌注化疗治疗的鼻型NK/T细胞淋巴瘤病例进行研究,对化疗疗效、毒副反应情况进行分析。方法:12例患者,男性9例,女性3例;年龄最小22岁,最大65岁。病理确诊为鼻型NK/T细胞淋巴瘤8例;病理诊断为“慢性炎症”,临床确诊为鼻型NK/T细胞淋巴瘤4例。10例患者因累及面部中线两侧,故采用双侧颞浅动脉插管颌内动脉灌注化疗。方案采用顺铂(Cisplatin)13—25mg/m^2,d1-5,d29-33;足叶乙甙(Etopside)100mg·d-1,d1-5,d29-33;平阳霉素(Pinyangmycin)10mg/d,d1-5,d29-33;甲环亚硝尿(Me—CCNU)100—150mg/d,d1;强的松(Prednisone)25mg/m^2,d1-14。所有患者采用颞浅动脉插管灌注完成了一周期化疗。第56天评价疗效。结果:所有患者经动脉灌注化疗一周期后,CR:6例,PR:4例,NC:2例。本组患者毒性反应以血液毒性为主。无因毒性反应影响治疗或因毒性反应退出治疗者。结论:PDD+Vp16+PYM+Me—CCNU+PED动脉内插管灌注化疗治疗鼻型NK/T细胞淋巴瘤具有较好的临床疗效,值得进一步研究。
简介:近来CD4^+CD25^+调节性T细胞对肿瘤免疫调节的抑制作用正受到越来越多的重视,许多恶性肿瘤患者外周血都存在CD4^+CD25^+调节性T细胞比例上调,机体抗肿瘤免疫力下降。大肠癌的发病率正逐年上升,其发病分子机制已为熟知,免疫机制研究不多,国内尚未见大肠癌与该类细胞关系的报道,现对CD4^+CD25^+调节性T细胞在大肠癌的发生、发展、治疗中的研究综述如下。
简介:客观:为了改进倔强的脸中部的外部T房间non-Hodgkin鈥檚的功效,有L天门冬氨酰胺酶(LASP)的淋巴瘤(MPTC-NHL)基于抢救化疗。方法:有倔强的MPTC-NHL的21个病人被分析,11patients(LASP组)收到了L天门冬氨酰胺酶基于的抢救化疗由L天门冬氨酰胺酶,长春新碱和dexame-thosone组成。没有L天门冬氨酰胺酶,10个病人(控制组)收到了抢救联合化疗。结果:完全的宽恕率为LASP组是45.6%,0.0%为控制组织(P<0.05)。全面反应率(CR+PR)为LASP组是63.6%,10.0%为控制组织,分别地(P<0.05)。2年的幸存率为LASP组是45.5%,0.0%为控制组织(P<0.05)。LASP的主要不利效果是白细胞减少,浆液bilirubin和多糖症的举起。结论:LASP基于的初步的临床的学习表演抢救化疗可以与倔强的MPTC-NHL改进反应率和病人的2年的幸存率。进一步继续学习是必要的。
简介:目的:建立可用于活体成像的小鼠大肠癌肝转移移植瘤模型。方法:利用慢病毒将荧光素酶表达载体转染至人肠癌L〇V〇细胞株,经嘌呤嘧啶筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。进行裸鼠脾脏注射,采用脾脏注射切脾法和保脾法两种方法制造结肠癌肝转移模型,比较小鼠肝转移情况,并对肝脏组织进行HE染色,分析肿瘤细胞的生长分布特点。结果:建立了肠癌细胞株的荧光素酶基因稳定表达的亚克隆,两组经脾注射方法肝转移率均为65%以上,具有可操作性,切脾组具备更多的肝脏转移数及更高的肝脏成瘤率。结论:成功构建了可用于活体成像的小鼠肠癌肝转移移植瘤模型,确定了脾脏注射切脾法制造小鼠结肠癌肝转移模型是较好的造模方法。
简介:目的比较两种截骨矫形术式治疗强直性脊柱炎(ankylosingspondylitis,AS)重度胸腰椎后凸畸形的临床效果及围手术期并发症。方法将2009年5月至2013年12月,33例后凸>70°的AS重度胸腰椎后凸畸形患者,根据截骨术式的不同分为两组。双节段(pediclesubtractionosteotomy,PSO)组(18例):均为男性,年龄19~47(平均34.8±10.6)岁;脊柱后凸Cobb’s角(82.6±17.5)°(70~108)°;C7铅垂线与骶骨后上角之间的垂直距离(sagittalverticalaxis,SVA)为(18.3±14.8)cm(11~35)cm;站立位颌眉垂线角为(67.2±21.9)°(43~130)°;单节段(closing-openingwedgeosteotomy,COWO)组(15例):男13例,女2例,年龄22~43(平均31.2±8.5)岁,脊柱后凸Cobb’s角(76.3±11.2)°(73~98)°;SVA为(16.7±7.3)cm(10~26)cm;颌眉垂线角为(63.5±15.6)°(47~86)°。比较两组的临床矫形效果及围手术期并发症。结果双节段PSO组脊柱后凸角、颌眉垂线角以及SVA矫正率分别为(74.2±8.3)%,(86.2±9.5)%和(83.6±10.2)%;COWO组脊柱后凸角、颌眉垂线角以及SVA矫正率分别为(70.2±6.5)%,(86.6±8.3)%和(88.0±8.7)%,以上矫正率两组之间差异无统计学意义(P>0.05);但在手术时间和出血量上,两节段PSO组明显高于COWO组(P<0.05)。COWO组围手术期并发症发生率显著高于双节段PSO组(P<0.05),尤其以术中螺钉松动和截骨断端移位发生率高。结论对AS重度胸腰椎后凸畸形患者,单节段COWO可以取得与双节段PSO相似的临床效果,且单节段COWO手术时间短,出血量少,但围手术期并发症相对要高。
简介:目的:胃肠道间质瘤是消化系统常见恶性肿瘤,对放疗和常规化疗不敏感,格列卫是唯一能够对间质瘤有抑制作用的药物,寻求能和格列卫起到协同抑制作用的药物对治疗间质瘤意义重大。方法:本实验采用辛伐他汀联合格列卫对人胃肠道间质瘤细胞GIST-T1进行体外抑制实验,使用MTT和凋亡检测药物的作用效果,并使用Westernblot检测其可能的机制。结果:辛伐他汀联合格列卫对GIST-T1的增殖抑制作用较单药更为明显,该作用是通过caspase-3介导的凋亡途径完成的。使用JNK抑制剂SP600125可以逆转辛伐他汀造成的凋亡,进而减少辛伐他汀造成的细胞杀伤。结论:辛伐他汀可以通过磷酸化JNK-MAPK信号通路诱导凋亡的途径,促进格列卫对间质瘤细胞系GIST-T1的杀伤作用,可能会对临床格列卫的治疗提供增效作用。
简介:Objective:ToinvestigatetherelationshipbetweenNAD(P)H:quinoneoxidoreductase1(NQO1)C609TpolymorphismandcoloncancerriskinfarmersfromwesternregionofInnerMongolia.Methods:Polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism(PCR-RFLP)wasperformedtoanalyzeNQO1C609Tpolymorphismfrom160healthycontrolsand76coloncancerpatients.Results:Amongthecoloncancerpatients,theincidenceofNQO1Tallele(53.29%)wassignificantlyhigherthanitincontrolgroup(33.75%,P<0.001).TheindividualswithNQO1Tallelehadhigherrisk[2.239(95%CI:1.510-3.321)times]todevelopcoloncancerthanindividualswithNQO1Callele.TheincidenceofNQO1(T/T)(34.21%)incoloncancerpatientswashigherthanthatincontrolgroup(15.62%,P<0.001).Oddsratios(OR)analysissuggestedthatNQO1(T/T)andNQO1(T/C)genotypecarriershad3.813(95%CI:1.836-7.920)timesand2.080(1.026-4.219)timesriskcomparedwithwild-typeNQO1(C/C)genecarriersindevelopingcoloncancer.IndividualswithNQO1(T/T)genotypehad2.541(95%CI:0.990-6.552)times,3.713(95%CI:1.542-8.935)times,and3.471(95%CI:1.356-8.886)timesriskthanindividualswithNQO1(T/C)orNQO1(C/C)genotypeinwelldifferentiated,moderately-differentiated,andpoorly-differentiatedcoloncancerpatients,respectively.Conclusions:NQO1geneC609TcouldbeoneofriskfactorsofcoloncancerinfarmersfromwesternregionofInnerMongolia.
简介:目的探讨肿瘤组织中调节性T细胞(Tregs)浸润与患者临床病理特征的关系及其对患者预后的影响.方法免疫组织化学法检测76例肝癌患者肿瘤和癌旁组织中Tregs浸润情况,分析Tregs高表达、低表达与患者临床病理特征之间的关系,采用Kaplan-Meier生存分析法评估Tregs浸润对肝癌患者预后的影响.结果肿瘤组织中Tregs浸润与患者性别和门静脉癌栓显著相关(P<0.05),而与肝内多发瘤灶、HBV感染、血清AFP水平、肿瘤大小、肝硬化、肿瘤包膜完整性、Edmonson分级等无相关性(P>0.05).Tregs低表达组DFS和TS均显著高于Tregs高表达组(P=0.012和P=0.022).生存分析显示,肝内多发病灶、包膜有无、门静脉癌栓形成(PVTT)和瘤内Tregs浸润显著影响患者无瘤生存率(P<0.05),其他因素如年龄、性别、乙肝状态、AFP水平、Child-pugh分级、肝硬化有无、Edmonson分级、癌旁和瘤内CD4+、CD8+T细胞浸润等均对患者DFS无显著影响(P>0.05).上述因素中,仅PVTT和瘤内Tregs浸润显著影响患者总体生存率(P<0.05).多因素风险模型分析,包膜完整与否(OR=1.816,95%CI:1.084-3.041,P=0.023)和瘤内Tregs浸润(OR=1.931,95%CI:1.153-3.233,P=0.012)是影响患者DFS的独立预后因素;瘤内Tregs浸润(OR=1.843,95%CI:1.073-3.166,P=0.027)是影响患者OS的独立预后因素.结论肿瘤组织中Tregs高表达的肝癌患者预后不良,Tregs高表达有可能促进PVTT形成,Tregs有可能成为肝癌免疫治疗的作用靶点.