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简介：目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Westernblot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.

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简介：目的对近3年来尿路感染的菌谱及细菌耐药性进行调查分析，指导临床合理用药。方法收集从我院尿路感染患者尿液标本中分离的828株病原菌进行细菌鉴定及药敏试验（Kirby-Bauer法），并对革兰阴性杆菌进行超广谱8内酰胺酶（ESBLs）的检测。结果近3年尿路感染以革兰阴性杆菌为主，占68．24％，列前3位的是大肠埃希菌（56．64％），粪肠球菌（10．1）2％）、真菌（8．56％）。2004年至2006年超广谱8内酰胺酶大肠埃希氏菌比例呈上升趋势（分别占7．59％、23．2％、22．04％）。产酶大肠埃希菌对亚胺培南的耐药率是1．4％，对呋喃妥因的耐药率是23．21％，对头孢类耐药率59．38％～97．26％，对复方新诺明耐药率是95．31％。非产酶大肠埃希菌对亚胺培南的耐药率是0．3％，对呋喃妥因的耐药率是18．14％，对头孢类耐药率从8．87％～31．1）6％不等，对复方新诺明耐药率是72．62％。细菌对各种抗生素有不同程度的耐药性，表现为多重耐药。结论革兰阴性杆菌为尿路感染的主要病原菌，且产超广谱β内酰胺酶的大肠埃希菌呈上升趋势，定期监测尿路感染细菌谱及耐药性变化对于指导临床合理应用抗生素具有十分重要的意义。

简介：目的比较经尿道等离子体前列腺剜除术（PKEP）与经尿道等离子体前列腺切除术（PKRP）在Ⅳ度良性前列腺增生（BPH）的临床疗效。方法将具有手术指征的100例Ⅳ度BPH患者随机分为两组,分别行PKEP和PKRP,监测记录患者围手术期和术后随访1年的临床资料（包括手术时间、切除前列腺重量、术中出血量、术后膀胱冲洗时间、留置尿管时间和住院时间,以及术后1年国际前列腺症状评分、生活质量评分、残余尿量、最大尿流率）,对所测指标行统计学分析。结果术前两组一般情况（年龄、前列腺大小、合并症情况等）比较,差异无统计学意义（P〉0.05）；PKRP组、PKEP组术中出血量、手术时间、术后平均膀胱冲洗时间、置管时间和住院时间分别为（180.5±15.2）和（110.3±14.8）ml、（95.1±4.5）和（70.4±4.6）min、（3.6±1.5）和（3.0±1.4）d、（5.1±1.0）和（4.4±0.7）d、（7.5±1.4）和（6.2±1.5）d,以上指标PKEP组明显少于PKRP组（P＆lt;0.05）,切除前列腺重量PKEP组[（60.5±3.4）g]明显多于PKRP组[（54.0±3.6）g],术后1年两组患者残余尿量、最大尿流率均比术前明显改善（P＆lt;0.05）。结论PKEP治疗BPH具有与PKRP相近的近期疗效,而患者术中并发症发生率、恢复时间PKEP组明显少于PKRP组,PKEP可安全、有效治疗BPH,可作为手术治疗BPH的一种选择。

简介：数字对象惟一标识符（digitalobjectidentifier，DOI）是对包括互联网信息在内的数字信息进行标识的一种工具。在传统的出版物中，书刊、磁带、光盘都有国际标准编号（IsBN、ISSN、ISCN）及其条形码，作为出版物的惟一标识。这些标识使出版物得到有效的管理，便于读者查找和利用。而网上的文档一旦变更了网址便无从追索。数字信息标注DOI如同出版物的条形码，是一个永久和惟一的标识号。

简介：本刊继续教育园地栏目每期推出,只要您每期阅读该栏目,正确填写答题卡并寄回本刊编辑部,您就有机会获得由中华医学会颁发的继续再教育学分4分和本刊全年杂志1～6期共6本。测试题(1～7题为单选题,8～10题为多选题;文章见本期第57页,答题卡见本页):

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简介：数字对象惟一标识符（digitalobjectidentifier，IX）I）是对包括互联网信息在内的数字信息进行标识的一种工具。在传统的出版物中，书刊、磁带、光盘都有国际标准编号（ISBN、ISSN、ISCN）及其条形码，作为出版物的惟一标识。这些标识使出版物得到有效的管理，便于读者查找和利用。而网上的文档一旦变更了网址便无从追索。数字信息标注DOI如同出版物的条形码，是一个永久和惟一的标识号。

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