简介：摘要慢性疼痛发病率高、病因复杂、机制不明，严重威胁人类身心健康。现有镇痛药物对慢性疼痛的疗效不佳且副作用较大，因此有必要深入研究慢性疼痛的发病机制，寻找安全、有效的治疗策略。研究发现，胱天蛋白酶（caspase）家族在慢性疼痛中发挥促痛觉传递作用，caspase家族有望成为慢性疼痛治疗的关键靶点。文章通过整理归纳相关文献，就caspase家族参与神经病理性疼痛（neuropathic pain, NP）、炎性疼痛、癌性疼痛和肌肉骨骼疼痛等慢性疼痛的分子机制进行探讨并归纳总结，旨在为临床治疗慢性疼痛提供新思路。

简介：摘要目的探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9)，荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度，采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量，筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×105巨噬细胞和100 μg/ml β葡聚糖体外常规培养12、24 h后，分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组，采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×105巨噬细胞、1×105胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后，分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组，取下室的胰腺腺泡细胞，采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。结果siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强，浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后，巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06，β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强，且呈β葡聚糖剂量依赖性；而阴性细胞组、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。结论巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化，提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。

简介：摘要泛素化是细胞中广泛存在的蛋白质翻译后修饰形式，在调控机体免疫应答、炎症反应、细胞连接、细胞周期、细胞凋亡、DNA损伤修复等许多生命进程中发挥着重要作用。蛋白质的泛素化修饰也是可逆的，去泛素化酶通过水解多聚泛素链对底物蛋白去泛素化来调控蛋白质的寿命或功能，因此在泛素介导的信号转导通路中发挥作用。卵巢肿瘤相关蛋白酶(ovarian tumor-proteases，OTUs)属半胱氨酸家族，研究发现OTUs家族许多成员与病毒感染的调控密切相关，本文就近年来OTUs在宿主抗病毒方面的作用及机制进行综述。

简介：摘要基质金属蛋白酶是一类锌(Zn2+)依赖的蛋白水解酶族，几乎可降解所有细胞外基质，因此参与人体的许多病理过程，包括肿瘤的侵袭和转移、炎症反应、血管凋亡以及促纤维化等。本文就基质金属蛋白酶在常见肺部疾病的临床应用方面的研究进展作一综述。

简介：摘要目的观察耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）脓毒症患者外周血自然杀伤（NK）细胞亚群和功能，探讨基质金属蛋白酶（MMP）对MRSA脓毒症患者NK细胞功能的影响。方法选择2017年1月至2018年6月本科收治的MRSA脓毒症患者21例和健康对照者（NC）11例，分离外周血单个核细胞（PBMC），流式细胞术检测NK细胞亚群比例。通过检测PBMC与靶细胞共培养体系中CD107a、CD69、CD16的表达评估NK细胞功能。分选NK细胞，实时定量PCR法检测MMP mRNA，使用MMP抑制剂刺激NK细胞，检测共培养体系中CD107a变化。组间比较采用成组t检验或配对t检验。结果总NK细胞比例在NC和MRSA脓毒症患者之间的差异无统计学意义（P>0.05），MRSA脓毒症患者CD56brightCD16-NK细胞[（5.36±1.02)% vs (4.30±0.89)%]和CD56-CD16+NK细胞[（24.04±2.92）% vs （9.70±1.54）%]升高（P<0.05），CD56dimCD16+NK细胞（71.22±13.03）% vs （87.64±7.05%）]降低（P<0.01）。NK细胞通过不同受体介导相应靶细胞杀伤后，MRSA脓毒症患者NK细胞中CD107a[（33.55±3.84）% vs （25.34±6.20%）]和CD69[（14.96±1.47%） vs （18.80±1.49）%]比例低于NC（P<0.01），CD16 MFI[（247.1±50.31） vs （189.4±57.54）]高于NC（P<0.01）。MMP-1/2/3/9 mRNA在MRSA脓毒症患者NK细胞中的相对表达量升高（P<0.01）。抑制MRSA脓毒症患者NK细胞MMP使CD107a比例升高[（33.67±8.03%） vs （25.87±6.23）%，P=0.018]。结论MRSA脓毒症患者存在NK细胞亚群失衡和功能衰竭，这可能与MMP诱导的抗体依赖细胞介导的毒性作用降低有关。

简介：摘要α-1抗胰蛋白酶缺乏症是一种常染色体共显性遗传性疾病，以血液中低水平的α-1抗胰蛋白酶为标志，临床上主要表现为年轻患者的肺气肿和急/慢性肝损伤甚至肝癌等，治疗方法包括对症治疗和α-1抗胰蛋白酶的补充，但无法阻止肝脏纤维化的进展。目前国内已有10余例该疾病的报道，但是对该疾病的认识仍然不足，生物治疗药物空白。现就肝细胞移植治疗该疾病的研究进展进行介绍。

简介：摘要泛素－蛋白酶体通路是真核生物细胞内依赖ATP、非溶酶体途径的蛋白质降解通路，参与调控细胞周期、细胞凋亡、DNA修复、抗原呈递、受体内吞、细胞内信号转导等生物学过程。近期研究表明，泛素－蛋白酶体通路可通过干预转化生长因子β/Smad信号转导，成纤维细胞增殖、分化与凋亡等途经参与增生性瘢痕的发生和发展。本文就泛素－蛋白酶体通路中泛素连接酶、蛋白酶体、去泛素化酶在增生性瘢痕中的作用进行综述，以期为增生性瘢痕的防治提供新思路。

简介：无

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简介：摘要泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system， UPS）是真核细胞内除自噬-溶酶体外的另一种蛋白质降解系统。UPS可以清除错误折叠的蛋白，减少因错误折叠蛋白堆积而导致的衰老疾病发生。UPS选择性的蛋白质降解和调节功能作用于精原细胞的有丝分裂、减数分裂和精子细胞的变形过程，在精子发生中扮演重要角色。另外，精子的获能、顶体反应、透明带穿透、受精后精子线粒体的消除等重要生殖过程也与UPS紧密相关。本文就近年来UPS在精子发生和受精过程中的作用及其与不孕症关系研究进行文献综述。

简介：摘要蛋白酶激活受体2（protease activated receptor 2，PAR2）是G蛋白耦联受体超家族的成员，广泛表达于肠上皮细胞中。在结直肠癌的肿瘤微环境中，存在着多种蛋白酶，可以激活肿瘤细胞或间质细胞中的PAR2，从而调控肿瘤细胞的行为。在本综述中，作者关注于PAR2在结直肠癌发生发展过程中调控的信号通路，对PAR2的作用机制展开阐述。

简介：摘要蛋白泛素化是生理条件下调控蛋白质稳定性和活性的重要机制之一，其中E1/E2/E3连接酶和去泛素化酶在蛋白泛素化过程中发挥着重要调节作用，而去泛素化则可能会诱导肿瘤、哮喘等疾病的发生。泛素特异性蛋白酶作为去泛素化酶家族中的主要成员被证实与肿瘤的发生、发展密切相关，其中部分泛素特异性蛋白酶已经被用于抗肿瘤治疗的潜在靶点进行研究。因此，本研究旨在通过对泛素特异性蛋白酶在肿瘤演进过程中的调控机制作一简要综述，期望为肿瘤治疗提供更多的研究参考。

简介：摘要目的探讨链霉蛋白酶服用后坐位活动方法对胃镜检查前准备效果的影响。方法采用单中心随机对照研究方法，选取2018年8月至2019年5月经北京大学国际医院内镜中心行胃镜检查的202例患者，随机分为服用链霉蛋白酶后坐位活动组99例和传统翻身组103例。比较两组患者胃镜下视野清晰度、胃镜操作时间及检查过程中的清洗水量。结果两组胃镜下视野清晰度、胃镜检查时间及检查过程中的清洗水量差异无统计学意义。结论链霉蛋白酶服用后坐位活动方法简便、易行，胃内粘液清除效果满意。

简介：摘要目的探讨Brachyury上调基质金属蛋白酶（MMPs）与促进肺癌细胞转移的机制。方法购置H1299细胞、H460细胞，完成细胞的转染及稳转细胞的培养；选择对数生长期的H1299细胞、H460细胞，利用Lipofectamine2000转染、干扰，构建si-RNA对Brachyury表达，形成shRNA-NC、shRNA-Brachyury细胞，设定对照细胞。采用实时荧光PCR技术测定不同细胞中MMPs mRNA表达水平；采用Transwell法检测3种细胞0 h、24 h、48 h及72 h细胞侵袭能力；采用Western blot测定3种稳转细胞Brachyury水平。结果shRNA-Brachyury细胞中MMPs12、24、7、9水平均高于shRNA-NC细胞、H460细胞，差异均有统计学意义（均P<0.05）；shRNA-NC细胞中MMPs12、24、7、9水平均低于H460细胞，差异均有统计学意义（均P<0.05）；Transwell检测结果表明，H460细胞、shRNA-NC细胞侵袭率比较，差异无统计学意义（P>0.05）；shRNA-Brachyury细胞侵袭能力低于H460细胞、shRNA-NC细胞，差异有统计学意义（P<0.05）；Western blot测定结果表明，shRNA-Brachyury细胞中Brachyury蛋白水平高于shRNA-NC、H460细胞，差异均有统计学意义（均P<0.05）；shRNA-NC细胞中Brachyury蛋白水平低于H460细胞，差异有统计学意义（P<0.05）。结论Brachyury能通过上调MMPs水平促进肺癌细胞转移，从而能促进疾病的发生、发展，有望成为肺癌新的治疗靶点。

简介：摘要目的探讨新生乳鼠脑缺氧缺血(hypoxic ischemic，HI)后24 h内基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)的变化规律及关系。方法7日龄SD乳鼠随机分为HI组(n＝40)和假手术组(sham组，n＝40)。建立HI模型，按术后5个时间点(0、4、8、12、24 h)分为5个亚组取脑组织，每组8例。HE染色观察大脑皮质病理变化，Western blot和RT-PCR法检测MMP-9、IL-1β和TIMP-1的表达。此外，制作小鼠海马神经元HT22细胞缺氧模型，加入MMP-9抑制剂和MMP-9激动剂，进一步证实MMP-9、IL-1β和TIMP-1的关系。结果HI后4 h大脑皮质出现轻微的核异常和胞体肿胀，12 h神经元嗜酸性改变最为明显。与8 h、12 h比较，HI后24 h MMP-9和IL-1β蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.01)。HT22细胞缺氧4 h加入MMP-9抑制剂，IL-1β mRNA表达下调。结论新生乳鼠HI早期MMP-9、IL-1β和TIMP-1表达呈时间依赖性，抑制MMP-9表达可降低IL-1β水平。

简介：摘要目的探讨新生乳鼠脑缺氧缺血(hypoxic ischemic，HI)后24 h内基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)的变化规律及关系。方法7日龄SD乳鼠随机分为HI组(n＝40)和假手术组(sham组，n＝40)。建立HI模型，按术后5个时间点(0、4、8、12、24 h)分为5个亚组取脑组织，每组8例。HE染色观察大脑皮质病理变化，Western blot和RT-PCR法检测MMP-9、IL-1β和TIMP-1的表达。此外，制作小鼠海马神经元HT22细胞缺氧模型，加入MMP-9抑制剂和MMP-9激动剂，进一步证实MMP-9、IL-1β和TIMP-1的关系。结果HI后4 h大脑皮质出现轻微的核异常和胞体肿胀，12 h神经元嗜酸性改变最为明显。与8 h、12 h比较，HI后24 h MMP-9和IL-1β蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.01)。HT22细胞缺氧4 h加入MMP-9抑制剂，IL-1β mRNA表达下调。结论新生乳鼠HI早期MMP-9、IL-1β和TIMP-1表达呈时间依赖性，抑制MMP-9表达可降低IL-1β水平。

简介：摘要目的总结胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9）基因相关侵袭性念珠菌病的临床特点、诊断及治疗，并报道该基因的一种新突变。方法描述1例2018年12月底于首都儿科研究所附属儿童医院收入院的以中枢神经系统感染及腹膜后肿物为主要临床表现的侵袭性念珠菌病患儿的临床特征、辅助检查和治疗经过及随访结果，对患儿及其父母进行全基因外显子组检测及一代测序验证从而明确诊断；并以“CARD9”“invasive candidiasis”“侵袭性念珠菌病”为关键词在PubMed数据库、万方数据库、中国知网数据库检索自建库至2020年5月的相关文献，进行文献复习。结果患儿男性，10岁，既往健康，亚急性病程，以腹泻症状起病，2个月余后病情进展迅速，相继出现头痛、呕吐、抽搐、意识障碍等神经系统受累症状，脑脊液及血液中多次培养出白色念珠菌，大便中找到类酵母样真菌，头部磁共振成像提示梗阻性脑积水，腹部CT可见腹膜后肿物及肠管壁增厚。对患儿及其父母核心家系采血行全基因外显子组检测及一代测序验证，结果发现患儿CARD9基因存在c.952-12_956delinsAG纯合变异，为未报道的致病变异。经静脉联合抗真菌药物治疗症状无明显缓解，行侧脑室引流手术及侧脑室给予抗真菌药物治疗9周，临床症状及脑脊液常规生化改善，培养转阴，腹膜后肿物缩小出院。出院后继续口服联合抗真菌药物治疗4个月，患儿无特殊不适感，体力稍差，脑脊液白细胞及蛋白仍偏高，头部磁共振成像仍可见脑积水及脑室旁白质异常信号，腹部CT可见腹膜后肿物较前缩小。共检索到文献15篇，全世界共报道了21例CARD9基因相关侵袭性念珠菌病患者（不含本例），中枢神经系统感染常见。结论CARD9基因缺陷患者选择性地对真菌易感，发生侵袭性念珠菌病常累及中枢神经系统，病情重。应予全身足量、长疗程的抗真菌药物治疗，并发脑积水者则需外科治疗。本次报道的新突变丰富了CARD9基因的变异多样性。对不明原因的侵袭性念珠菌病患者，建议行基因检测，关注CARD9基因缺陷等先天性免疫缺陷病。

简介：摘要目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在大鼠急性胰腺炎相关性肺损伤(APALI)中的作用及机制。方法30只雄性Sprague Dawley大鼠采用随机数字表法分成对照组(6只)、APALI组(12只)、腺病毒干扰组(12只)。通过胰管注射牛磺胆酸钠建立重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型，造模后3、6 h处死动物。苏木精-伊红(HE)染色评估胰腺组织及肺组织的病理改变。采用时聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中CARD9、p65核因子-κB(p65NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的转录水平。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织中CARD9、p-p65NF-κB、p-p38MAPK蛋白表达水平。组间数据比较采用单因素方差分析，最小显著性差异法(LSD)法或Tamhane’s T2法进行两两比较。结果APALI组3、6 h肺组织中CARD9 mRNA水平均高于Control组[3 h(5.572±0.722)、6 h(12.588±2.008)比(0.991±0.066)，F＝134.738，t＝15.475、14.139，P值均<0.05]，差异均有统计学意义；腺病毒干扰组3、6 h CARD9 mRNA水平均低于APALI组相同时间点[3 h(3.079±0.348)比(5.572±0.722)、6 h(7.945±1.538)比(12.588±2.008)，F＝55.899，t3 h＝7.618、t6 h＝4.497，P值均<0.05]，差异均有统计学意义。造模后3、6 h，APALI组肺组织中NF-κB mRNA、p38MAPK mRNA水平均高于对照组[NF-κB 3 h(6.746±0.894)、6 h(15.116±1.939)比(0.973±0.076)，p38MAPK 3 h(4.422±0.369)、6 h(6.405±0.590)比(0.973±0.536)，tNF-κB＝15.766、17.849，tp38MAPK＝22.686、22.469，P值均<0.05]，差异均有统计学意义；造模后3、6 h，腺病毒干扰组的NF-κB mRNA、p38MAPK mRNA水平分别低于APALI组同时间点[NF-κB 3 h(4.002±0.543)比(6.746±0.894)、6 h(8.771±0.805)比(15.116±1.939)，p38MAPK 3 h(2.705±0.232)比(4.422±0.369)、6 h(5.372±0.401)比(6.405±0.590)，tNF-κB＝6.430、7.401，tp38MAPK＝9.969、3.351，P值均<0.05]，差异均有统计学意义。结论APALI大鼠肺组织中存在CARD9相关的NF-κB、p38MAPK信号通路，可通过抑制CARD9表达、减轻炎性反应对APALI发挥保护作用。

简介：摘要目的研究缺血性脑损伤小鼠脑组织中胱天蛋白酶募集域蛋白9（caspase recruitment domain protein 9,CARD9）与炎症反应的关系。方法取24只SPF级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成4组，即假手术组、缺血3 h组、缺血6 h组、缺血12 h组，每组6只。缺血组小鼠采用线栓栓塞法构建永久性大脑中动脉阻塞（permanant middle cerebral artery occlusion,pMCAO）模型，各组于术后预定时间点处死小鼠。通过Western blot检测患侧脑组织中CARD9水平和NF-κB的活化，RT-PCR和ELISA分别检测患侧脑组织中炎症因子TNF-ɑ、IL-lβ、IL-6 mRNA及蛋白表达量。采用SPSS 21.0软件进行统计分析，每两组间计量资料比较采用独立样本t检验，采用Pearson相关分析比较CARD9与炎症因子之间的相关性。结果与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织CARD9表达均增加[（0.325±0.011） vs （0.462±0.019）, P=0.036; （0.735±0.036）, P=0.003; （0.903±0.024）, P=0.001]；与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组缺血脑组织NF-κB的活化均升高[（0.227±0.016 )vs (0.316±0.017), P=0.041;( 0.445±0.021), P=0.016; (0.671±0.039), P=0.008]。与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织TNF-ɑ表达均增加[（0.53±0.06) vs (1.06±0.10）, P=0.009; （1.47±0.15）, P=0.004; (2.78±0.18), P=0.001]；与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-lβ表达均增加[（0.55±0.07） vs （1.01±0.11）, P=0.009; （2.13±0.16）, P=0.003; （3.09±0.18）, P=0.001]；与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-6表达均增加[（1.99±0.18） vs （4.10±0.41）, P=0.006; （8.54±0.84）, P=0.002; （11.56±0.96）, P=0.001]。Pearson相关分析显示CARD9与NF-κB活性、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6均存在正相关（r=0.894, P=0.001; r=0.747, P=0.008; r=0.810, P=0.001, r=0.773, P=0.007）。结论小鼠缺血性脑损伤早期脑组织中CARD9与炎症反应存在正相关。

简介：无