简介：Humanplacenta-derivedmononuclearcells(MNC)wereisolatedbyaPercolldensitygradientandculturedinmesenchymalstemcell(MSC)maintenancemedium.Thehomogenouslayerofadherentcellsexhibitedatypicalfibroblastlikemorphology,alargeexpansivepotential,andcellcyclecharacteristicsincludingasubsetofquiescentcells.Invitrodifferentiationassaysshowedthetripotentialdifferentiationcapacityofthesecellstowardadipogenic,osteogenicandchondrogeniclineages.FlowcytometryanalysesandimmunocytochemistrystainshowedthatplacentalMSCwasahomogeneouscellpopulationdevoidofhematopoieticcells,whichuniformlyexpressedCD29,CD44,CD73,CD105,CD166,laminin,fibronectinandvimentinwhilebeingnegativeforexpressionofCD31,CD34,CD45andα-smoothmuscleactin.Mostimportantly,immuno-phenotypicanalysesdemonstratedthatthesecellsexpressedclassImajorhistocompatibilitycomplex(MHC-Ⅰ),buttheydidnotexpressMHC-Ⅱmolecules.Additionallythesecellscouldsuppressumbilicalcordblood(UCB)lymphocytesproliferationinducedbycellularornonspecificmitogenicstimuli.Thisstronglyimpliesthattheymayhavepotentialapplicationinallografttransplantation.SinceplacentaandUCBarehomogeneous,theMSCderivedfromhumanplacentacanbetransplantedcombinedwithhematopoieticstemcells(HSC)fromUCBtoreducethepotentialgraft-versus-hostdisease(GVHD)inrecipients.

简介：POU抄写因素OCT4不仅在维持pluripotent和房间而且幕作为通过基因剂量的一个房间命运决定因素完成的胚胎的茎(ES)的自我更新的状态起一个必要作用。然而，控制细胞内部的OCT4蛋白质水平的分子的机制留下逃犯。这里，我们报导那人的WWP2，E3ubiquitin(Ub)蛋白质ligase，通过它的WW领域明确地与OCT4交往并且在vitro并且在vivo提高OCT4的Ub修正。我们首先证明在人的ES房间的内长的OCT4能被Ubpost-translationally修改。而且，我们发现WWP2以一种剂量依赖者方式，和WWP2的活跃地点半胱氨酸残余通过26Sproteasome支持了OCT4的降级在OCT4上为它的酶的活动和解朊的效果被要求。显著地，我们当WWP2表示是由特定的RNA干扰(RNAi)的downregulated时，内长的OCT4蛋白质水平显著地被提高的数据表演，建议那WWP2是为在人的ES房间维持合适的OCT4蛋白质水平的一个重要管理者。而且，北污点分析证明WWP2抄本在多样的人的织物/器官是广泛地在场的并且高度在无差别的人的ES房间表示了。然而，它的表示水平快速在区分的人的ES房间以后被减少，显示WWP2表示力量发展地被调整。我们的调查结果证明WWP2是在人的ES房间的OCT4蛋白质水平的一个重要管理者。

简介：人的pluripotent干细胞代表功能的胰腺的内分泌的系房间的潜在地无限的来源。这里，我们报导一条高度有效的途径导致人的胚胎的茎(ES)细胞和导致的pluripotent茎(iPS)在一个定义化学药品的文化系统区分进成熟生产胰岛素的细胞的细胞。这条途径获得的区分的人的ES房间由流动cytometry分析作为assayed包括了将近25%胰岛素积极的房间，它以比得上成年人的小岛的一种方式响应葡萄糖刺激释放了insulin/C-peptide。大多数这些生产胰岛素的房间共同表示成熟尾房间特定的标记象NKX6-1和PDX1那样，在vivo显示一个类似的基因表示模式到成年小岛尾房间。在这研究，我们也证明EGF便于PDX1积极的胰腺的祖先的扩大。而且，我们的协议也成功了高效地导致人的iPS房间区分进生产胰岛素的房间。因此，这个工作不仅提供一个新模型在vitro学习人的胰腺的专门化和成熟的机制，而且提高为糖尿病的处理利用病人特定的iPS房间的可能性。

简介：Peroxisome激活proliferator的受体鲸鱼群妈(PPARγ)coactivator-1高山哈(PGC-1α)coactivates多重抄写因素并且调整几个代谢过程。Thecurrent学习在人的上皮的卵巢的癌症房间在apoptosis的正式就职调查了PGC-1α的角色。在人的卵巢和人的卵巢的上皮的肿瘤之间的PGC-1α信使rna水平被量的RT-PCR检验。更少的PGC-1α表示与正常卵巢相比在恶意的肿瘤的表面上皮被发现。在人的上皮的卵巢的癌症房间线Ho-8910的PGC-1α的Overexpression通过Bcl-2和Bax表示的协调规定导致了房间apoptosis。Microarray分析证实PGC-1α戏剧性地在Ho-8910房间影响了apoptosis相关的基因。Mitochondrial功能的试金证明apoptosis的正式就职通过由细胞色素c.Furthermore的版本的终端阶段，导致的apoptosis部分是，然而并非完全，由PPARγantagonist(GW9662)堵住了的PGC-1α-，并且由siRNA的PPARγ表示的抑制也在Ho-8910房间禁止了PGC-1α-inducedapoptosis。这些数据建议PGC-1α通过aPPARγ-依赖者小径施加了它的效果。我们的调查结果显示PGC-1α涉及apoptoticsignaltransduction小径，PGC-1α的down规定可以是在支持上皮的卵巢的癌症生长和前进的一个关键点。

简介：Humanμ-opioidreceptor(HμOR)withatagofsixconsecutivehistidinesatitscarboxylterminushasbeenexpressedinrecombinantbaculovirusinfectedSf9insectcells.Themaximalbindingcapacityforthe[^3H]diprenorphineand[^3H]ohmefentanyl(Ohm)were9.1±0.7and6.52±0.23nmol/gprotein,respectively.The[^3H]diprenorphineor[^3H]OhmbindingtothereceptorexpressedinSf9cellswasstronglyinhibitedbyμ-selectiveagonists[D-Ala^2,N-methyl-Phe^4,glyol^5]enkephalin(DAGO),Ohm,andmorphine,butneitherbyδnorbyκselectiveagonist.Na^+(100mM)andGTP(50μM)couldreduceHμORagonistsetorphineandOhmaffinitybindingtotheoverexpressedHμOR.μ-selectiveagonistsDAGOandOhmeffectivelystimulated[^35S]GTPγSbinding(EC50=2.7nMand6.9nM)andinhibitedforskolin-stimulatedcAMPaccumulation(IC50=0.9nMand0.3nM).Theagonist-dependenteffectscouldbeblockedbyopioidantagonistnaloxoneorbypretreatmentofcellswithpertussistoxin(PTX).TheseresultsdemonstratedthatHμORoverexpressedinSf9insectcellsfunctionallycoupledtoendogenousCi/oproteins.

简介：Thenuclearmatrixattachmentregions(MARs)andthebindingnuclearmatrixproteinsinthe5'-flankingcisactingelementsofthehumanε-globingenehavebeenexamined.UsinginvitroDNA-matrixbindingassay,ithasbeenshownthatthepositivestage-specificregulatoryelement(ε-PREII,-446bp--419bp)upstreamofthisgenecouldspecificallyassociatewiththenuclearmatrixfromK562cells,indicatingthatε-PREIImaybeanerythroidspecificfacultativeMAR.IngelmobilityshiftassayandSouthwesternblottingassay,anerythroid-specificnuclearmatrixprotein(ε-NMPk)inK562cellshasbeenrevealedtobindtothispositiveregulatoryelement(ε-PREII).Furthermore,wedemonstratedthatthesilencer(-392bp--177bp)upstreamofthehumanε-globingenecouldassociatewiththenuclearmatricesfromK562,HELandRajicells.Inaddition,thenuclearmatrixproteinspreparedfromthesethreecelllinescouldalsobindtothissilencer,suggestingthatthissilencerelementmightbeaconstitutivenuclearmatrixattachmentregion(constitutiveMAR).Ourresultsdemonstratedthatthenuclearmatrixandnuclearmatrixproteinsmightplayanimportantroleintheregulationofthehumanε-globingeneexpression.

简介：

简介：hPFTAIRE1(PFTK1)，Cdc2相关的蛋白质kinase，高度在人的大脑被表示。它在Hela房间展出细胞质的分发，尽管它在它的N终点包含二个原子本地化信号(NLS)。到为它的底层和规章的部件的搜索，我们由把全身的hPFTAIRE1用作一个诱饵屏蔽了一个二混血儿的图书馆。四14-3-3isoforms(贝它，epsilon，希腊语字母的第七字，字形物)被识别与hPFTAIRE1交往。我们在hPFTAIRE1发现了一个通常认为的14-3-3绑定一致主题(RHSSPSS)，它与它的第二NLS重叠了。RHSSPSS主题的删除或有在保存有约束力的主题的翼的Ser119的替换废除了在hPFTAIRE1和14-3-3蛋白质之间的特定的相互作用。变异的S120AhPFTAIRE1也显示出一个弱相互作用到14-3-3蛋白质。结果建议Ser119为在hPFTAIRE1和14-3-3蛋白质之间的相互作用是关键的。当熔化了到绿荧光灯的蛋白质(GFP)的C终点时，所有hPFTAIRE1异种在Hela房间和人的neuroblastoma房间(SH-SY5Y)的细胞质散布了，显示有14-3-3蛋白质的那绑定不贡献潜水艇hPFTAIRE1的细胞的本地化，尽管绑定可以涉及它的发信号的规定。

简介：oseltamivir的使用，广泛地是的stockpiled为在可能的鸟的流行性感冒的使用的药之一流行，被报导了与neuropsychiatricdisorders和严重皮肤反应被联系，首先在日本。这里，我们在dbSNP数据库识别了非同义的SNP(单个核苷酸多型性)，R41Q在humancytosolicsialidase的酶的活跃地点附近，是oseltamivir的目标的病毒neuraminidase的一个相当或相同事物。在欧洲、非洲的美国人口的9.29%亚洲人口和没有的这SNPoccurred。Ourstructural分析和Ki大小使用试管内sialidase试金显示这SNPcould增加人的sialidase的非计划中的有约束力的亲密关系到oseltamivir羧化物，oseltamivir的活跃形式，因此减少sialidase活动。另外，这SNP自己与一项内在地更低的sialidase活动导致酶，由它的增加的Km证明Vmax珍视并且减少。理论上，到有这SNP的人的oseltamivir的管理可能进一步减少他们的sialidase活动。我们注意oseltamivir的reportedneuropsychiatric副酌和人的sialidase-relateddisorders的已知的症状的类似。我们建议这个充实亚洲人的sialidase变化由SNP引起了，在同型结合的形式可能，可以与对oseltamivir的某些严重不利反应被联系。

简介：Themethodoflasercapturemicrodissection(LCM)combinedwithsuppressivesubtractivehybridization(SSH)wasdevelopedtoisolatespecificgermcellsfromhumantestissectionsandtoidentifythegenesexpressedduringdifferentiationanddevelopment.Inthepresentstudy,over10,000primaryspermatocytesandroundspermatidcellsweresuccessfullyisolatedbyLCM.UsingthecDNAsfromprimaryspermatocytesandroundspermatids,SSHcDNAslibraryofprimaryspermatocyte-specificwasconstructed.TheaverageinsertsizeofthecDNAisolatedfrom75randomlypickedwhitecloneswas500bp,rangingfrom250bpto1.7kb.Usingthedot-blotmethod,atotalof421cloneswereexamined,resultingintheidentificationof390positiveclonesemittingstrongsignals.PartialsequenceofcDNAspreparedfromeachclonewasdeterminedwithanoverallsuccessrateof84.4%.GenesencodingcytochromecoxidaseⅡandtherescuefactor-humaninweremostfrequentlyexpressedinprimaryspermatocytes,suggestingtheirrolesinvolvedinmeiosis.

简介：我们以前报导了人的ACAT1基因通过从染色体抄录的二不连续的RNA处理的interchromosomal生产妄想的mRNA1和7。妄想的mRNA把AUG1397-1399和GGC1274-1276用作翻译开始codons分别地，与在人的房间是确实地在场的后者生产正常50-kDaACAT1和新奇酶地活跃的56-kDaisoform，包括人的导出单核白血球的巨噬细胞。在这个工作，我们报导位于GGC1274-1276codon的附近的RNA第二等的结构为56-kDaisoform的生产被要求。三预言的茎环(nt1255-1268，1286-1342和1355-1384)的效果被transfecting表示plasmids个别地测试进包含的房间野类型，删除或变异的茎环序列连接了到一个部分ACAT18月开的读物框架(ORF)或到另外的基因的ORF。表示模式被西方的污点分析监视。我们发现从染色体7的在上游的stem-loop1255-1268和从染色体1的下游的stem-loop1286-1342为56-kDaisoform的生产被需要，而从染色体1的最后stem-loop1355-1384是非必需的。用有一个稳定的发卡的monocistronic和bicistronic向量的实验的结果证明从GGC1274-1276codon的那翻译开始被一个内部核糖体入口地点(怒火)调停。进一步的实验表明从GGC1274-1276codon的那翻译开始要求在上游的组成AU的RNA第二等的结构和下游地GC富有的结构。这个机械学的工作为人的ACAT1抄本的妄想的性质的生物意义提供进一步的支持。

简介：CT120,anovelmembrane-associatedgeneimplicatedinlungcarcinogenesis,waspreviouslyidentifiedfromchromosome17pl3.3locus,ahotmutationspotinvolvedinhumanmalignancies.Inthepresentstudy,wefurtherdeterminedthatCT120ectopicexpressioncouldpromotecellproliferationactivityofNIH3T3cellsusingMTSassay,andmonitoredthedownstreameffectsofCT120inNIH3T3cellswithAtlasmousecDNAexpressionarrays.Among588knowngenes,133geneswerefoundtobeupregulatedordownregulatedbyCT120.Twomajorsignalingpathwaysinvolvedincellproliferation,cellsurvivalandanti-apoptosiswereoverexpressedandactivatedinresponsetoCT120:OneistheRaf/MEK/ErksignalcascadesandtheotheristhePI3K/Aktsignalcascades,suggestingthatCT120mightcontribute,atleastinpart,totheconstitutivelyactivationofErkandAktinhumanlungcanercells.Inaddition,sometumormetastasisassociatedgenescathepsinB,cathepsinD,cathepsinL,MMP-2/TIMP-2werealsoupregulatedbyCT120,uponwhichCT120mightbeinvolvedintumorinvasivenessandmetastasis.Inaddition,CT120mightplayanimportantroleintumorprogressionthroughmodulatingtheexpressionofsomecandidate“LungTumorProgression”genesincludingB-Raf,Rab-2,BAX,BAG-1,YB-1,andCdc42.

简介：LRP16以前在乳癌房间作为导致雌激素的基因被识别。到在子宫内膜的癌症(EC)的雌激素和它的功能的效果的LRP16的应答的海角房间仍然是不清楚的。这里，我们证明LRP16基因的信使rna水平和倡导者活动被17beta-estradiol(E2)显著地在雌激素受体高山增加哈(嗯高山哈)-positiveIshikawa人EC房间。尽管Ishikawa细胞的生长率没被LRP16的宫外的表示显然影响，Transwell试金的结果显示出LRP16-overexpressing细胞的侵略能力的近似one-thirdincrease。由于分子的屏蔽，我们观察到E-cadherin的表示，与肿瘤转移联系的一个必要粘附分子，被LRP16镇压。进一步的倡导者分析以一种剂量依赖者方式表明了那LRP16inhibitedE-cadherintransactivation。然而，抑制被雌激素剥夺废除，显示由LRP16requires的E-cadherin抄写的down规定嗯高山哈调停。染色质免疫降水分析表明到E-cadherin倡导者的ERalpha的绑定被LRP16反对，建议那LRP16能防碍嗯调停alpha的抄写。这些结果建议起来由雌激素的LRP16的规定能被在人的EC调整E-cadherin的down涉及侵略生长。

简介：Galα(1,3)Gal(galepitope)isacarbohydrateepitopeandsynthesizedinlargeamountbyα(1,3)galactosyltransferase[α(1,3)GT]enzymeonthecellsoflowermammaliananimalssuchaspigsandmice.Humanhasnogalepitopeduetotheinactivationofα(1,3)GTgenebutproducesalargeamountofantibodies(anti-Gal)whichrecognizeGalα(1,3)Galstructuresspecifically.Inthisstudy,areplicationdeficientrecombinantadenoviralvectorAd5sGTcontainingpigα(1,3)GTcDNAwasconstructedandcharacterized.Adenoviralvector-mediatedtransferofpigα(1,3)GTgeneintohumantumorcellssuchasmalignantmelanomaA375,stomachcancerSGC-7901,andlungcancerSPC-A-1wasreportedforthefirsttime.ResultsshowedthatGalepitopedidnotincreasethesensitivityofhumantumorcellstohumancomplement-mediatedlysis,althoughhumancomplementactivationandthebindingofhumanIgGandIgMnaturalantibodiestohumantumorcellswereenhancedsignificantlyafterAd5sGTtransduction.AppearanceofgalepitopeonthehumantumorcellschangedtheexpressionofcellsurfacecarbohydratesreactingwithUlexeuropaeusI(UEAI)lectins,Viciavillosaagglutinin(VVA),Arachishypogaeaagglutinin(PNA),andGlycinemaxagglutinin(SBA)todifferentdegrees.Inaddition,noeffectofgalepitopeonthegrowthinvitroofhumantumorcellswasobservedinMTTassay.

简介：细胞内部的氧化还原作用动态平衡在决定肿瘤房间的敏感到导致药的apoptosis起一个关键作用。这里，我们调查了thioredoxin-1(TRX1)的角色，氧化还原作用规定的一个关键部件，在砷三氧化物(作为(2)O(3))导致的apoptosis。在HepG(2)房间的野类型的TRX1的在表示上导致了抑制当(2)O(3)导致了细胞色素c(cytoc)，释放，caspase激活和apoptosis，并且由RNAi的TRX1表示的绒毛规定敏化HepG(2)房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。有趣地，到重量的单位(32/35)的从Cys(32/35)的TRX1的活跃地点的变化从一个apoptotic保护者把这个分子变换成一个apoptotic倡导者。以理解这变换的机制，我们从老鼠肝使用了孤立的线粒体并且发现了野类型的TRX1能保护的那重组体从apoptotic的线粒体变化。相反，TRX1的变异的形式独自得到了线粒体相关的apoptotic变化，包括mitochondrial渗透转变毛孔(mPTP)洞，mitochondrial膜潜力的损失，和cyto从线粒体的c版本。这些apoptotic效果被cyclosporineA(CsA)禁止，显示指向到mPTP的那变异的TRX1。到由2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB)的氧化形式体内的从它的减少的形式的TRX1的改变，TRXreductase的一个特定的禁止者，也敏化的HepG(2)房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。这些数据建议TRX1由任何一个变化在由堵住cytoc版本调整apoptosis，并且在TRX1的激活起一个中央作用或活跃地点半胱氨酸的氧化可以敏化肿瘤房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。

简介：

简介：导致死亡的肿瘤坏死的能力因素相关的导致apoptosisligand(小道)大部分被描述了有选择地杀死许多癌症房间，但是有治疗的主要担心之一是药抵抗和可能的有毒的副作用的出现。这里，我们报导那条小道在Jurkat和SUPT1T房间线并且在人的高强风然而并非在健康的导出题目的外部血mononuclear房间导致apoptosis。在平行，有小道和Tyrphostin(AG-490)的治疗，选择Januskinase2禁止者，生产cytotoxicity的明显的改进，与控制相比或到由Stat3phosphorylation的重要抑制描绘了落后于独自一个对待的样品，并且与cIAP-1和cIAP-2mRNA层次的戏剧的减少联系了。由特定的小干扰RNA的cIAP-1和cIAP-2的Downregulation显著地放大减少小道的cytotoxicity。所有一起，这些调查结果强烈显示cIAP-1和cIAP-2downregulation是在调停的发信号的小径的基本的步T上的小道和AG-490的组合效果房间白血病。这些调查结果可以帮助在小道敏感的白血病影响的病人的治疗为不太有毒的药理学策略的发展打开新线路。

简介：OverexpressionandactivationofHER-2/neu(alsoknownasc-erbB-2),aproto-oncogene,wasfoundinabout30%ofhumanbreastcancers,promotingcancergrowthandmakingcancercellsresistanttochemo-andradio-therapy.Wild-typep53iscrucialinregulatingcellgrowthandapoptosisandisfoundtobemutatedordeletedin60-70%ofhumancancers.Andsomecancerswithawild-typep53donothavenormalp53function,suggestingthatitisimplicatedinacomplexprocessregulatedbymanyfactors.Inthepresentstudy,weshowedthattheoverexpressionofHER-2/neucoulddecreasetheamountofwild-typep53proteinviaactivatingPI3Kpathway,aswellasinducingMDM2nucleartranslocationinMCF7humanbreastcancercells.BlockageofPI3KpathwaywithitsspecificinhibitorLY294002causedG1-Sphasearrest,decreasedcellgrowthrateandincreasedchemo-andradio-therapeuticsensitivityinMCF7cellsexpressingwild-typep53.However,itdidnotincreasethesensitivitytoadriamycininMDA-MB-453breastcancercellscontainingmutantp53.OurstudyindicatesthatblockingPI3KpathwayactivationmediatedbyHER-2/neuoverexpressionmaybeusefulinthetreatmentofbreasttumorswithHER-2/neuoverexpressionandwild-typep53.