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  • 简介:近来在大肠杆菌中新发现Era蛋白(E.coliras-likeprotein)是一类新GTP结合蛋白,研究表明Era蛋白参与调节细胞分裂、细胞周期以及部分细胞代谢过程。植物中相关研究报道尚少,推测ERG蛋白可能定位在线粒体,并且与种子正常发育相关。本实验通过构建植物表达载体初步观察了ERG437蛋白在拟南芥悬浮细胞定位情况,同时利用CoxⅣ蛋白初步观察到绝大部分ERG437蛋白定位于线粒体。

  • 标签: ERA蛋白 ERG基因 细胞周期 悬浮细胞
  • 简介:细胞钙离子(Ca2+)是体内关键信号转导因子,在诸多生理活动中都起着重要作用。肌浆网/内质网钙ATP酶(SERCA)能够将胞浆内Ca2+转运到肌浆网和内质网中,调控细胞生长和凋亡。细胞凋亡是调节机体发育和衰老基本机制,与Ca2+密切相关。SERCA作为调控钙稳态关键酶,它与细胞凋亡联系紧密。本文从心肌细胞、足细胞、胰岛β细胞、肝细胞和巨噬细胞等分别阐述了SERCA调控细胞凋亡最新进展,将为疾病诊断和靶向治疗提供新理论基础。

  • 标签: 肌浆网/内质网钙ATP酶 细胞凋亡 钙离子
  • 简介:对原代人体嗜中性粒细胞转染是很重要,因为它实现了对人体发炎响应中通道研究,而这在以前是很难实现,原因在于培养嗜中性粒细胞很困难。通过这项研究,从细胞存活率及siRNA传递角度,研究者确立了最佳嗜中性粒细胞转染电穿孔条件。使用这些条件,可以进一步将该技术应用到包括干细胞在内其他难以转染原代细胞中。可以预见,这一领域将会在不久将来蓬勃发展起来。

  • 标签: 中性粒细胞 转染 电穿孔 细胞存活率
  • 简介:目的:探讨建立一种新从膨胀液中提取脂肪间充质干细胞(ADSCs)分离方法。方法:收集含有脂肪间充质干细胞膨胀液,然后从膨胀液中分离出脂肪间充质干细胞并进行体外培养,观察培养间充质干细胞生长状态,流式细胞术检测间充质干细胞干性标记物,细胞生长曲线比较新方法与运用传统方法分离脂肪间充质干细胞增殖活性,多向诱导分化鉴定其向成骨,成软骨及成脂方向分化能力。结果:成功建立了一种新从膨胀液中提取脂肪间充质干细胞分离方法;分离自膨胀液间充质干细胞数量虽然低于与等体积脂肪组织来源间充质干细胞细胞生长曲线分析结果表明其增殖速度快,生长至第8天时,密度基本等同于脂肪组织来源间充质干细胞。间充质干细胞表面分子标记物CD73,CD90,CD105,CD45,CD34,CD11b,CD19,HLA—DR表达测定结果显示正常,阳性细胞率与脂肪组织来源细胞相近。多向诱导分化结果显示从膨胀液中分离脂肪间充质干细胞可以向成脂、成骨和成软骨三向分化。结论:新方法分离细胞确为脂肪间充质干细胞,符合国际干细胞协会规定定义标准。

  • 标签: 膨胀液 脂肪间充质干细胞 分离
  • 简介:脂肪干细胞是一类可以自我更新、繁殖产生更多细胞,进而可以分化成许多有特定功能细胞系,具有一般干细胞特点,可作为多种组织工程种子细胞,有非常重要研究和应用价值。本文着重对脂肪干细胞在诱导分化方面的最新发展进行了阐述,希望能为脂肪干细胞进一步研究提供理论基础。

  • 标签: 脂肪干细胞 种子细胞 诱导分化
  • 简介:人诱导性多能干(iPS)细胞能够分化成很多种类细胞,这为临床和研究提供了新机遇。这些细胞系可以用于疾病模型建立、药物筛选以及毒性测试、帮助解决传统方法局限性,也可以建立人类各种复杂疾病细胞模型,对应用于更加个性化医药研究领域也很有潜力。这些细胞系具有重新塑造临床研究领域潜力,但是研究人员也面临着很多问题和挑战,也需要去发现新应用。

  • 标签: 细胞重组 疾病模型 毒性测试 药物筛选 传统方法 细胞模型
  • 简介:实验室科学家用于完成研究工作时间是有限。在如今现代化、实验仪器密集实验室里,每年用于一位科学家和实验室场地开销可能超过$250000或$120/h。由于完成研究成本高,而且时间有限,因此需要考虑许多因素来最优化利用科学家时间。这篇文章以一个实际调查为例讨论了如下因素,包括实验室工作流程,高效液相色谱(HPLC)分离中溶剂质量以及如何避免重复性工作,如何使用简单自动化设备来监测实验状态从而除去多步骤和减少工作频率以节省科学家时间。当将所有小细节纳入考虑范围中时,因节省细碎时间而对实验成本节约和实验效率提升具有非常重要潜在影响。

  • 标签: 实验效率 溶剂质量 废液处理 选择试剂 工作时间 费用
  • 简介:模仿天然骨和牙齿组成成分,构建复合牙、骨修复材料。采用羟基磷灰石和胶原蛋白复合构建。因氟离子被认为有一定防龋齿以及较好热学和化学稳定性,引入氟羟基磷灰石构建复合材料,并与羟基磷灰石复合材料进行比较并分别用X射线衍射法以及红外光谱分析复合材料结合情况。用MTT法验证羟基磷灰石和氟羟基磷灰石细胞安全性。

  • 标签: 羟基磷灰石 氟羟基磷灰石 胶原蛋白 MTT
  • 简介:虽然细胞分子生物学近年来发展很快,但是细胞培养方法变化很慢。将近一个世纪以前发明有盖培养皿至今仍在常规使用,但它已经不适合许多用来观察和分析活体细胞内发生变化现代光学分析方法。这篇文章描述了一种细胞培养芯片装置,它能有效地用于细胞培养和随后高端光学分析,比如荧光和共焦显微镜方法。

  • 标签: 细胞培养 光学显微镜 芯片 细胞分子生物学 光学分析 共焦显微镜
  • 简介:糖尿病已经成为世界范围内危害人类健康主要疾病之一,对糖尿病研究和治疗具有重要意义,本文首先建立并优化小鼠脂肪细胞糖尿病药物筛选模型,然后使用临床抗糖尿病药物对该模型进行考察,并对海糖平(H)和杉糖平(S)两种降糖新药进行了筛选。通过Westem-blot法检测GLUT4(葡萄糖转运蛋白4)以确定药物药效。结果表明,用临床抗糖尿病药物考察模型能客观反映该药物药效。在此模型上,对杉糖平和海糖平各个馏分进行初步筛选,发现两种药物一些有效成分。

  • 标签: Ⅱ型糖尿病 GLUT4 WESTERN BLOT 药物筛选
  • 简介:目的:研究并建立口腔细胞采集卡DNA分型快速检验模式,提高该类样本DNA检验效率。方法:应用生物样本自动打孔仪小孔径多点取样,并使用DNATyperTM19试剂盒直接扩增检测口腔细胞采集卡样本。结果:获得了口腔细胞采集卡样本完整DNA分型,并且初检成功率高达98%。结论:建立生物样本自动打孔仪小孔径多点取样结合使用DNATyperTM19试剂盒方法能够用于口腔细胞采集卡样本批量化检验。

  • 标签: 自动打孔仪 口腔细胞采集卡样本 多点取样 批量化检验
  • 简介:T84细胞系是研究肠上皮电解质转运等方面广泛使用细胞模型。本文分别从Cl-、HCO3-分泌和Na+吸收等方面,系统论述了近年以T84细胞系为模型离子转运和调控机制研究,综述了有关离子转运与肠上皮病理生理相互关系,并指出该细胞系模型研究趋势和前景。

  • 标签: T84细胞 离子转运 病理生理
  • 简介:本文通过对人体肺部X光片图像边缘检测,增强医学图像可读性,以便能检查出肺中细胞,甚至可以更清楚分辨出癌细胞具体位置和形状,从而帮助医生更好诊断病人症状。

  • 标签: 边缘检测 算法 医学诊断 肺部X光片
  • 简介:研究富勒烯膦酸衍生物2P对人宫颈癌HeLa细胞生长影响.利用本实验室合成富勒烯膦酸衍生物2P作用于HeLa细胞,并应用MTT法、流式细胞术、和PI/H033342双染色法等方法检测其效应.结果表明,2P在光照条件下对HeLa细胞生长具有明显抑制作用,这种作用有剂量依赖性和光照依赖性.经过双染后荧光镜检测和流式检测后发现有高比例凋亡细胞存在.流式细胞术结果还发现2P对HeLa细胞周期产生明显影响,表现为G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多,推测细胞可能被2P阻断在S、G2期.以上结果提示富勒烯膦酸衍生物细胞毒作用,以及作为抗肿瘤药物可能.

  • 标签: 富勒烯衍生物 HELA细胞 细胞凋亡 细胞周期 细胞生长 衍生物
  • 简介:上海交通大学肿瘤研究所等单位科研人员经过多年攻关,创建了大规模细胞DNA转染技术平台,通过该平台可直接筛出具有影响细胞生长、肿瘤发生发展相关基因,具有重要潜在应用与开发价值。该研究日前获得2004年上海市科技进步一等奖。

  • 标签: 上海交通大学 DNA转染 技术平台 细胞生长 科技进步一等奖 应用与开发
  • 简介:Mosmann已经用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)比色法检测了纳米TiO2在人肝细胞增殖情况。通过化学沉积方法可以制备纳米TiO2,它纳米结构可以通过电子扫描显微镜检测。我们首先测量纳米TiO2一些基本特性然后深入到肝脏细胞,再在这些细胞增加一些纳米TiO2。利用生物学方法我们观察并测量肝脏细胞在正常状态下细胞增殖情况,通过与对照组对比结果表明纳米TiO,在人肝脏细胞增殖影响很小。我们进一步发现纳米TiO2对鸡胚成纤维(CEF)细胞毒性(安全性)尺度。最后我们首次通过毒物学确定了在100nm和1000nmTiO2毒性.

  • 标签: 纳米二氧化钛 MTT比色法 人肝细胞 鸡胚成纤维细胞 生物学效应 增殖
  • 简介:目的研究结直肠癌细胞炎症模型中基因表达变化以及所涉及信号通路。方法利用脂多糖(LPS)刺激SW480细胞1、3、6小时后提取RNA构建测序文库进行转录组测序,对表达有变化基因归类,并进行京都基因与基因组百科全书(Kyotoencyclopediaofgenesandgenomes,KEGG)分析,对分析结果进行实时荧光定量PCR验证。结果发现LPS刺激SW480细胞1、3、6小时后,3个时间点表达均有显著变化基因有250个。对这些差异表达基因进行了KEGG信号通路富集分析发现利用脂多糖刺激构建炎症模型里,TNF-α激活和NF-κB信号通路活化最显著。利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库进一步对表达持续上调或下调基因进行分析发现,部分基因在结肠癌标本中表达趋势与LPS刺激结肠癌细胞引起表达变化趋势一致。结论在利用脂多糖刺激构建结肠癌细胞炎症模型中,炎症过程中基因表达变化可能与结肠癌发生发展密切相关。

  • 标签: 结直肠癌 脂多糖 NFκB信号通路 炎症模型
  • 简介:该研究由厦门大学韩家淮小组完成提起脑缺氧、心缺血、急性胰腺炎、动脉粥样硬化等疾病,从医学笼统意义上说,它们都是由细胞坏死引起疾病。近日,厦门大学生命科学学院韩家淮教授课题组一项研究表明,存在于人体内一种名为RIP3蛋白激酶是将细胞凋亡转换成细胞坏死分子“开关”,通过调控这个开关,就可以调控细胞死亡方式。这一发现,被认为为临床治疗与细胞坏死相关疾病提供了新思路和方向。

  • 标签: 细胞坏死 死亡方式 蛋白激酶 调控 《科学》 动脉粥样硬化
  • 简介:本实验利用带DiI荧光标记低密度脂蛋白(LDL)与Hela细胞表面LDL受体结合,通过CCD荧光观测系统实时记录观测图象,并利用自己开发单粒子追踪(SPT)数据处理系统,对被标记上受体进行定位和轨迹分析.通过实验,得到了LDL受体几类典型运动方式,并经过大量轨迹统计,讨论了LDL受体在细胞膜表面存在特定结构一些性质.

  • 标签: 数字荧光显微系统 LDL受体 单粒子追踪 低密度脂蛋白 细胞膜
  • 简介:很多研究采用分子信标技术来作为活体细胞中RNA表达研究成像手段。然而,越来越多证据表明,由于该技术易产生假阳性信号使得RNA检测灵敏度显著降低。本文就如何克服这些缺陷,实现活体细胞中RNA高灵敏检测来构建分子信标进行了阐述。

  • 标签: 分子信标 活体细胞 RNA 成像 检测灵敏度 高灵敏检测