简介:用pH4.2的乙醇缓冲液制备醇溶蛋白和儿茶酚溶液。本文研究了氢键受体N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、非极性溶剂二氧杂环己烷和氯化钠(NaCl)对聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)去除儿茶酚与硅胶吸附醇溶蛋白的影响。DMF和二氧杂环己烷强烈抑制PVPP去除多酚,而NaCl可大幅提高PVPP去除多酚的能力。结论是:PVPP通过氢键和疏水键与多酚结合。另一个试验中,DMF和二氧杂环己烷还强烈抑制硅胶去除蛋白的作用,但NaCl可增强硅胶去除蛋白的作用。硅胶通过氢键和疏水键与蛋白结合。硅胶还能去除聚肌氨酸(聚脯氨酸类似物),该物质具有一个叔胺结构,也能与多酚形成混浊。硅胶和PVPP吸附混浊活性组分的机制与蛋白一多酚混浊形成机制相似。
简介:乙醛脱氢酶Ald6是啤酒酵母乙醛代谢途径的关键酶,它能催化乙醛脱氢,生成乙酸。设计引物,RT-PCR扩增得到啤酒酵母CRB2菌株Ald6基因,在大肠杆菌中进行克隆、表达、测序,并对表达产物的酶学性质进行了研究。结果表明,Ald6基因的大小为1503bp,编码的乙醛脱氢酶由500个氨基酸组成,与其它菌株的乙醛脱氢酶相比,核苷酸序列的同源性为7%-100%。乙醛脱氢酶以乙醛为底物时的Km值为28.14μmol/L,Vmax为98.03μmol·min^-1mg^-1,最适反应条件为15℃,pH8.0。中试酿造试验发现K^+、Mg^2+、Fe^2+对降低乙醛含量有显著作用。