简介:目的:探讨高强度聚焦超声(high-intensityfocusedultrasound,HIFU)体外处理胰腺癌细胞株PANC-1后仍存活细胞的STAT3/pSTAT3蛋白表达和细胞凋亡的变化及关系。方法:建立琼脂凝胶包埋的人胰腺癌组织体外实验模型,随机分为对照组和实验组并标记,实验组行JC200型HIFU治疗仪治疗,对照组不做任何处理,HE染色观察标本病理变化;免疫组化观察STAT3/pSTAT3蛋白表达变化。再将体外胰腺癌细胞实验模型分别行不同剂量的HIFU照射(0J,100J,200J,400J,800J),通过MTT观察胰腺癌细胞的增殖抑制情况,通过Westernblot检测STAT3/pSTAT3表达情况。结果:经HIFU治疗后,离体的胰腺癌靶区组织病理可以看到明显的凝固型坏死灶,细胞结构消失,免疫组化染色可见HIFU治疗的靶区组织棕色颗粒明显减少,提示治疗后STAT3/pSTAT3蛋白表达减低;MTT细胞增殖率检测提示与对照组(0J)相比,低功率组(100J,200J,400J)细胞增殖抑制无明显差异,高功率组(800J)的细胞增殖率明显减低,组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。Westernblot检测STAT3/pSTAT3表达提示低功率组(100J,200J,400J)与对照组无明显差异。结论:HIFU能有效的治疗胰腺癌,其机制可能与破坏肿瘤细胞自身结构及影响STAT3/pSTAT3蛋白表达有密切关系。
简介:从五十年代中期开始,不同类型的蛋白同化激素(或称合成类固醇)如大力补、诺龙等问世,运动员使用和滥用蛋白同化激素类药物逐步成为一个严重的问题。到1960年已经是所有项目都有人使用合成类同醇,以增大肌肉和增强力量。为此,1968年蛋白同化激素被列入国际奥委会禁用的药物之列。一、蛋白同化激素的分类及其在运动员中的滥用情况第二次大战期间德军部队使用蛋白同化激素以增加其攻击性,是使用蛋白同化激素的最早报导。用于运动员则在五十年代初期。早在1954年苏联就有使用合成类固醇的报导。正常男子,特别是力量和体能决定成败关键的运动项目,使用合成类固醇的运动员逐年增加。最初仅限于举重和投掷运动
简介:摘要:目的:研究探讨 血浆 D-二聚体、免疫球蛋白检测在支原体肺炎诊断中的应用价值。方法:从我院 2015 年 3 月至 2017 年 10 月收治的支原体肺炎患者中随机选取 100 例作为实验组,同时选择 100 例同期健康体检人员为对照组,对两组 血浆 D-二聚体、免疫球蛋白进行检测,并对比结果,分析 血浆 D-二聚体、免疫球蛋白检测的应用价值。结果: 对比两组的 血浆 D-二聚体、 免疫球蛋白水平,实验组均显著高于正常对照组,差异均显著( P < 0.05 )。支原体肺炎患者随着病情的加重, 血浆 D-二聚体、 免疫球蛋白表达呈逐渐增高的趋势,并且中度、重度患者的表达水平显著高于轻度患者( P < 0.05 ),重度患者二者表达水平最高,显著高于轻度与中度患者( P < 0.05 )。 结论:支原体肺炎患者的 血浆 D-二聚体、免疫球蛋白水平表达均比健康人显著增高,并且随着病情程度的加深呈增高的趋势,可见二者用于支原体肺炎的诊断与病情程度判定有显著的价值。
简介:摘要目的对结核病患者体内的纤维蛋白原以及D-二聚体水平进行检测,对其在临床中的治疗意义进行研究。方法对我院在2015年1月—2018年1月,这一期间内收治的结核病患者随机抽取出90例患者,把他们当成本次研究的研究目标,将其作为观察组,再在同时期来我院做健康检查的健康人中选取90例,作为对照组,对两组研究目标的纤维蛋白原水平、D-二聚体水平以及血小板的指标进行严格比较,对其在临床中的治疗意义进行深入分析。结果观察组患者的纤维蛋白原水平、D-二聚体水平以及血小板的指标要显著高于对照组的健康体检者,观察组患者的纤维蛋白原水平、D-二聚体水平以及血小板的指标分别为(4.35±1.07)g/L,(3274±2198)mg/L,(327±119)×109,对照组健康体检者的纤维蛋白原水平、D-二聚体水平以及血小板的指标分别为(3.15±0.98)g/L,(327±218)mg/L,(257±101)×109,组间差异显著,具备统计学意义(P<0.05)。结论患者纤维蛋白原水平及D-二聚体增高,对结核病的诊断有一定的辅助意义。且结核病患者易处于高凝状态,引发血栓,对患者的纤维蛋白原以及D-二聚体水平进行监测,可以对临床治疗产生重要意义。
简介:摘要目的明确多聚嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein, PTB)在正常人和骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法收集中国医学科学院整形外科医院收治的4例齿槽嵴裂患儿术后废弃骨髓血,原代分离培养人BMSCs并诱导分化为成骨细胞,RT-PCR和蛋白质印迹法检测PTB在诱导分化7 d和14 d的表达水平;应用shRNA技术对人BMSCs中PTB的表达进行敲减,茜素红染色和荧光定量PCR评价其对成骨分化的影响;体外分别应用浓度为10 ng/ml和40 ng/ml的肿瘤坏死因子α(TNF-α) 处理人BMSCs,荧光定量PCR和茜素红染色检测其对PTB表达及成骨分化能力的影响;流式细胞术检测人BMSCs经PTB敲减后细胞内活性氧(ROS)含量。10只6个月龄雌性SD大鼠采用随机数字表法随机分为卵巢切除骨质疏松模型组和假手术组,每组5只,荧光定量PCR检测其BMSCs中PTB的表达变化。各项定量数据以均值±标准差表示,2组间比较应用t检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果BMSCs成骨诱导分化7 d和14 d PTB表达显著升高,敲减PTB并成骨诱导14 d后,成骨标志基因RUNX2和ALP相对表达量显著下降,分别为对照组的0.74±0.15和0.29±0.18倍(t=3.490、P=0.039,t=7.983、P=0.004),且茜素红染色阳性的矿化结节形成减少。10 ng/ml TNF-α(t=3.528, P=0.039)和40 ng/ml TNF-α(t=4.306, P=0.023)均下调BMSCs中PTB表达,并抑制成骨分化。敲减PTB后BMSCs细胞内ROS含量(720.7±129.7)较对照组(1 204.0±300.1) 下降,差异具有统计学意义(t=4.872, P=0.040)。相比于假手术组(0.001 66±0.000 18),卵巢切除骨质疏松模型大鼠BMSCs中PTB的相对表达量(0.001 25±0.000 12)显著降低(t=3.217, P=0.032)。结论PTB的表达可促进BMSCs成骨分化,PTB敲减介导的ROS含量下调是其调控BMSCs成骨分化的一个重要机制。
简介:摘要目的探讨乙型肝炎患者D二聚体(D-D),纤维蛋白原(Fbg)及血小板参数的变化及其临床意义。方法收集2017年9月至12月在大连市第五人民医院收治的乙型肝炎患者52例。测定其血浆D二聚体,纤维蛋白原的含量以及全血血小板数(PLT),平均血小板体积(MPV),血小板体积分布宽度(PCT),血小板比积(PDW),大血小板比率(P-LCR),并与50例健康对照组进行比较。结果乙型肝炎患者血浆D二聚体水平明显高于正常对照组(P<0.05);血浆中纤维蛋白原含量明显降低(P<0.05);PLT低于对照组(P<0.05);MPV、PDW、P-LCR高于对照组(P<0.05);PCT无明显差异。结论D二聚体,纤维蛋白原及血小板各项参数的变化对乙型肝炎的诊断和病情判断具有重要的指导意义。
简介:摘要目的观察脑血栓患者的溶栓治疗过程纤维蛋白原和D-二聚体的动态变化,探讨其在指导溶栓治疗中的临床意义。方法采用直接测定法检测80例脑血栓患者治疗前后纤维蛋白原和D-二聚体水平,比较治疗前后纤维蛋白原及D-二聚体测定值差异,并选取同期非心脑血管疾病患者70例为对照组。结果脑血栓组治疗前后FIB和D-二聚体浓度与对照组相比,脑血栓组治疗前的血浆FIB水平较高(P<0.01),治疗后3小时的FIB水平明显降低(P<0.05),而D-二聚体浓度明显升高(P<0.05),治疗6天的脑血栓组患者FIB和D-二聚体的浓度基本恢复正常。结论血浆中FIB和D-二聚体的联合测定可以动态监测脑血栓患者溶栓治疗的情况,在溶栓效果及预测心血管栓塞事件等方面及脑血栓的治疗中有及其重要的意义。
简介:摘要目的观察D-二聚体和妊娠相关蛋白A和稽留流产的发病率的相关性分析。方法收集我院2014年5月至2017年4月的妊娠早期孕妇共121例,分为早期妊娠组(n=31),先兆流产组(n=43),稽留流产组(n=47)。分析三组妊娠8周、10周和12周的D-二聚体和妊娠相关蛋白A水平。结果经检验表明三组8周、10周和12周的D-二聚体的水平对比具有统计学意义(P<0.05),两两比较结果显示,早期妊娠组和先兆流产组8周、10周和12周的D-二聚体的水平对比具有统计学意义(P>0.05),稽留流产组的8周、10周和12周的D-二聚体的水平较早期妊娠组和先兆流产组的水平升高明显(P<0.05)。三组8周和10周时的妊娠相关蛋白A水平对比无统计学意义(P>0.05),在12周时,稽留流产组的妊娠相关蛋白A水平较早期妊娠组和先兆流产组出现降低(P<0.05)。结论检测患者的D-二聚体和妊娠相关蛋白A能有效的提高早期稽留流产的发生情况,提高了诊断率,值得在临床中推广实施。
简介:目的:探讨强直性脊柱炎(AS)患者血清骨桥蛋白(OPN)及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测并比较50例AS患者及20例健康者血清OPN及MMP-3水平,并与患者血细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)水平进行相关分析。结果AS患者血清OPN水平明显高于健康者(P<0.05),且与患者ESR及CRP水平呈正相关(P<0.05);AS患者血清MMP-3水平明显高于健康者(P<0.05),且与患者ESR、CRP水平呈正相关(P<0.05);AS患者血清OPN水平与MMP-3水平呈正相关(P<0.05)。结论OPN及MMP-3参与AS发病,其血清水平检测可用于患者病情活动判断及疗效评价。
简介:摘要目的探索滤板压滤法、复合膜法和离子交换层析法对静注人免疫球蛋白中残留IgA的去除效果,比较其优劣。方法对3种过滤方法规模化生产的多批次静注人免疫球蛋白中分子大小分布、蛋白回收率和IgA含量进行考察,分析不同过滤方法的去除效果。结果滤板压滤法、复合膜法和离子交换层析法的平均IgA去除率分别为86.6%、92.7%和97.9%,平均蛋白回收率分别为81.6%、95.3%和97.1%,平均分子大小分布分别为99.4%、99.6%、99.7%。结论3种过滤方式各有其优缺点,滤板压滤法应用范围广但IgA去除量有限;复合膜法使用方便、IgA分离效果好,但成本较高;离子交换层析法的IgA分离效果好但工艺繁琐,不同企业可选择适合的过滤方式。
简介:摘要目的重组表达人MHC Ⅰ类链相关蛋白A α3结构域(MHCⅠchain related protein A α3 domain,MICA-α3)蛋白及自然杀伤细胞受体2D(natural killer group 2D,NKG2D)蛋白,制备抗MICA-α3单克隆抗体,并检测其结合功能。方法构建MICA-α3及NKG2D蛋白表达载体,经转化大肠埃希菌BL21菌株表达重组蛋白,通过分子筛、组氨酸标签蛋白层析纯化。用重组MICA-α3蛋白免疫小鼠,采用杂交瘤技术筛选单克隆抗体,用细胞ELISA检测单克隆抗体功能。结果重组蛋白在大肠埃希菌BL21菌株中以包涵体形式表达。筛选得到5株能和表达MICA-α3的MDA-MB-453细胞结合的单克隆抗体,且不影响MDA-MB-453细胞与NKG2D结合。结论制备的抗MICA-α3单克隆抗体能与肿瘤细胞结合,同时不影响肿瘤细胞与NKG2D结合。
简介:摘要目的制备脑炎心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus, EMCV)的3C蛋白酶抗体并检测抗体特异性反应位点。方法构建原核表达载体pQE30-3C,将蛋白进行体外原核表达,免疫纯种BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,通过Western blot检测制备的抗体与3C蛋白结合的特异性,通过免疫荧光和Western blot检测抗体与EMCV病毒中表达的3C蛋白酶结合的特异性。原核表达具有不同抗原性的EMCV 3C的3个不同片段,并通过Western blot检测单克隆抗体与EMCV 3C蛋白酶不同片段的反应特异性。结果单克隆抗体与原核表达的3C蛋白酶反应良好,通过Western blot可以检测到病毒中表达的3C蛋白,通过免疫荧光也可以检测到EMCV病毒中的3C蛋白。通过与3C片段的反应发现,单克隆抗体与C端反应,即抗体针对的是C端处的抗原决定簇。结论成功制备EMCV 3C蛋白酶的抗体,能与原核表达的3C蛋白和病毒3C蛋白反应,且针对的是C端的抗原决定簇。
简介:摘要目的识别牛带绦虫新基因,分析和预测该基因及其编码蛋白的结构及特性,为其生物学功能研究提供依据。方法利用生物信息学在线分析网站、工具进行序列分析、预测其编码的膜联蛋白B3的理化特性、翻译后的修饰、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等。结果该基因全长1259bp,编码区为106-1074bp,编码322个氨基酸,为全长基因;无跨膜区;蛋白质在溶液中的性质不稳定,理论分子量为36415.1;没有质体、线粒体定位序列。结论运用生物信息学方法从牛带绦虫成虫cDNA文库中识别出了牛带绦虫成虫膜联蛋白B3基因,并对其所编码的蛋白质的结构与功能进行预测分析。
简介:摘要目的研究生存素survivin和半光酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteinyaspiratespecificprotease-3,caspase-3)在颊粘膜癌前病变中的表达情况,探讨凋亡抑制蛋白survivin和caspase-3在颊粘膜癌前病变中的表达特点及其相互关系。方法采用免疫组织化学SP法检测随机抽取的8例颊部正常组织、8例癌前病变石蜡切片中survivin和caspase3的表达。结果颊部癌前病变组中survivin表达阳性7例,阳性率为87.5%,Caspase3阳性表达7例,阳性率为87.5%,8例正常组织中survivin0表达,Caspase3完全表达,survivin在颊粘膜正常组织和癌前病变中表达的差异有显著性统计学意义(p<0.05),Caspase3的表达无显著性差异。结论口腔颊颊粘膜正常组织和癌前病变中survivin过度表达,抑制细胞的凋亡可能导致癌前病变的发生。