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  • 简介:以生菜(Lactucasativa)叶片为研究材料,参考拟南芥和水稻双向电泳方法,分析了等点聚焦时间和染色方法等影响双向电泳关键因素,建立适合生菜叶片总蛋白质分离双向电泳方法:采用三氯乙酸-丙酮沉淀法进行总蛋白质提取,用24cm固相pH梯度等电聚焦8000V×8h结合12%SDS-PAGE进行双向电泳分离,银染法和考马斯亮蓝染色法染色都获得了较好结果。应用Image-Master-Elite软件对考马斯亮蓝染色法染色图谱进行分析表明:每张凝胶上都检测到超过1000个蛋白质,不同凝胶之间蛋白质匹配律达到98%,具有较高分辨率和重复性。初步分析了生菜叶片蛋白质等电点、分子量分布情况,发现生菜叶片蛋白质等电点以5.0~5.5之间最多而分子量主要集中在20~60kD之间。

  • 标签: 生菜 叶片 蛋白质 双向电泳
  • 简介:拟建立抗HIV-p24蛋白单克隆抗体细胞株及双抗体夹心法,用于检测艾滋病病人血清p24抗原.用纯化基因工程表达HIV-p24蛋白免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,有限稀释法克隆细胞,ELISA筛选特异性抗体.结果克隆筛选出12株细胞,初步建立了检测HIV-p24抗原双抗体夹心酶联免疫吸附试验.本方法为监控艾滋病病毒感染窗口期和艾滋病病人临床治疗效果提供了检测手段.

  • 标签: 抗HIV-P24单克隆抗体细胞株 重组HIV-P24蛋白 酶联免疫吸附试验 艾滋病毒
  • 简介:用于防治器官移植排斥反应药物CsA发挥作用必须由体内受体蛋白亲环素(CyP)来介导。CyP是一个功能相关蛋白家族,具有肽基脯氨酸顺/反异构酶(PPIase)活性,能催化细胞内蛋白质折叠、装配和运输。CyP自身抗体与某些自身免疫病也有关系。亲环素A(CyPA)是免疫抑制剂CsA在体内主要受体蛋白。本研究对CyPA基因进行了克隆和序列测定,并构建了表达载体,在大肠杆菌获得高水平表

  • 标签: 亲环素A 肠杆菌 基因的克隆 肽基脯氨酸顺 自身免疫病 表达载体
  • 简介:用PCR技术获得抗菌肽-X基因、TNFα基因,与温度诱导表达载体pRC连接成为重组表达载体,导入大肠杆菌TG1,通过温度诱导表达重组蛋白.将重组质粒转入不同表达菌中进行表达,经SDS-PAGE选出EcoliBL21(DE3)为最佳表达宿主菌.培养后,离心得菌体,经超声破碎离心得包涵体,溶解后用CNBr切割并透析,最后经CM52纤维素柱分离纯化得到有活性高纯度抗菌肽-X.

  • 标签: 抗菌肽—X基因 克隆 大肠杆菌 表达
  • 简介:目的阐明β-葡糖醛酸酶(β-)在正常恒河猴组织分布。方法对实验恒河猴主要组织冰冻切片采用后偶合技术进行了染色和显微观察。结果肾上腺皮质柬状带和网状带细胞,肝脏、睾丸、卵巢、胃肠道实质细胞、枯否细胞、软骨细胞、卵巢间质腺细胞等富含β-G而深染蓝色。肾上腺皮质球状带细胞、血细胞、脑、肌肉、胆囊和胰腺实质细胞等酶含量少而染色较弱。软骨基质,小脑皮质分子层和颗粒层等部位酶呈阴性。结论动物种系和品种不同,器官组织内β-G含量也不相同。

  • 标签: 恒河猴 肾上腺皮质 细胞 葡糖醛酸 骨基质 冰冻切片
  • 简介:【背景】橘小实蝇是水果国际贸易中被关注有害生物。枇杷为福建名优水果,同时福建为橘小实蝇疫区,枇杷橘小实蝇检疫处理技术是保证枇杷出口关键环节。【方法】对人工接入枇杷果实橘小实蝇卵和幼虫低温感受性、小规模处理和大规模处理及低温对枇杷果实品质影响进行研究。【结果】橘小实蝇2—3龄幼虫混合虫态最耐受低温;1.5℃下处理12d,可完全杀死枇杷果实橘小实蝇,并且低温处理对枇杷果实无损伤。【结论与意义】低温可用于枇杷内橘小实蝇检疫处理。

  • 标签: 冷处理 橘小实蝇 枇杷
  • 简介:粘膜免疫是机体防御系统主要成分.致病性细菌侵入机体后,首先遭遇到天然免疫抵抗,随后产生获得性免疫,两者共同执行机体防御功能,消灭入侵细菌.最近研究表明上皮细胞对细菌感染有重要免疫调节作用,在天然免疫与获得性免疫防御机制起重要作用.本文重点介绍肠上皮细胞在天然免疫作用.

  • 标签: 肠粘膜上皮细胞 天然免疫 作用 粘膜免疫
  • 简介:在高中化学学习过程,有很多同学都会存在这样问题,对于化学现象与问题,我们都有一定认知与了解,但是在具体实践或者是考试应用上,却难以做出很好地解答.本文就从化学学科自身特征以及学生认知认知风格等方面来进行分析,希望能够是这种让学生“懂而不会”状况得到有效地解决.

  • 标签: 高中化学 认知 学习困难
  • 简介:DNA鉴定技术是当代法医物证检验中最为重要鉴定技术,是以遗传学为理论基础,以生物检材DNA分子为研究对象,解决个体识别和亲子鉴定问题.本文探讨其DNASTR分型技术、minSTR技术,单核苷酸多态性(SNP)分型技术,线粒体DNA遗传标记及表观遗传学遗传标记等在法医物证学应用现状和展望.

  • 标签: 法医物证学 DNA鉴定 综述
  • 简介:目的:探讨衣原体感染与血清抗精子抗体(AsAb)、抗心磷脂抗体(ACA)、抗子宫内膜抗体(EMAb)之间关系。方法:用ELISA法检测120例衣原体感染不育男性(男性衣原体感染组)和55例正常生育男性(男性正常对照组)血清AsAb、ACA;检测142例衣原体感染不孕女性(女性衣原体感染组)和60例正常生育女性(女性正常对照组)血清AsAb、ACA、EMAb。结果:男、女衣原体感染组AsAb、ACA检出率高于相应对照组,具有显著性差异(P值均〈0.05);女性衣原体感染组EMAb检出率高于女性对照组,具有显著性差异(P〈0.05)。结论:生殖道衣原体感染和与不孕不育有着密切相关性,且AsAb、ACA、EmAb产生与衣原体感染有关。

  • 标签: 不孕不育症 衣原体 抗精子抗体 抗心磷脂抗体 抗子宫内膜抗体
  • 简介:促黄体激素释放激素(LRH)是动物下丘脑分泌一种十肽,分子量为1180,通过调节脑垂体分泌LH和FSH以及直接作用于性腺发挥生理作用,在控制机体生长发育和性周期活动具有重要作用。在畜牧业生产上,促黄体激素释放激素能有效诱导和加速排卵,促进发情,提高动物繁殖率,能有效治疗卵巢囊肿。目前生产普遍使用化学合成LRH类似物,但成本高。如果能人工表达LRH,将会在畜牧业

  • 标签: 促黄体激素 释放激素 大肠杆菌中表达 卵巢囊肿 机体生长发育 大学研究
  • 简介:随着高分子微球技术日益创新,流式细胞术与高分子微球技术相结合流式细胞微球芯片捕获技术也随之产生,流式细胞微球芯片捕获技术又称为流式微球分析技术、流式微球技术、流式微珠阵列术,具有检测灵敏度高、特异性强、分析速度快等优点,应用前景广阔。我们就流式细胞微球捕获芯片技术在医学研究进展做简要综述。

  • 标签: 流式微珠阵列术 细胞微球芯片捕获技术 流式细胞术 液相多重蛋白定量技术
  • 简介:目的探讨角色扮演法在护理病史询问教学应用效果。方法试验组采用角色扮演法,通过试题考核和问卷调查,与对照组传统教法进行比较。结果试验组考核成绩显著高于对照组(P<0.05),角色扮演法得到学生认可。结论角色扮演法有助于提高学生学习兴趣和临床实践能力。

  • 标签: 角色扮演法 护理病史询问 效果
  • 简介:自学能力是运用已学知识去单独地获取新知识能力,这是一种综合能力.自学物理必须有较好基础知识和较强阅读、记忆、思维、想象、归纳、运用和实验能力.时代呼唤我们要高度重视学生自学能力培养.我们应该在教学给每一个学生创造一个良好自学环境和机会,并指导他们学会自学。本文就此进行了分析探讨。

  • 标签: 物理教学 培养 学生自学
  • 简介:细胞培养过程细胞自然凋亡是细胞受环境压力影响而发生现象。随着细胞自然凋亡分子生物学和生物化学研究深入,对以动物细胞产品生产为目的细胞培养产业将产生极有价值影响。采用DNA重组技术把预防细胞自然凋亡基因导入细胞和在培基中加入具有抗细胞自然凋亡化合物等手段已用于预防或减缓细胞培养过程细胞自然凋亡。这些技术将大大延长细胞达到饱和密度后培养时间,从而使细胞培养系统生产效率得以显著提高。

  • 标签: 动物细胞 细胞培养 细胞自然凋亡
  • 简介:目的:探讨Orexin-A对肥胖大鼠摄食和自由活动影响。方法:雄性SD大鼠下丘脑外侧区(LH)置管,预先测量体重(BW),脂体重(FM)和瘦体重(LM),据此对大鼠分组并分别提供高脂(HF)和低脂(LF)饮食饲喂,通过置管向大鼠LH注射人工合成脑脊液(aCSF)或orexin-A(OXA)。在饲喂前后监测OXA对大鼠自发动态运动(SPA)以及摄食量,体重(BW),脂体重(FM)和瘦体重(LM)影响,以及每日LH注射OXA是否能够抵抗高脂饮食引起摄食诱导肥胖(DIO)。结果:高脂饮食饲喂之后,高摄食诱导肥胖(DIO)大鼠和低DIO大鼠间体重增加量(ΔBW)、摄食量和高脂饮食饲喂后体重无差异(P〉0.05),但与低脂饮食组大鼠相比,上述各指标均显著增加(P〈0.05)。低DIO大鼠24hSPA和活跃期SPA显著高于高DIO大鼠(P〈0.05)。LH注射OXA可使严重DIO降低而轻微DIO增加,DIO程度对LH注射OXA后SPA影响呈非线性。每日双侧LH注射OXA可抑制早期DIO但并不改变大鼠摄食量。LH注射OXA使大鼠SPA增加,影响能量消耗,有助于DIO抵抗。结论:Orexin-A可通过增加大鼠活动量,调控肥胖大鼠摄食和DIO抵抗作用。

  • 标签: OREXIN 下丘脑 高脂饮食 神经肽 能量平衡
  • 简介:CTLA4Ig是人CTLA4胞外区与人免疫球蛋白铰链区、CH2区、CH3区组成融合蛋白,可以与B7结合,通过阻断B7与CD28结合,从而阻断B7介导T细胞活化必需共刺激信号,可作为免疫抑制剂用于器官移植。将CTLA4Ig融合分子克隆到真核表达载体pCI-dhfr,并用脂质体方法转染到COS7和CHO-dhfr-细胞,用氨甲喋呤筛选转染CHO-dhfr-细胞。用RT-PCR、ELISA、细胞免疫荧光染色和Western-blot鉴定重组蛋白表达。采用A蛋白纯化重组蛋白。

  • 标签: CTLA4Ig融合蛋白 CHO细胞 表达 免疫抑制剂
  • 简介:诱集植物作为一种传统害虫治理工具,在农业生产中应用越来越广泛,其重要性也随着时间推移日益凸显。本文结合国内外研究现状,从特点、应用、优势和发展前景等方面综述了诱集植物在害虫生态控制重要作用。同时以香根草为例具体说明了诱集植物应用方法,为诱集植物利用与开发提供参考。

  • 标签: 诱集植物 生态系统 生物防治 研究进展 香根草
  • 简介:近年来,肺部真菌感染发病率不断增加,尽管培养是真菌诊断金标准,但其耗时较长,临床应用受限。支气管镜下肺泡灌洗技术方便、快捷、创伤小,通过对应用该技术所获得支气管肺泡灌洗液行细胞学检查、常规染色、真菌抗原和分子学技术检测已是快速诊断某些真菌感染重要手段之一。

  • 标签: 灌洗 真菌 细胞学 抗原检测
  • 简介:新生/格特隐球菌是一种双相担子类病原真菌。隐球菌性脑膜炎是最常见隐球菌病,致残率和死亡率极高。和宿主环境有效交流对隐球菌生存至关重要。隐球菌利用复杂信号系统来感应外界环境变化并调控繁殖、发展和毒力。已知多种信号通路参与新生隐球菌对宿主环境应答,调控新生隐球菌毒力。MAPK通路(mitogen—activatedproteinkinase)是其中最重要信号通路之一,包括高渗透性甘油促分裂原激酶信号转导通路(highosmolarityglycerolmitogenactivatedproteinkinasesignalingtransductionpathway,HOG.MAPK)、蛋白激酶C信号转导通路(proteinkinaseCmitogenactivatedproteinkinasesignalingtransductionpathway,PKC—MAPK)及Stel2转录基因通路(sterilel2transcriptorsmitogenactivatedproteinkinasesignalingtransductionpathway,Stel2-MAPK)。对这些传导通路各个环节了解,不仅有助于阐明MAPK通路作用机制及其对毒力调控作用,而且可以为寻找新药物靶点、治疗新生隐球菌病提供帮助。

  • 标签: MAPK 信号途径 新生隐球菌 隐球菌病