简介:目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoVGⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoVGⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoVGⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的检测,饮用水被NoVGⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。
简介:研究了超滤对大蒜中蒜氨酸和大蒜多糖的分离效果。通过高效液相凝胶色谱测定了大蒜中糖类物质的分子量分布,根据检测结果选择合适的超滤膜;分别研究了料液浓度、压力、加水量、中空纤维膜组件的污染和清洗方法对超滤效果的影响。结果表明,大蒜的糖类物质中M-n大于4880Da的占95%以上,截留分子量为4000Da的中空纤维膜组件对蒜氨酸和大蒜多糖分离的最佳条件为:蒜氨酸浓度2.003mg/mL,压力68.9kPa,加水量1.5倍,该条件下蒜氨酸通过率为81.7%,大蒜中糖类物质的通过率为19.9%;使用后的滤膜对蒜氨酸的通过率为16.8%,仅为原通过率的20.6%;采用蒸馏水清洗滤膜后,蒜氨酸通过率提高到56.6%,恢复为原通过率的69.3%;采用蒸馏水和NaOH溶液混合清洗滤膜后,蒜氨酸通过率提高到79.5%,恢复为原通过率的97.3%。
简介:目的对一种小分子生物活性肽(重组BMP)样品进行电喷雾质谱测定,初步确定其一级结构。方法离子化方式:电喷雾离子化;检测方式正离子;质量扫描范围m/z150~1000;干燥气(N2)流速5arb;雾化气(N2)压力35arb;毛细管出口电压4.5kV;碎裂器电压100V;碰撞诱导解离技术碎裂器电压为35%;碰撞气流量为电子流量控制器自动控制;进样方式:流动注射进样;流动相为乙腈∶水(50∶50)。结果利用电喷雾质谱技术,初步测定重组BMP样品的一级结构为H-Lys-Gly-Asp-Glu-Glu-Ser-Leu-Pro-OH。结论该方法能够初步测定小分子生物活性肽的一级结构,为实验室生物工程菌构建提供准确有效的检测技术。
简介:当用某种抗原免疫产蛋母鸡时,鸡可产生相应的多克隆抗体─—免疫球蛋白,并被运送和储存于鸡卵的卵黄中,此种免疫球蛋白称为IgY(ImmumoglobulinofYolk)。一只母鸡一经免疫应答后,即可从其不断生产的鸡卵的卵黄中获得大量的、均一的、高效价的IgY,而且lgY有许多独到的优点,具有许多潜在的应用价值,可代替由免疫小鼠、兔等哺乳动物制备的抗体。因而近年来,国外对IgY的研究应用十分活跃,特别是将IgY作为食品的免疫型强化剂的应用研究正在不断开展,前景非常广阔。一、IgY的特点:1.IgY类似于哺乳动物的igY.分子量为180lH>,其重链有四个稳定区,没有铰链区,而哺乳动物lgG的重键只