简介:目的在验证不同浓度叶酸培养影响人正常肝细胞系增殖、周期和迁移能力的基础上,应用转录组测序(RNASeq)技术筛选差异表达基因,为进一步探讨叶酸缺乏与基因差异表达以及正常肝细胞恶性转化之间的相关性打下基础。方法不同浓度叶酸培养(无叶酸组0mg/L,正常叶酸组40mg/L)的人正常肝细胞系QSG-77016个月,应用CCK-8实验检测细胞增殖、流式细胞技术检测细胞周期、细胞凋亡、Transwell小室检测细胞迁移;利用RNA-Seq技术对两组细胞中的mRNA进行检测,筛选差异mRNA;通过用实时定量PCR对RNA-Seq的结果进行验证,并结合统计学和生物信息学方法分析差异mRNA。结果无叶酸培养显著提高QSG-7701细胞的增殖能力,促进细胞由静止期进入分裂期,促进细胞的迁移能力;RNA-Seq检测得到含有16774条差异mRNA的数据集,初步分析显示其中391条差异mRNA可能与不同浓度叶酸培养相关,其中上调的115条,下调的276条;随机对其中11条进行实时定量PCR验证,72.73%的结果与RNA-Seq一致;分析显示,差异mRNA相对应的基因与细胞周期等生理过程以及多种肿瘤的发生、发展密切相关。结论最终筛选出参与叶酸调控正常肝细胞恶性转化相关的基因,RNA-Seq技术能有效地用于差异基因地筛选。
简介:【摘要】目的:探讨实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的效果及检出率评价。方法:以2021年1月至2021年12月接受阴道细菌检查的80例阴道细菌感染性疾病患者设置为观察对象,所有患者均执行实时荧光PCR检查和细菌培养法检查,对比两组检测的敏感度和特异度,对比两种检测方法的细菌检出率。结果:实时荧光PCR检验法的阳性检出率高于细菌培养法,(P
简介:【摘要】目的:探讨实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的效果及检出率评价。方法:以2021年1月至2021年12月接受阴道细菌检查的80例阴道细菌感染性疾病患者设置为观察对象,所有患者均执行实时荧光PCR检查和细菌培养法检查,对比两组检测的敏感度和特异度,对比两种检测方法的细菌检出率。结果:实时荧光PCR检验法的阳性检出率高于细菌培养法,(P
简介:摘要:目的:通过思维导图培养中医规培生“凭脉辨证论治”思维,并探究其临床疗效。方法:选取同级、同期贵州中医药大学第一附属医院规培的,教育背景、学习能力相仿的临床规培生100人为研究对象,随机分为对照组与试验组各50人,实验组采取基于思维导图构建的新模式教学方法,对照组按传统教学方式授课,5月后实验组运用思维导图来完成理法方药,对照组按传统辨证论治来完成理法方药,对胃脘痛病人进行治疗,并由专家评估临床疗效。结果:实验组临床疗效高于对照组(p=0.047,p<0.05),差异有统计学意义。结论:思维导图在中医规培生临证运用中,可帮助中医规培生在临床运用中增加其临床疗效。
简介:【摘要】目的:探讨临床在实施小儿肺炎支原体感染诊断期间快速血清学检验方法以及微生物培养检测方法的临床应用价值。方法:选取2021年3月~2023年6月收治的84例疑似小儿肺炎支原体感染患者进行临床诊断研究;结合所有疑似小儿肺炎支原体感染患者的症状体征,合理对其展开快速血清学检验工作、微生物培养检测工作以及二者联合诊断小儿肺炎支原体感染疾病工作,以最终实际确诊为金标准,就三种方式诊断疾病的具体诊断效能进行统计对比。结果:所有疑似小儿肺炎支原体感染患者通过最终确诊后,阳性/阴性比例分别为50例/34例;临床对患儿合理展开二者联合诊断工作,阳性/阴性比例分别为49例/35例;二者联合诊断疑似小儿肺炎支原体感染诊断效能较快速血清学检验诊断效能、微生物培养检测诊断效能均有所提升,程度明显(P<0.05)。结论:临床对小儿肺炎支原体感染患者在开展诊断工作期间,快速血清学检验方法以及微生物培养检测方法虽然各具优势,但仍然存在局限性。为了将肺炎支原体感染的诊断效能提升,临床提倡将上述方法结合用于疾病最终诊断,不但可将诊断效能提高,而且可对肺炎支原体感染的早期诊治奠定基础,促进疾病预后的显著提升。
简介:目的评价不同浓度CD46预先给药对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的鼠原代小胶质细胞补体蛋白表达的影响。方法培养原代小胶质细胞,取分离纯化的小胶质细胞接种于24孔板,随机分为4组(n=6):正常对照组、LPS组、低浓度CD46组和高浓度CD46组。采用噻唑蓝法检测细胞活性,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定培养上清液补体C3浓度。结果LPS组、低浓度CD46组、高浓度CD46组补体C3表达均较正常对照组增加(P〈0.01);低浓度CD46组、高浓度CD46组补体C3表达均较LPS组减少,且高浓度CD46组补体C3表达较低浓度CD46组减少(P〈0.05)。结论CD46可明显抑制LPS诱导的小胶质细胞激活,显著减少补体C3释放。
简介:目的:研究3—甲基胆蒽(3—methylcholanthrene,3—MC)对原代培养大鼠肝细胞细胞色素P4501A1/2的诱导作用,并探讨其时间—效应和剂量—效应关系。方法:原位两步胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞,无血清条件下培养细胞,并用不同剂量的3—MC诱导肝细胞24h或48h。乙氧基试卤灵(ethoxyresomn,EOR)为CYP1A酶活性探针药,高效液相色谱法(HPLC)测定试卤灵(resomfin,RSF)浓度。TaqmanRT—PCR法测定CYP1A1基因表达,Westembolt法分析CYP1A酶蛋白表达。结果:实验条件下对照组和3—MC诱导组的CYP1A1基因和酶蛋白,CYP1A1/2酶活性均可被检测。3—MC对原代培养大鼠肝细胞CYP1A1/2基因及蛋白表达、酶活性的诱导作用呈明显的剂量依赖性。结论:3—MC对大鼠原代培养肝细胞的CYP1A1/2有明显的诱导作用。
简介:目的探讨Kiss—1和乙酰肝素酶(Hpa)在子宫腺肌病发生、发展中的作用。方法选择10例子宫腺肌病患者作为研究组,8例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ级患者作为对照组,通过对子宫内膜腺上皮细胞的体外培养,用反转录-聚合酶链反应半定量分析Kiss-1和HpamRNA在研究组、对照组子宫内膜腺上皮细胞的表达。结果研究组腺上皮细胞Kiss-1mRNA的表达在增殖期与分泌期均较对照组降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。而同一组中增殖期腺上皮细胞Kiss—1mRNA的表达与分泌期相比差异无统计学意义(P〉0.05)。研究组腺上皮细胞HpamRNA的表达在增殖期与分泌期均较对照组升高,差异有统计学意义(P〈0.05),而同一组中增殖期腺上皮细胞HparaRNA的表达与分泌期相比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论Kiss—1mRNA表达减弱和HpamRNA表达增强可能与子宫腺肌病的侵袭过程有关,两者在腺肌病的发生发展中发挥重要作用。
简介:【摘要】目的 探讨实时定量PCR与传统微生物培养法诊断呼吸机相关性肺炎病原体的效果。方法 研究对象为我院2020年4月-2022年4月期间64例呼吸机相关性肺炎确诊病例,所有病例均接受实时定量PCR与传统微生物培养法检验,并对比两种检验方式的临床诊断应用价值。结果 实时定量PCR共确诊62例呼吸机相关性肺炎,诊断准确性、特异性、敏感性分别为96.87%、95.65%及97.56%,与传统微生物培养法确诊率差异较小,对比无统计学意义(P>0.05)。且呼吸机相关性肺炎病原体检出情况实时定量PCR与传统微生物培养法结果高度接近,对比无统计学意义(P>0.05)。但是在呼吸机相关性肺炎病原体检验时间及成本对比上实时定量PCR分别为(2.91±0.57)h与(40.68±12.51)元,均低于传统微生物培养法的(24.62±4.04)h与(60.44±17.07)元,对比有统计学意义(P>0.05)。结论 在呼吸机及相关性肺炎疾病检测中实时定量PCR及传统细菌培养法中均具有较高精度,但是检验用时及成本来说,前者更具临床优势,值得被进一步推广及应用。
简介:摘要:目的研究胎牛血清和新生牛血清在不同浓度条件下,对人二倍体细胞生长影响的情况,确定更适合人二倍体细胞生长的血清类型、浓度以及生长天数。方法进行预试验,选取同一厂家的胎牛血清和新生牛血清,分别制备含1%、2%、5%、10%血清浓度的细胞生长液,在T75方瓶中进行人二倍体细胞培养,分别在第1天、第3天、第4天、第5天、第6天、第7天观察细胞上清液,显微镜下观察细胞形态、贴壁情况,并用胰酶消化细胞,通过全自动细胞计数仪测定T75方瓶中的活细胞浓度、细胞存活率。根据预试验结论调整浓度范围,制备合适血清浓度的细胞生长液以及确定合适细胞生长天数,在T75方瓶中进行人二倍体细胞培养,并进行观察与测定。结果胎牛和新生牛血清无显著差异,血清浓度在10%时效果最好,培养至第4-5天时细胞活率达到峰值;胎牛血清浓度为5%时,培养效果可以达到新生牛血清5%更高浓度的培养效果,经验证其准确性和可重复性均良好。结论在浓度相同的情况下,新生牛血清与胎牛血清在培养人二倍体细胞时,培养效果无显著差异,而低浓度(5%)的胎牛血清与高浓度新生牛血清培养效果无明显差异,从细胞生长情况、培养效果和经济角度选择低浓度胎牛血清替换高浓度新生牛血清培养人二倍体细胞更为适合。
简介:医学是高度复杂的理论和实践结合的学科。正确的认识论对于提高临床医生的临床思维和临床水平具有积极的意义。《矛盾论》是我党经典的认识论著作,深入研读该文章,对于培养临床医学生的临床思维具有指导性的意义。
简介:目的:探讨非诺贝特及罗格列酮对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(MC)p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号传导通路的影响。方法:大鼠系膜细胞分别培养在正常糖浓度(5.5mmol/L)、高糖浓度(25mmol/L)、25mmol/L葡萄糖+非诺贝特(FB)100μmol/L及25mmol/L葡萄糖+罗格列酮(RG)20μmol/L。ELISA法检测培养细胞上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN);Phospho—ELISA法检测胞浆及胞核内p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达:以及RT-PCR法检测p38MAPK的mRNA的表达。结果:与正常对照组比较,高糖组MC合成基质蛋白Col-Ⅳ、FN增多;胞浆及胞核内P—p38MAPK的表达增加。非诺贝特及罗格列酮干预能使高糖培养系膜细胞合成Col-Ⅳ、FN显著减少,胞核内p-p38MAPK表达显著下调,但对胞浆内p-p38MAPK的表达则无显著影响。各组总p38MAPK蛋白水平及p38MAPK的mRNA表达则没有明显改变。结论:非诺贝特及罗格列酮能够显著下调高糖培养的Mc核内p38MAPK信号传导通路的活化,进而减少胞外基质合成。
简介:目的;研究艾纳香二氢黄酮对脂质过氧化致损伤的恒河猴原代培养肝细胞及肝亚细胞的保护作用。方法:艾纳香二氢黄酮与原代培养肝细胞共育后,以CCl4或FeSO4-半胱氨酸致细胞损伤,以脂质过氧化产物丙二醛产生量及转氨酶的漏出量作为损伤程度指标,亚细胞结构与艾纳香二氢黄酮共育后,以FeSO4^-半胱氨酸致脂质过氧化,以丙二醛产生量徇过氧化损伤程度。结果:10及100μmol·L^-1的艾纳香二氢黄酮可降低被损伤的肝细胞中的丙二醛产生,降低转氨酶漏出,抑制肝亚细胞结构中丙二醛生成,结论:艾纳香二氢黄酮具有抑旨质过氧化作用及肝1`业细胞结构保护作用。
简介:首先代表教育部高教司对中国药科大学教学工作会议的召开表示祝贺.国家"十五"教育发展计划提出"规模、结构、质量、效益"协调发展,突出结构调整,提高质量.目前很多学校定位在"一流大学",有的是世界一流,有的是国内一流,其根本任务还是人才培养.各个大学都提出明确的人才培养目标,吴晓明校长在报告中也已经明确提出了中国药科大学21世纪两种类型人才的培养模式,可见人才培养始终是高等学校的首要任务.在这次全国教学成果评比中,中国药科大学获得了3项教学成果奖,目前已经通过专家评审,在全国150多所医药院校中排名第二.这是一个很好的成绩,表明中国药科大学在医药类院校中始终走在前列.