简介：摘要目的探讨血清MIR4435-2HG水平在口腔鳞状细胞癌诊断和预后中的价值。方法本研究为回顾性病例对照研究。纳入癌症和肿瘤基因图谱（the cancer genome atlas project，TCGA）数据库中头颈部鳞状细胞癌的口腔鳞状细胞癌患者518个样本，以长链非编码RNA MIR4435-2HG表达量中位数为界，将患者分为高表达组和低表达组，比较两组患者的5年无病生存率和总生存率。收集2012年1月至2015年1月就诊于湖州师范学院附属口腔医院口腔颌面外科的82例口腔鳞状细胞癌患者的血清标本进行验证，探索MIR4435-2HG的预后价值。通过生物信息学手段预测MIR4435-2HG参与的生物学过程。运用SPSS 23.0设定MIR4435-2HG的最佳诊断和预后截点。结果分析TCGA数据库中518个口腔鳞状细胞癌患者样本显示，MIR4435-2HG高表达组患者的5年总生存率[43.2%（112/259）]显著低于MIR4435-2HG低表达组[51.7%（134/259）]（P<0.05）；MIR4435-2HG高表达组的5年无病生存率[56.8%（147/259）]显著低于MIR4435-2HG低表达组[64.1%（166/259）]（P<0.05）。82例口腔鳞状细胞癌患者样本验证结果显示，MIR4435-2HG高表达组的3年总生存率[40.0%（8/20）]显著低于MIR4435-2HG低表达组[80.6%（50/62）]（P<0.05）。对血清MIR4435-2HG高表达组和血清MIR4435-2HG低表达组患者的临床病理资料进行比较，结果显示两组患者的性别、年龄、肿瘤发生部位、TNM分期差异均无统计学意义（P>0.05）。MIR4435-2HG高表达组的淋巴结转移率[45.0%（9/20）]显著高于低表达组[12.9%（8/62）]（P<0.05），且高表达组的组织学分级[80.0 %（16/20）]显著高于低表达组[24.2 %（15/62）]（χ2=20.030，P<0.05）。生物信息学分析结果显示，MIR4435-2HG靶基因的生物功能主要富集于蛋白质代谢、核仁和胞质中rRNA的加工、SEMA4D诱导细胞迁移过程、线粒体翻译启动及伸长过程等。结论血清MIR4435-2HG可作为口腔鳞状细胞癌的潜在预后标志物。

简介：目的研究与唾液腺腺样囊性癌（SACC）侵袭转移相关的微小RNA（miRNA）,探讨miR-181a对SACC侵袭和迁移的影响。方法选择1对不同侵袭迁移能力的SACC细胞株（SACC-LM/SACC-83）,采用miRNA芯片技术分析细胞株中miRNA的表达差异,初步筛选出与SACC侵袭转移相关的miRNA。再通过过表达或沉默细胞株中miR-181a的表达,进行细胞划痕和Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭、迁移能力。采用SPSS17.0软件对数据进行统计学处理,以P〈0.05为差异具有统计学意义。结果miRNA芯片结果显示,高侵袭迁移能力的SACC细胞株miR-181a表达明显下降。细胞划痕和Transwell实验结果表明,SACC-LM细胞转染miR-181amimics后体外侵袭迁移能力明显受到抑制（t=-5.235,P〈0.05）;SACC-83细胞转染miR-181aLNA后体外侵袭迁移能力有所提高（t=7.713,P〈0.05）。结论不同侵袭迁移能力的SACC细胞株中存在多种miRNA的差异表达。miR-181a的表达降低可能导致SACC细胞侵袭迁移能力的增强。

简介：摘要目的分析人微小RNA-6832-5p(hsa-miR-6832-5p)在膀胱肿瘤组织、膀胱肿瘤细胞中的表达，探讨其对富含脯氨酸11(PRR11)基因表达的干扰作用及对细胞增殖和迁移的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测膀胱肿瘤组织、癌旁组织、膀胱肿瘤细胞株和正常膀胱上皮细胞中hsa-miR-6832-5p的表达水平。生物信息学预测并采用双荧光素酶报告基因验证hsa-miR-6832-5p的下游靶基因。分别转染hsa-miR-6832-5p模拟物和miR-NC至hsa-miR-6832-5p表达水平最低的膀胱肿瘤细胞株，命名为miR-6832-5p组和miR-NC组。qPCR检测转染后细胞中hsa-miR-6832-5p和靶基因mRNA的表达水平。Western blot检测靶基因蛋白的表达水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和Transwell实验分别检测细胞增殖和迁移能力。结果膀胱肿瘤组织中hsa-miR-6832-5p的表达低于癌旁组织(P<0.01)，膀胱肿瘤细胞株中hsa-miR-6832-5p的表达均低于正常膀胱上皮(P<0.05)，其中T24细胞表达水平最低(P<0.01)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示hsa-miR-6832-5p可直接作用于富含脯氨酸11基因(PRR11)的3′-非翻译区(P<0.01)。miR-6832-5p组细胞中hsa-miR-6832-5p的表达量明显高于miR-NC组(P<0.01)。miR-6832-5p组细胞中PRR11的表达量明显低于miR-NC组(P<0.01)。Western blot结果与qPCR结果一致。与miR-NC组比较，转染hsa-miR-6832-5p后膀胱肿瘤细胞增殖能力明显下降(P<0.05)，细胞的迁移能力明显下降(P<0.01)。结论Hsa-miR-6832-5p在膀胱肿瘤组织和细胞株中表达明显降低，hsa-miR-6832-5p可通过下调PRR11基因的表达抑制膀胱肿瘤细胞的增殖和迁移。

简介：摘要目的研究miR-9靶向己糖激酶2（hexokinase 2，HK2）对乳腺癌细胞增殖的调节作用。方法取乳腺癌组织及癌旁组织，检测miR-9及HK2的表达水平；培养乳腺癌MCF-7细胞，分为空白对照组、NC组、miR-9组、NC-siRNA组、HK2-siRNA组，检测细胞活力、HK2及cleaved caspase-3表达水平，验证miR-9对HK2的靶向结合。结果乳腺癌组织中miR-9的表达水平低于癌旁组织（0.52±0.08 vs 1.05±0.25，t=16.685、P<0.000），HK2的表达水平高于癌旁组织（0.73±0.14 vs 0.34±0.08，t=17.587、P<0.000），miR-9与HK2呈负相关；miR-9组细胞的OD490水平、HK2表达水平、包含HK2基因mRNA 3’UTR的双荧光素酶报告基因的荧光活力低于NC组（0.58±0.09 vs 1.04±0.21、0.51±0.08 vs 1.18±0.24、41.11±9.28 vs 148.28±29.59，t/P=4.027/0.007、5.297/0.002、6.912/0.001），cleaved caspase-3表达水平高于NC组（1.08±0.26 vs 0.42±0.09、t/P=4.797/0.003）；HK-siRNA组细胞的OD490水平、HK2表达水平低于NC-siRNA组，cleaved caspase-3表达水平高于NC-siRNA组。结论miR-9能抑制乳腺癌细胞的增殖，其机制可能与靶向抑制HK2表达，增加下游cleaved caspase-3表达有关。

简介：摘要目的筛选Toll样受体2(Toll-like receptor 2, TLR2)通路下游与辐射防护调控相关的关键miRNA，并探讨miR-21功能。方法以60Co γ射线对野生型(wild type, WT)、TLR2 KO小鼠分别进行6.0、7.0、8.0 Gy全身照射，观察小鼠生存情况；通过转录组测序筛选骨髓细胞内TLR2通路下游关键miRNA，并通过QT-PCR验证其表达。过表达/敲低该miRNA后检测其生物学功能。结果6.0、7.0、8.0 Gy全身照射后，TLR2 KO小鼠较WT小鼠辐射敏感性增加(χ2＝4.490、13.100、7.928，P<0.05)，骨髓移植实验证明TLR2 KO小鼠辐射敏感性增加与照射后骨髓细胞损伤有关(χ2＝4.291，P<0.05)。转录组测序筛选到差异基因55个([log2 Fold Change]>0.95，Q<0.05)，其中上调基因28个，下调基因27个；定量PCR实验确定TLR2 KO(t＝9.420，P<0.01)与MyD88 KO(t＝10.700，P<0.01)小鼠骨髓细胞内miR-21表达下调。PAM3CSK4刺激后小鼠骨髓细胞内白介素6(IL-6)(t＝13.790，P<0.05)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)(t＝14.280，P<0.05)表达量上调且依赖于TLR2。miR-21过表达可以促进EL4(t＝5.951，P<0.05)和NIH/3T3(t＝4.786，P<0.05)辐射后细胞活力，抑制WT小鼠(t＝4.842，P<0.05)和TLR2 KO小鼠(t＝10.520，P<0.05)BMCs辐射后细胞凋亡。miR-21敲低后降低EL4(t＝4.815，P<0.05)和NIH/3T3(t＝4.042，P<0.05)辐射后细胞活力。结论miR-21在TLR2辐射防护进程中具有关键调控作用，其作用机制可能与上调IL-6与TNF-α有关。

简介：摘要目的研究miR-192在肝细胞癌中的表达及其对迁移、侵袭的影响。方法选择2018年1月至2019年8月本院采集的110例原发性肝癌样本组织作为研究对象，经血清miR-192检测，分析其在肝癌中的表达情况，并研究miR-192与肝癌细胞迁移、增殖相关性。结果肝癌TNM分级为Ⅲ～Ⅳ级、肿瘤数量>1个、肿瘤>5 cm及有血管侵犯的肝癌血清miR-192高表达率，均低于TNM分级为Ⅰ～Ⅱ级、肿瘤数量为1个、肿瘤≤5 cm及无血管侵犯，差异均有统计学意义（均P<0.05）；转染48 h后，肝细胞癌细胞增殖计数为（0.98±0.01），明显低于未转染组（1.48±0.02），转染72 h后，肝细胞癌细胞增殖计数为（1.21±0.02），明显低于未转染组（1.99±0.01），差异均有统计学意义（均P<0.05）；miR-192表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、化疗敏感性有明显相关性，差异有统计学意义（P<0.05）。结论慢性病毒介导miR-192与肝癌细胞增殖、迁移能力密切相关，可抑制肝癌细胞生长增殖，肝癌程度越高则miR-192表达越低，可为肝细胞癌靶向诊治提供依据。

简介：摘要目的探究miR-101对骨肉瘤MG-63细胞增殖率和凋亡率的影响。方法通过培养骨肉瘤细胞，合成阴性对照序列与miR-101模拟物序列，进行转染，设置空白对照组，采用MTT法检测各组细胞增殖率，采用流式细胞仪检测其凋亡率，记录结果并比较。结果转染率miR-101模拟物转染组G0/G1期细胞百分比为（13.06±1.02）%明显高于阴性对照组（3.28±0.95）%与空白对照组（3.16±0.97）%，差异有统计学意义（P＜0.05）；细胞增殖模拟物转染组在12h、24h、48h细胞增值率均低于阴性对照组与空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；细胞凋亡miR-101模拟物转染组细胞凋亡率为（11.30±1.43%）明显高于阴性对照组（3.14±0.76）%与空白对照组（3.03±0.94）%，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论miR-101能够下调骨肉瘤MG-63细胞的基因表达，抑制肿瘤细胞增殖，促进凋亡。

简介：摘要目的探讨前列腺癌患者microRNA-18a(miR-18a)在血清中的表达及其诊断价值。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测60例前列腺癌患者(PCa)、30例良性前列腺增生患者(BPH)和20例健康对照者(HC)血清miR-18a的表达水平。分析miR－18a表达水平与前列腺癌Gleason分级、TNM分期及PSA的关系。通过分析受试者工作特征(ROC)曲线判断miR-18a表达水平在前列腺癌诊断中的灵敏度和特异度。结果PCa患者血清miR-18a的表达水平分别明显高于BPH组和HC组(P<0.01)；miR-18a与Gleason评分、肿瘤分期有关(P<0.01)；miR-18a与PSA之间呈正相关(r＝0.701，P＝0.000)；miR-18a的ROC曲线下面积(AUC)为0.928(95%CI：0.880～0.976，P＝0.000)，敏感度为84.3%，特异度为75.8%。结论miR-18a在PCa患者血清中表达水平明显增高，对于PCa的诊断有潜在的临床参考价值。

简介：目的：探讨microRNA-595（miR-595）在生长期骨性下颌前突患者血清中的表达水平及其与下颌骨生长的关系。方法：选取骨性下颌前突患者83例（替牙列23例,早期恒牙列60例）及正常对照92例（替牙列24例,早期恒牙列68例）,用实时荧光定量PCR法检测两组样本血清中miR-595的表达情况,通过TargetScan软件预测它可能的靶基因,并对测量结果进行统计学分析。结果：与对照组相比,下颌前突组miR-595的表达量下调,与下颌骨的生长量呈负相关,有明显统计学差异（P〈0.01）。结论：miR-595可能通过靶基因对下颌骨生长起负调控（抑制）作用。

简介：目的探讨miR-133对喉癌细胞迁移和侵袭的影响及其相关作用机制。方法选取2017年1月—2018年1月收治20例喉癌患者的喉癌组织及癌旁正常组织,并应用miR-133mimics和miR-133inhibitor对Hep-2和TU212细胞进行转染分组。PCR检测miR-133在喉癌组织和癌旁正常组织的表达差异;划痕实验检测miR-133对喉癌细胞迁移的影响;Transwell实验检测miR-133对喉癌细胞侵袭的影响;双荧光素酶报告验证miR-133与成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)的靶向关系;Westernblotting验证miR-133对FGFR1蛋白的影响。结果与癌旁正常组织比较,喉癌组织中miR-133呈显著低表达状态(P<0.05)。与Hep-2NC组和TU212NC组比较,Hep-2mimics组和TU212mimics组细胞的迁移率和侵袭率显著降低(P<0.05)。野生型和突变型FGFR1基因的荧光素酶活性比较差异有统计学意义(P<0.05)。Hep-2mimics组、Hep-2inhibitor组和Hep-2NC组的FGFR1蛋白表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-133能通过靶向调控FGFR1蛋白的表达而影响喉癌细胞迁移和侵袭能力。

简介：摘要目的构建miR-7-1启动子核心序列的真核表达载体，并初步探讨其意义。方法根据5’端缺失实验原理，设计引物，PCR法分别扩增含不同长度启动子序列和相同miR-7-1成熟体序列的产物；纯化、经KPNI和XHOI双酶切后将它们分别亚克隆入pGL3.0-Basic真核表达载体，并进行酶切及测序鉴定；将三个构建成功的pGL3.0-miR-7载体（分别命名为p-1189-miR-7，p-1731-miR-7，p-2192-miR-7）体外瞬时转染小鼠乳腺癌4T1细胞；用Real-timePCR检测各组中miR-7成熟体的表达水平；CCK-8法检测细胞生长的变化；最后，利用TRANSFAC数据库预测结合miR-7-1启动子核心序列的潜在转录因子。结果酶切和测序验证成功构建了p-1189-miR-7、p-1731-miR-7、p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体；与表达载体p-1189-miR-7、p-1731-miR-7转染组相比，表达载体p-2192-miR-7瞬时转染4T1细胞后可有效表达miR-7成熟体，并显著抑制4T1细胞的体外生长（p＜0.05），提示miR-7启动子序列-1593位点到-2024位点为核心序列；最后，预测结果显示NK2-同源盒-5（NK2-Homebox-5，NKX2-5）和肝细胞核因子4（hepatocytenuclearfactor4homeobox，HNF-4）可能是结合该核心序列的转录因子。结论成功构建了p-1189-miR-7，p-1731-miR-7，p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体，并筛选到miR-7-1启动子的核心序列（-1593位点到-2024位点），为后续深入研究miR-7-1在乳腺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。

简介：摘要长非编码RNA(lncRNA)-母系表达基因3(MEG3)和微小RNA-21(miR-21)是抑癌和致癌因子。竞争性内源RNA(ceRNA)假说为研究RNA之间的相互作用提供了新的策略。MEG3可作为miR-21的ceRNA在乳腺癌、宫颈癌、胃癌、肺癌、白血病等恶性肿瘤的发生、发展、增殖、转移以及药物耐药、预后中发挥重要作用。

简介：摘要通过检测乳腺癌患者术前、术后和健康体检者的血清中miR-1825相对表达水平，评估血清miR-1825对乳腺癌患者术前和术后的临床应用价值。采用回顾性研究，收集2018年10月至2021年3月南部战区总医院住院的乳腺癌术前患者血清92例、乳腺癌术后患者血清64例和健康体检者血清60例，年龄（49.6±11.7）岁，运用实时荧光定量PCR技术，检测miR-1825在乳腺癌患者术前、术后和健康体检者血清中的相对表达水平；结合相关临床病理资料，分析其表达与血清糖类抗原15-3（cancer antigen 15-3，CA15-3）、血清糖类抗原125（cancer antigen 125，CA-125）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）的相关性；运用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）评价miR-1825、CA15-3单独及两两联合检测对乳腺癌诊断价值。采用Mann-Whitney U检验比较两组间指标水平差异，采用Krudkal-Wallis H检验比较多组间指标水平差异。相关性分析采用Spearman法。miR-1825在乳腺癌患者术前血清中的相对表达水平1.290（0.705，1.793）比健康对照组0.18（-0.876，0.725）显著增高，而在乳腺癌患者术后化疗-0.080（-0474，0.405）中显著降低（H=92.300，P<0.001）；临床病理特征分析发现，处于Ⅲ~Ⅳ期、组织分化程度低、肿瘤≥2 cm的患者miR-1825表达水平更高［Ⅰ~Ⅱ期：0.975（0.458，1.380），Ⅲ~Ⅳ期：1.955（1.663，2.535），U=98.000，P<0.001；低分化：1.685（1.448，2.143），高/中分化：0.700（0.395，0.898），U=15.500，P<0.001；肿瘤<2 cm：0.935（0.438，1.370），肿瘤≥2 cm：1.915（1.580，2.288），U=215.500，P<0.001］。相关性分析发现乳腺癌患者血清miR-1825表达与CEA（r=0.274，P=0.008）、CA15-3（r=0.587，P<0.001）表达呈线性相关性；ROC曲线结果显示，血清miR-1825用于区别乳腺癌术前患者与健康者和术后患者时，均具有较好的诊断价值，其用于分析乳腺癌术前患者和术后患者时的AUC最高（AUC=0.914，95%CI：0.872~0.956）。miR-1825可能是辅助诊断乳腺癌以及治疗效果监测的血清标志物之一。

简介：摘要目的探讨miR-146a对食管鳞癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及细胞周期等生物学行为的影响及其机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-146a在食管鳞癌细胞株Eca109、KYSE140和KYSE150中的表达。将miR-146a模拟物转染Eca109细胞，上调miR-146a的表达，采用细胞增殖实验检测细胞的增殖能力，Transwell实验检测细胞的侵袭能力，划痕实验检测细胞的迁移能力，流式细胞术检测细胞的凋亡和细胞周期。运用相关生物信息学技术预测miR-146a的靶基因，采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-146a与靶基因白介素1受体相关激酶1(IRAK1)3′端非翻译区(3′UTR)的结合情况，RT-qPCR技术和Western blot法分别检测靶基因mRNA和蛋白的表达。结果食管鳞癌Eca109、KYSE140和KYSE150细胞中miR-146a的相对表达量分别为0.36±0.05、0.16±0.06和0.09±0.02，均低于食管正常上皮细胞HEEC(1.00±0.05，均P<0.01)。miR-146a模拟物转染Eca109细胞后，细胞的吸光度值、穿膜细胞数[(52±18)个]、划痕减少距离[48 h为(25.29±0.77)μm，72 h为(30.66±0.91)μm]均明显低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.01)，早期凋亡率[(6.13±0.91)%]高于阴性对照组[(2.50±0.68)%，P<0.01]和空白对照组[(1.70±0.20)%，P<0.01]；G1期细胞百分比[(44.74±6.76)%]较阴性对照组和空白对照组减少(均P<0.05)，G2/M期细胞百分比[(41.88±2.88)%]较阴性对照组和空白对照组增多(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示，共转染IRAK1 WT和miR-146a模拟物组的荧光素酶活性明显低于其他对照组(均P<0.01)。RT-qPCR和Western blot检测结果显示，miR-146a模拟物转染组细胞中IRAK1 mRNA的表达水平为1.02±0.28，蛋白的表达水平为1.00±0.05，均低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.01)。结论miR-146a在食管鳞癌细胞株中表达降低，扮演着抑癌基因的角色。miR-146a能抑制食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移，促进其凋亡，阻滞细胞周期于G2/M期。miR-146a可能通过IRAK1的介导调控食管癌细胞的恶性生物学行为。

简介：Objective:B-celllymphoma2(Bcl-2)isanimportantmemberoftheBcl-2familyofproteinsthatregulatetheinductionofapoptosis.ThisstudyaimstoinvestigatewhetherBcl-2smallinterferingRNA(siRNA)combinedwithmiR-15aoligonucleotides(ODN)couldenhancemethotrexate(MTX)-inducedapoptosisinRajicells.Methods:ChemicallysynthesizedmiR-15aODNandBcl-2siRNAweretransfectedinRajicellsbyusingaHiPerFectTransfectionReagentandthencombinedwithMTX.ExpressionlevelsofBcl-2proteinweredetectedbyWesternblot.CellproliferationwasdeterminedbyCCK8assay.TherateofcellapoptosiswasdeterminedbyAnnexinV/PIdoublestaining.ThemorphologyofapoptoticcellswasobservedbyHoechst-33258staining.Results:AfterthecellsweretransfectedwithmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNA,Bcl-2proteinlevelswereevidentlydecreased.CCK8assayshowedthatcellproliferationwassignificantlydecreasedandwassignificantlylowerinmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroupthaninmiR-15aODNwithmethotrexategroup,Bcl-2siRNAwithMTXgroup,andsingleMTXgroup(P<0.05).Hoechst33258stainingrevealednumerousapoptoticcells.AnnexinV/PIdoublestainingshowedthattheapoptoticrateswere(13.13±1.60)%,(34.47±2.96)%,(32.87±3.48)%,and(45.47±2.16)%inMTX,Bcl-2siRNAplusMTX,miR-15aODNplusMTX,andmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroups,respectively.Amongthesegroups,theapoptoticrateofmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroupwasthehighest;thisapoptoticratewasalsosignificantlydifferentfromthatofmiR-15aODNorBcl-2siRNAplusMTX(P<0.05).Conclusions:Bcl-2siRNAcombinedwithmiR-15aODNcouldenhanceMTX-inducedapoptosisinRajicells.Bcl-2siRNAandmiR-15acombinedwithMTXmaybeausefulapproachtoimprovethetreatmenteffectsonlymphoma.更多还原

简介：摘要目的研究miR-520b在舌鳞状细胞癌（TSCC）中的表达，探讨其在TSCC侵袭转移过程中的作用及分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测TSCC组织及细胞系中miR-520b的表达；沉默或过表达TSCC细胞株SCC-9和UM1中miR-520b的表达后，实时荧光定量PCR检测细胞上皮-间质转化（EMT）相关基因表达；Transwell小室验证细胞侵袭转移能力改变；TOP/FO双荧光素酶报告基因系统、实时荧光定量PCR、Western blot等检测miR-520b表达对Wnt/β-catenin信号通路的影响；生物信息学、Western blot及双荧光素酶实验验证miR-520b调控Wnt/β-catenin信号通路的潜在靶基因Dickkopf 1（DKK1）。使用SPSS 21.0软件进行统计学分析，样本均数间比较采用Student′s t检验。结果与正常相邻组织（2.59±1.43）相比，miR-520b相对表达量在TSCC组织中显著上调（5.28 ± 1.63），差异有统计学意义（t = 16.04，P = 0.0005），并且与患者中更具侵袭性的TSCC表型正相关（5.81 ± 0.74 vs. 3.08 ± 0.89，t = 12.11，P = 0.0011）；过表达miR-520b促进TSCC细胞侵袭转移（SCC-9：110.8 ± 17.8 vs. 74.7 ± 9.8，tSCC-9 = 32.58，PSCC-9 = 0.0011；UM1：178.8 ± 39.7 vs. 90.3 ± 22.5，tUM1 = 99.67，PUM1 = 0.0002），低表达则相反（SCC-9：74.7 ± 9.8 vs. 30.9 ± 7.8，tSCC-9 = -31.47，PSCC-9 = 0.0024；UM1：90.3 ± 22.5 vs. 35.7 ± 10.6，tUM1 = -37.89，PUM1 = 0.0019）；此外，过表达miR-520b可靶向抑制DKK1，进而激活Wnt/β-catenin信号通路，促进TSCC细胞上皮-间质转化。结论MiR-520b在TSCC中高表达，可能通过抑制DKK1增强Wnt/β-catenin信号通路，促进TSCC侵袭转移。

简介：摘要目的研究微小RNA-146a(miR-146a)对高糖诱导的人视网膜内皮细胞炎症反应的调控作用及其机制。方法收集2013年10—12月在南京医科大学附属无锡人民医院就诊的单纯糖尿病患者57例和糖尿病视网膜病变(DR)患者40例。另选取41名健康者作为正常对照。收集受检者的一般检查结果，并采集受检者静脉抗凝血各5 ml。体外培养人视网膜内皮细胞(HREC)系，分为高糖组和正常对照组，分别采用含30 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液和正常DMEM培养液培养。采用荧光定量PCR法分别检测各组受检者外周血和体外培养HREC中miR-146a的表达水平。分别用lipofectamine2000装载50 nmol/L miR-146a模拟物、模拟物对照剂和miR-146a抑制物、抑制物对照剂转染HREC。采用荧光定量PCR法检测各转染组细胞中miR-146a和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达水平。采用Western blot法检测核因子кB(NF-кB)p65和NF-кB p65Ser536蛋白相对表达量。结果糖尿病组和DR组miR-146a相对表达量分别为0.36±0.08和0.27±0.08，明显低于正常对照组的1.00±0.16，差异均有统计学意义(均P<0.01)。在高糖组HREC细胞中miR-146a相对表达量为0.37±0.11，明显低于正常对照组的1.00±0.18，差异有统计学意义(t＝5.57，P<0.01)。miR-146a模拟物组miR-146a mRNA的相对表达量为2 540.00±105.00，明显高于模拟物对照组的61.00±17.90；miR-146a抑制物组miR-146a mRNA的相对表达量为0.04±0.01，明显低于抑制物对照组的0.88±0.04，差异均有统计学意义(t＝23.23、17.12，均P<0.01)。miR-146a模拟物组ICAM-1 mRNA的相对表达量为0.35±0.12，明显低于模拟物对照组的1.00±0.13；miR-146a抑制物组ICAM-1 mRNA的相对表达量为2.74±0.48，明显高于抑制物对照组的1.00±0.16，差异均有统计学意义(t＝3.58、3.37，均P<0.05)。miR-146a模拟物组NF-кB p65Ser536蛋白相对表达量为0.43±0.03，明显低于模拟物对照组的1.07±0.09，差异有统计学意义(t＝6.74，P<0.01)。miR-146a抑制物组NF-кB p65Ser536蛋白相对表达量为2.08±0.12，明显高于抑制物对照组的1.00±0.01，差异有统计学意义(t＝8.76，P<0.01)。结论miR-146a能够通过抑制NF-кB磷酸化水平和ICAM-1的表达，减轻DR的炎症反应。

简介：【摘要】目的：探讨血清miR-34a对乳腺癌新辅助化疗疗效的预测价值。方法：选择70例新辅助化疗的原发性乳腺癌患者和25名健康志愿者作为研究对象，收治时间为2020年01月-2020年12月。各患者在化疗前，第2个周期结束和新辅助化疗结束后抽取静脉曲（6ml）。定量PCR检测血清miR-34a的表达，其与化疗响应的关系被分析。结果：CRT-PCR结果显示乳腺癌患者FD时血清miR34a的表达（5.77±2.78）显著高于健康志愿者（1.04±0.31），P

简介：摘要

简介：摘要目的探讨微小RNA（miR）-3142在宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、凋亡和顺铂耐药中的作用及其机制。方法将体外培养的HeLa细胞分为空白组、阴性组、miR-3142模拟物（mimics）组和miR-3142抑制剂（inhibitor）组，采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测HeLa细胞中miR-3142表达水平，噻唑蓝（MTT）法检测HeLa细胞增殖和顺铂耐药性，Transwell小室检测HeLa细胞侵袭，流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡情况，双荧光素酶报告基因实验检测miR-3142与第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因（PTEN）的靶向关系，免疫印迹法（Western blot）检测HeLa细胞中PTEN蛋白表达情况。结果miR-3142 mimics组细胞中miR-3142（11.47±2.15）表达水平、细胞增殖率[（127.36±11.08）%、（136.25±11.42）%、（145.75±12.35）%]和穿膜细胞数（108.75±8.06）及顺铂对各组细胞的半抑制浓度（IC50）值[（92.36±2.18）、（88.15±2.65）、（76.40±3.85）、68.58±3.85）μmol/L]均明显高于阴性组[（0.96±0.06）、（96.75±5.15）%、（95.48±7.73）%、（98.06±6.22）%、（49.85±4.35）、（85.27±1.05）、（76.33±1.72）、（49.95±2.05）、（34.52±2.88）]，而细胞凋亡率（2.12±0.23）%、细胞中PTEN（0.14±0.02）蛋白表达水平均明显低于阴性组[（10.65±1.13）%、（0.41±0.03）]（P<0.05）；miR-3142 inhibitor组细胞中miR-3142（0.12±0.01）表达水平、细胞增殖率[（70.13±4.22）%、（62.50±5.06）%、（45.52±3.26）%]和穿膜细胞数（24.36±1.12）及顺铂对细胞的IC50值[（68.52±0.36）、（54.75±0.68）、（26.63±1.26）、（11.44±1.75）]明显低于阴性组，而细胞凋亡率（19.28±2.38）%、细胞中PTEN（1.06±0.09）蛋白表达水平明显高于阴性组（P<0.05）。结论miR-3142可促进宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和顺铂耐药性并抑制其凋亡，其作用机制可能与靶向下调PTEN表达有关。