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  • 简介:摘要目的建立可用于确诊先天性维生素K依赖性凝血因子缺乏症1(vitamin K-dependent coagulation factor deficiency 1,VKCFD1)疾病的细胞体系。方法在稳定表达报告基因FIX-Gla-PC的HEK293细胞中,应用CRISPR/Cas9技术敲除GGCX基因;通过ELISA、DNA测序、Western印迹等方法鉴定GGCX基因敲除的单克隆细胞。用快速点变异的方法构建致病性GGCX变异体质粒;用ELISA方法检测GGCX变异对报告基因的影响。结果首先用ELISA方法筛选到两株报告基因无活性的单克隆细胞;之后DNA测序结果和Western印迹验证GGCX基因发生了编辑和敲除;最后通过转染野生型GGCX基因,可以恢复报告基因的活性,提示成功筛选到两株GGCX基因敲除的单克隆细胞。在筛选到的细胞株中转染已知可导致VKCFD1的GGCX变异体,发现报告基因活性在致病性变异体中显著降低。结论成功构建了检测GGCX活性的细胞体系,该体系可以用于诊断GGCX变异导致的VKCFD1。

  • 标签: 维生素K依赖性凝血因子缺乏症1 GGCX基因 酶联免疫吸附测定法 报告基因
  • 简介:目的构建含趋化因子融合蛋白SDF-KDEL的慢病毒载体pLenti6/V5-S-K,为研究I型人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染的基因治疗奠定基础。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增目的基因片段SDF-KDEL,纯化后的PCR产物定向连接入pLenti6/V5-D—TOPO载体,构建慢病毒载体pLenti6/V5-S—K,并在293FT细胞中建立慢病毒株,最后转染人宫颈癌HeLa细胞观察SDF-1蛋白的表达。结果成功构建了慢病毒载体pLenti6/V5-S—K,并证实SDF-1蛋白可在HeLa细胞系内表达。结论慢病毒载体可介导CXC-细胞内趋化因子(CX&in-trakine,SDF-K)基因高效、稳定转染HeLa细胞,可用于抗HIV-1感染的基因治疗。

  • 标签: 人免疫缺陷病毒 Ⅰ型 趋化因子受体 细胞内趋化因子 慢病毒载体 基因治疗
  • 简介:本文探讨具有k个极点的规则平面映象k极的计算,具有偶度数的极首先由Tutte于1962年计算出来,那是一个简单而别致的表达式。利用布朗平方法,Bender和Canfield推导出了两个极生成函数的代数方程,这些方程的求解,对于具有奇度数的极似乎太难,因而至今为止,在利用这些方程推导具有奇次方程的极数方面仍没有任何的进展,文中利用超级几何函数来计算极,并发现奇数的计算与偶极的计算具有本质的区别,同时也复杂得多。

  • 标签: 极点 计算方法 递归 偶度数 映象 奇度数
  • 简介:寝室里的小强最近迷上了“超级女声”,每天苦练K歌,不过他不是到KTV歌城去,而是在寝室里接上耳麦,对着他的电脑干嚎……于是晚饭后小强K歌时,寝室众弟兄就抱头鼠窜。

  • 标签: KTV
  • 简介:<正>闪闪K歌房《一吻天荒》这首歌作为《轩辕剑天之痕》的主题曲,暑假在家观剧的闪粉们应该会天天听到啦。到时随着剧集的热播人人都会唱,你还不赶紧学起来?

  • 标签: 方文山 轩辕剑 吃文 周杰伦 我爱你 许飞
  • 简介:同学们,你们喜欢K歌吗?你可知道K歌可以"K出"你的小秘密吗?想想你是下面哪一种唱法,再看看后面的"答案",你的小秘密可要曝光啦,呵呵~A、闭着眼睛唱B、不管音阶、扯着嗓子唱C、讲究动作、仪态D、两手紧握麦克风

  • 标签: 性格 麦克风 秘密
  • 简介:SONYK系列是SONY笔记本系列中的一款低端产品。外形设计上.SONYK系列一改同类型产品稳重商务设计思路.采用了与SQCJYZ1颇为相近的时尚气息与GR和FR等机型形成了鲜明的对比.

  • 标签: SONY公司 性能 VAIO TYPE K 外形
  • 简介:<正>K:亲爱的读者们!不知不觉《推理教室》已经陪伴大家走过了整整一年的时间,《推理总动员》也将在这一期完结,这意味着K即将和大家说再见了——最后一期的《推理教室》,让我们一起来回顾一下K的历程。

  • 标签: 推理 总动员 钻石 回顾 酒吧 穆青
  • 简介:“十、九、八、七、六……”伴随着欢呼声,“神舟十号”飞船缓缓升起,载着宇航员奇亚和他的儿子卡卡一同驶向太空。

  • 标签: 宇航员 飞船 太空
  • 简介:知道博士:由于用纯金制作首饰太柔软,难以镶制出各种精美的款式,尤其当镶嵌珍珠、宝石和翡翠等珍品时容易被丢失。因此,从古代起,人们就知道在纯金中加入少量银、铜、锌等金属,以增加黄金的强度和韧性,这样制作而成的金饰,称为饰金。确定饰金中纯金含量的制位叫“金位”,英文是“Karat”,简称“K”。因此,饰金又称为“K金”。

  • 标签: 初等教育 黄金 自然常识 计量单位
  • 简介:

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  • 简介:一“Ada(艾达)——”先生的声音安详,平稳。我东张张,西望望。

  • 标签: 美国 ADA 声音
  • 简介:控球后卫国籍:美国出生日期:1932年5月25日毕业院校:旧金山大学身高:1.85米体重:91公斤效力球队:波士凯尔特人(1958-1967)除了K.C.琼斯之外,NBA没有第二位球员在自己的职业生涯中拿到了几乎全部的总冠军。琼斯在大学和比尔·拉塞尔联手拿到了背靠背的NCAA冠军,接下来,他们又在1956年帮助美国队获得了奥运金牌。

  • 标签: 琼斯 凯尔特人 出生日期 控球后卫 职业生涯 NCAA
  • 简介:本文给出k连续映射和k道路连通性的定义.讨论^连续映射等价刻画和性质,证明了k连续满映射保持k连通性和k道路连通性,进而研究k道路连通性的基本性质,证明了k道路连通性是k连通的.k道路连通性是同胚不变性和有限可积;最后讨论k道路连通分支。

  • 标签: 连续映射 k闭集 k连续映射 k连通空间 k道路连通性