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  • 简介:FT被认为汇集各个开花途径关键因子,其超量表达可促进植物提早开花。研究通过RT-PCR方法,纽荷尔脐橙(Citrussinensis(L.)Osbeck)叶片材料,成功地克隆到了2个FT基因cDNA序列,分别为534bp537bp,各自编码177个178个氨基酸,并对其进行了生物信息学相关分析。荧光定量分析了2个CsFT基因在脐橙不同器官表达情况,结果表明二者在果皮、果肉、茎、叶、花中均有表达,但CsFT1基因在果肉表达量最高,CsFT2基因在叶表达量最高;这2个基因在不同花器官均有表达,CsFT1基因在花瓣中表达最高,CsFT2基因雌蕊中表达最高,并都在开花后第7天花器官达到最大,随后下降。将2个基因连接到植物表达载体pCAMBIA1301上,得到了过量表达载体pCAMBIA1301-35S-CsFT1pCAMBIA1301-35S-CsFT2,并成功转化农杆菌,下一步转化柑橘获得转基因植株提供了技术参考。

  • 标签: 柑橘 FT基因 基因克隆 表达 载体构建
  • 简介:在育种实践,叶色基因可作为标记性状,对提高杂交制种效率降低杂交种子生产成本具有重要意义。xws在水稻两用核不育系大面积制种田中发现一株自然黄叶突变体,研究比较了xws与野生型主要农艺性状,并对该突变体进行了遗传分析、基因定位及育种利用。结果表明:xws比野生型始穗期推迟3d,株高、穗长、单株有效穗数、穗粒数均比野生型有所增加,而千粒重比野生型略有减少。遗传分析表明xws黄叶性状受单隐性核基因控制,暂时将其命名为XWS。xws与R华占杂交F2群体作为定位群体,将XWS基因定位在水稻第3号染色体分子标记WY152到WY244之间,其遗传距离分别为0.2cM0.5cM。此外,通过xws开展相应育种利用研究,已选育出稳定带叶色标记性状两系不育系黄13S,其所配组合展示出极大应用潜力。

  • 标签: 水稻 黄叶突变体 遗传分析 基因定位 育种利用
  • 简介:以前期获得紫苏HPPR基因cDNA序列为模板,通过设计特异性引物染色体步移方法分离出HPPR基因启动子,全长2216bp,以此研究HPPR基因启动子结构及功能特点。生物信息学分析表明,该序列存在TATA-boxCAAT-box等典型真核生物启动子基本元件,以及对茉莉酸甲酯、生长素、水杨酸脱落酸等植物激素应答相关顺式作用元件,另外也存在非生物胁迫顺式作用元件。将HPPR启动子部分缺失序列替代pBI121载体CaMV35S启动子,构建了与GUS融合启动子元件缺失表达载体。试验研究该启动子在今后紫苏转基因定向改良提供了有用候选资源。

  • 标签: 紫苏 迷迭香酸 HPPR 启动子 序列分析 缺失片段
  • 简介:研究利用Me2Em4正反向引物组合对影响梾木属SRAP-PCR反应体系Mg2+、Taq聚合酶、dNTP引物浓度4个因素进行L9(34)正交试验,采用正交设计直观分析及方差分析对影响SRAP反应4个因素进行分析,并对模板DNA浓度进行了单因素试验分析。结果表明,梾木属SRAP-PCR20μL反应体系最佳组合为:Taq聚合酶2.0U、Mg2+浓度1.5mmol/L、dNTP浓度0.15mmol/L、Primer浓度0.30mmol/L、模板DNA浓度5.5mg/L以及含有2μL不含Mg2+10倍稀释缓冲液。各因素对梾木SRAP-PCR反应影响大小依次:dNTP、Taq聚合酶、Mg2+Primer。最后运用优化体系从100对SRAP引物组合筛选出26个多态性SRAP标记,可用于梾木属不同种间亲缘关系、系统进化遗传多样性等方面的研究。

  • 标签: 梾木属 SRAP 正交设计 反应体系 引物筛选
  • 简介:研究对来源于全球22个国家130份分子育种亲本材料,在福建省上杭县茶地上自然鉴定其田间苗瘟、叶瘟穗颈瘟发病率,旨在筛选出稻瘟病抗性亲本,丰富现有的水稻品种资源。供试130份水稻亲本材料中,高抗()、抗性(R)亲本分别都占全部鉴定材料11.5%,说明稻瘟病抗性资源丰富。但不同国家或地区存在抗源丰富程度不同,在东南亚或南亚一些国家抗源比较丰富,中国、日本、韩国等东亚国家抗性材料相对较少。

  • 标签: 水稻 分子育种 供体亲本 稻瘟病 抗性筛选
  • 简介:预防小反刍兽疫,生产稳定高效小反刍兽疫植物疫苗,研究小反刍兽疫病毒(PPRV)F基因为目的基因,pBI121基本表达载体,绿色荧光蛋白基因(GFP基因)标记基因,并通过添加核基质附着区序列(MAR序列)、驻内质网膜信号序列(KDEL序列),使用强启动子CsVMV替换启动子CaMV35S,以期使F基因在苜蓿能够高效表达,并最终实现预防小反刍兽疫目的。实验最终成功构建了五条载体:pBI121-CsVMV-GFP-F-MAR12-MAR34、pBI121-CsVMV-GFP-F-KDEL-MAR12-MAR34、pBI121-CsVMVF-MAR12-MAR34、pBI121-CsVMV-F-KDEL-MAR12-MAR34、pBI121-F。

  • 标签: 小反刍兽疫 转基因植物疫苗 苜蓿
  • 简介:木薯世界第三大薯类作物,所产淀粉广泛用作食品工业原料,重要粮食经济作物。木薯蔗糖合酶将光合同化物蔗糖向淀粉转化第一个关键酶,前期本课题组通过酵母单杂交分析发现αNAC可能木薯蔗糖合酶Ⅰ基因调控因子,研究在此基础上获得了αNAC基因转录序列并克隆其编码序列,发现编码蛋白具有典型NACUBA保守结构域。αNAC基因在木薯地上部叶地下部块根肉中转录活性较高,β-actin基因5%~25%,在施用外源激素条件下转录活性显著上调,其中茉莉酸达到峰值时间最短,水杨酸次之,乙烯、脱落酸、赤霉素生长素较长。此外,在MeSuSy1Promoter::GUS转化株中二次过表达αNAC基因,发现二次转化株GUS酶活显著低于单价转化株,表明过表达αNAC基因可以显著抑制木薯蔗糖合酶Ⅰ基因转录活性。

  • 标签: 木薯 蔗糖合酶 α-新生多肽复合体 激素 转录活性
  • 简介:研究对219份茄子种植资源进行耐涝性鉴定,获得了219份材料耐涝表型数据。用196个SSR标记对219份茄子种质资源基因组进行扫描,分析219份茄子材料群体结构及亲缘关系,并采用TASSEL软件一般线性模型(GLM)方法对标记与性状进行关联分析。最终得到了219份茄子材料群体结构、亲缘关系以及与茄子耐涝性紧密关联27个分子标记,茄子耐涝分子标记辅助育种提供一定参考。

  • 标签: 茄子 耐涝性状 SSR分子标记 关联分析
  • 简介:DREB类转录因子一类植物特有的,在非生物逆境胁迫起重要作用调控因子。研究割手密材料,采用同源基因克隆方法克隆获得2个DREB2类转录因子基因SsDREB2-1SsDREB2-2(GenBank登录号分别为KU963264KU963265)。序列分析表明,这2个基因长度分别为814bp709bp,分别编码262227个氨基酸;预测其蛋白质分子量分别为28.66kD24.95kD,等电点(PI)分别为5.426.47。氨基酸亲水/疏水性分析表明,这2个转录因子属于亲水性蛋白。多序列比对分析表明,两基因序列相似性98.7%。原核表达分析表明,这2个基因编码区能正常表达出目的蛋白,说明得到这2个基因为功能基因而非假基因。

  • 标签: 割手密 DREB 基因克隆 原核表达
  • 简介:在2005—2006年连续两年在条播条件下对国内外62份苜蓿种质55个4龄苜蓿品种种子产量及其构成因素多样性相关性进行了研究。结果表明所有参试苜蓿品种间种子产量差异比较大,生殖枝数/m^2、每生殖枝花序数、每花序小花数、每花序小荚数,每小荚种子数品种间存在较大变异,遗传多样性比较复杂。通过对两年数据进行相关分析发现,种子产量与生殖枝花序数在两年中相关均极显著,可以作为高种子产量品种选育重要指标之一。实际种子产量占潜在种子产量百分比在品种之间茬次之间均存在较大差异,而且发现两年中实际种子产量占潜在种子产量几乎均小于4%,绝大部分在1%~2%之间。研究发现千粒重与其它指标相关性不显著,国内品种千粒重表现比较大变异,多数品种间千粒重差异较大,但国外品种间(除Jindera外)千粒重变异较小,品种间差异不显著(p〉0.05)。

  • 标签: 苜蓿 种子产量 产量构成因素 遗传多样性
  • 简介:干旱应答元件结合蛋白(dehydrationresponsiveelementbindingprotein,DREB),在植物应对干旱、盐碱低温胁迫反应起非常重要调控作用。利用已知甘蔗栽培种DREB2转录因子序列,设计引物,按照同源克隆方法,获得了2个割手密DREB2基因组DNA序列,分别命名为SsDREB2-aSsDREB2-f(GenBank登录号分别为:KU963272KU963277)。序列分析结果表明,SsDREB2-a基因序列全长1578bp,SsDREB2-f基因序列全长1729bp,2个基因均包含1个内含子2个外显子。SsDREB2-aSsDREB2-f基因cDNA序列全长分别为824bp971bp,均编码262个氨基酸。序列比对分析显示,2个基因序列相似性96.6%,编码蛋白相似性98.9%,存在3个氨基酸变异位点。系统进化分析结果显示,割手密DREB2转录因子与高粱、牛鞭草、斑茅、玉米等植物DREB2转录因子同源关系最近。基因获得下一步了解DREB2基因表达与割手密抵御非生物胁迫能力之间关系奠定了基础。

  • 标签: 割手密 DREB2 基因克隆 比较分析
  • 简介:水稻白叶枯病由黄单胞菌水稻致病变种引起一种细菌性枯萎病害,严重危害水稻产量。水稻受白叶枯侵染后,通过对相关基因表达变化进行检测,研究水稻-白叶枯病菌分子互作机理一种重要手段。为了筛选出稳定表达内参基因,确保后续基因表达分析结果可靠性,研究接种了白叶枯病菌PXO61、PXO99水稻叶片研究材料,在侵染后不同时间点取样,对6个常用水稻内参基因(TUB,EF1α,UBQ5,ACT,18SrRNAGAPDH)表达进行qRT-PCR检测并用geNorm、NormFinderBestKeeper三种软件对6对常用内参基因稳定性进行了分析。结果发现:6个内参基因在两种白叶枯病菌侵染后表达量变化均有差异;综合三种软件算法,受白叶枯PXO61PXO99侵染后水稻叶片中表达最稳定基因为EF1α、ACTTUB,水稻响应白叶枯病菌基因表达及其进一步功能研究提供了参考借鉴。

  • 标签: 水稻白叶枯 水稻内参基因 QRT-PCR
  • 简介:有效利用SSR-PCR技术分析国家一级重点保护植物银缕梅遗传多样性,采用正交试验设计L16(43),即3因素4水平,对影响SSR-PCR扩增结果因素(引物,模板DNA浓度循环数)进行优化筛选,并在此基础上对聚丙烯酰胺凝胶上样量进行优化,建立了适合银缕梅最佳SSR-PCR反应体系:10μL2×PCRMix、40ng模板DNA、10μmol/L引物,其余用ddH_2O补齐至20μL。PCR扩增程序:95℃预变性15min,95℃变性30s,57.5℃退火1.5min,72℃延伸1min,30个循环,循环结束后,60℃延伸30min,扩增产物4℃保存。聚丙烯酰胺凝胶电泳上样量1.5~2.0μL最佳。利用优化后体系进行引物筛选,从18对引物筛选出11对具有多态性引物,说明该反应体系具有良好稳定性。该体系建立可以为今后利用SSR标记对银缕梅遗传多样性分析、系统发育研究、遗传图谱构建、基因定位分子标记辅助育种等研究提供基础。

  • 标签: 银缕梅 正交设计 SSR-PCR 最佳上样量 引物筛选
  • 简介:针对果实成熟时表现不同颜色甜樱桃品种(黄色品种‘佐藤锦’,红色品种‘拉宾斯’),采用高效液相法测定分析其果实生长花色苷主要成分及含量,采用RT-PCR克隆‘佐藤锦’一个MYB基因,同时利用荧光定量PCR分析PacMYBA基因在两个品种甜樱桃果实生长过程表达情况。结果表明,‘拉宾斯’果实转色后花色苷积累上升趋势明显,成熟后花色苷含量高且组分由单一一种逐渐丰富3种;‘佐藤锦’果实转色后花色苷含量有所增加但增加幅度不大,且花色苷组分单一;二者在转色后PacMYBA相对表达上升趋势明显,成熟时‘拉宾斯’PacMYBA相对表达远高于‘佐藤锦’。研究对解释甜樱桃果实生长过程色泽变化及推测PacMYBA对甜樱桃果实花色苷起正调控作用提供理论基础。

  • 标签: 甜樱桃 MYB 花色苷积累 基因表达
  • 简介:植物叶片中含有的多糖、蛋白质多酚等物质,很大程度会影响总DNA提取质量。研究剑叶虾脊兰(Calanthedavidii)银带虾脊兰(Calantheargenteo-striata)幼嫩叶片材料,采用改良CTAB法提取总DNA,设置样品重量(0.05g,0.10g,0.20g)、清洗时间(10min,20min,30min)、水浴温度(25℃,60℃,45℃)、水浴时间(2h,1h,0.5h)4因素3水平正交试验,探究不同因素、不同处理对DNA得率纯度影响,获取最佳提取条件。研究发现剑叶虾脊兰银带虾脊兰DNA最佳提取条件均为:样品重量0.2g、清洗时间30min、水浴温度60℃、水浴时间2h。该处理下剑叶虾脊兰DNA产率最高490.5ng/μL,A260/A280均值1.953;该处理下银带虾脊兰DNA产率最高139.83ng/μL,A260/A280均值1.967。各因素对剑叶虾脊兰DNA产率影响次序:样品重量>清洗时间>水浴温度>水浴时间;各因素对银带虾脊兰DNA产率影响:样品重量>水浴温度>清洗时间>水浴时间。研究虾脊兰属分子生物学研究提供科学依据

  • 标签: 虾脊兰属植物 正交试验 DNA提取方法优化 分子生物学
  • 简介:随着转基因技术得以不断创新和研发,被较为广泛应用于粮食生产中,商业化转基因植物种植技术有效解决了全球粮食短缺问题。但是,转基因技术所涉及知识产权问题,成为现阶段植物转基因研究者不可回避问题。研究基于法律保护视角,针对转基因植物知识产权,现阶段所存在主要问题,汲取发达国家保护成功案例经验,从而构建转基因植物知识产权法律保护理念及相应机制。中国转基因植物知识产权保护,提供可参考依据

  • 标签: 转基因植物 知识产权 法律保护
  • 简介:研究广西野生金线莲材料,对植株形态授粉特性进行了观测,研究了蒴果成熟度、培养基无机盐浓度、植物生长调节剂及有机添加物对无菌播种萌发影响。结果表明:广西金线莲植株外形优美,人工授粉结实率达到84.8%;蒴果成熟度对灭菌消毒种子萌发有显著影响,授粉后生长75~90d蒴果最佳外植体材料;相较于MS1/4MS,1/2MS培养基上种子萌发最快;培养基细胞分裂素6-BA、ZTKT对种子萌发作用不明显,生长素NAA0.3mg/L时对种子萌发有明显促进作用;添加香蕉汁对种子萌发及之后生长具有显著促进效果。

  • 标签: 广西金线莲 种源特性 无菌播种 萌发
  • 简介:探索菜用甘薯抗寒机理,‘宁菜3号’、‘CH-2’、‘福薯18’、‘福薯10号’4个菜用甘薯品种试验材料,采用温室越冬人工气候室模拟低温胁迫方法,对菜用甘薯抗寒性与POD、SOD活性及可溶性蛋白质含量间关系进行了研究。结果表明:受低温胁迫后,‘宁菜3号’、‘CH-2’POD活性增加速度快、活性强、酶活力持久,SOD活性高,SOD活性及可溶性蛋白质含量下降幅度相对较小。在低温胁迫后,POD、SOD活性变化及可溶性蛋白质含量不同可能引起菜用甘薯抗寒性差异原因之一。研究对菜用甘薯栽培品种选择具有一定指导意义,进一步探索菜用甘薯抗寒机理提供参考。

  • 标签: 菜用甘薯 越冬存活率 低温胁迫 POD活性 SOD活性
  • 简介:基因组印迹指基因依其亲代来源不同,等位基因呈现出差异表达一种表观遗传现象。印迹在哺乳动物显花植物胚胎或胚及胚胎营养组织(胎盘或胚乳)中都有发现,并有独立趋同进化倾向,而在植物中发现印迹绝大多数只存在于胚乳中。就表观遗传机制而言,目前发现印迹表达主要是受到DNA甲基化、PcG蛋白家族介导组蛋白修饰ncRNAs共同作用影响。植物印迹基因全基因组分析揭示出许多印迹基因定位在转座子重复序列附近,暗示转座子重复序列插入与印迹位点演化存在相关性。

  • 标签: 基因组印迹 表观遗传调控 DNA甲基化 PCG蛋白 SIRNA
  • 简介:影响因子(hnpactfactor),指某期刊前两年发表论文在统计当年被引用总次数除以该期刊在前两年内发表论文总数。这是一个国际上通行传统期刊评价指标,尽管影响因子一个相对统计值,但其意义在于可克服期刊由于历史长短、载文量多少带来偏差。一般说来,影响因子越大,期刊整体学术影响力也越大。

  • 标签: 科技期刊 影响因子 分子植物育种 学术影响力 评价指标 统计值