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  • 简介:目的:探讨miRNA-1246miR-1246)促进食管癌细胞转移的作用及其机制。方法:Realtime-PCR法检测miR-1246在癌旁组织、食管癌组织、正常食管上皮和食管癌细胞系中的表达差异。Transwell侵袭实验观察转染miR-1246mimics或inhibitors对食管癌细胞EC109转移能力的影响;裸鼠尾静脉转移实验观察稳定表达miR-1246对食管癌转移能力的影响;生物信息学分析miR-1246的候选靶基因为GSK3β,荧光素酶报告基因实验检测过表达miR-1246后EC109细胞中野生型和突变型GSK3β的荧光素酶活性。Westernblot检测miR-1246对GSK3β蛋白表达的影响。结果:食管癌组织中的miR-1246表达显著高于癌旁组织(P〈0.05);多个食管癌细胞中miR-1246的表达比正常食管上皮细胞Het-1A明显增高(P〈0.05)。与阴性对照相比,miR-1246mimics显著促进EC109细胞的侵袭能力(P〈0.05)。反之,miR-1246inhibitors明显抑制EC109细胞的侵袭能力(P〈0.05);体内实验发现稳定过表达miR-1246明显升高EC109细胞的肺转移能力。荧光素酶报告基因结果证实miR-1246能够抑制GSK3β的3'-UTR区荧光素酶活性;转染miR-1246后,EC109细胞中的GSK3β蛋白水平明显低于对照组;miR-1246过表达显著抑制GSK3β-wt,而不能抑制GSK3β-mut的蛋白表达。结论:miR-1246能够通过靶向GSK3β促进食管癌转移,抑制miR-1246的表达或增加GSK3β的表达可能是抑制食管癌转移的有效手段。

  • 标签: 食管癌 转移 微小RNA miR-1246 GSK3Β
  • 简介:摘要目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织miR系列基因表达水平与手术疗效的相关性。方法分别收集2013年10月至2017年4月的同时收集25例NSCLC手术患者的癌组织和癌旁组织冰冻样本,以及手术前和手术后2周的血清样本。组织totalRNA抽提使用ThemirVanamiRNAIsolationKit(Ambion,Austin,Texas,USA)。血清的totalRNA使用microRNAsIsolationKit(AppliedBiosystems,ForsterCity,CA,USA)抽提。totalRNA溶于DEPC处理水中,零下80度保存。RNA浓度使用Nanodrop2100(NanoDrop,Wilmington,DE)测量。采用qRT-PCR方法检测NSLCLC患者手术前、后血清miR系列基因表达水平,判断血清miR系列基因表达水平与手术效果的关系。结果NSLCLC患者的组织中miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与癌旁组织存在显著差异(P<0.01)。NSLCLC患者手术后的血清miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与手术前存在明显差异(P<0.05)。结论miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达水平在NSCLC患者癌组织内明显升高,手术切除后血清基因表达明显下降。血清miR系列基因有可能成为预测NSCLC手术预后的分子标志物。

  • 标签: 非小细胞肺癌 miR系列基因 手术 预后
  • 简介:目的分析介入治疗布加综合征的方法与安全性.方法采用回顾性横断面研究方法.收集1993年10月至2015年2月首都医科大学附属北京世纪坛医院收治的1246例布加综合征介入治疗患者的临床病理资料.根据布加综合征的分型、程度和患者的临床症状,分别施行经皮穿刺腔静脉或肝静脉球囊成形术,下腔静脉、肝静脉或侧支血管支架成形术,腔静脉和肝静脉联合支架成形术,肝静脉成形联合经皮肝穿刺胃冠状静脉栓塞术,经颈静脉肝内门体分流(TIPS)联合下腔静脉(或肝静脉)支架成形术,TIPS.观察指标:(1)手术治疗结果.(2)手术并发症.(3)手术前后血管压力变化.符合正态分布的计量资料以-x±s表示,重复测量数据采用重复测量方差分析.结果(1)手术治疗结果:1246例布加综合征患者中,1241例成功行介入治疗,其中经皮穿刺下腔静脉或肝静脉单球囊成形术163例、双球囊成形术61例,下腔静脉或肝静脉(或侧支血管)支架成形术611例,下腔静脉和肝静脉联合支架成形术85例,肝静脉成形联合经皮肝穿刺胃冠状静脉栓塞术13例,TIPS联合下腔静脉支架成形术58例,TIPS和肝静脉联合支架成形术7例,TIPS243例.5例患者未成功行介入治疗,其中下腔静脉长段闭塞无法开通2例、肝静脉部分闭塞无法开通2例、肝静脉完全闭塞TIPS失败1例.(2)手术并发症:1例患者因经皮肝穿刺胸腔大出血,呼吸循环衰竭死亡.4例患者发生严重手术并发症,其中腹腔出血1例,下腔静脉支架部分移位至右心房内引起心包大量积液1例,肝静脉支架急性闭塞1例,穿透右心房、心包,引起心包积液1例,上述并发症均经对症治疗后好转、治愈.(3)手术前后血管压力变化:门静脉压力由术前的(3.8±0.7)kPa降至术后的(2.3±0.6)kPa,下腔静脉压力由术前的(2.9±0.4)kPa降至术后的(1.7零0.5)kPa,肝静脉压力由

  • 标签: 布加综合征 介入放射学
  • 简介:目的探讨MIR(微小RNA)-92a、MIR-100及MIR-143的表达水平对膀胱癌的诊断价值。方法收集我院2016年10月至2017年4月期间,50例临床及病理诊断为膀胱癌的患者血清及50例健康受试者的血清,通过应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的表达水平,并应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算MIR-92a、MIR-100及MIR-143的临界值,同时利用所得到的临界值单独或联合检测血清样本中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的相对表达水平,计算其灵敏度及特异度。结果膀胱癌患者血清样本中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的相对表达水平显著低于对照组,通过单独检测分析发现MIR-92a的灵敏度为96.0%,特异度为74.0%;MIR-100的灵敏度为86.0%,特异度为65.0%;MIR-143的灵敏度为74.0%,特异度为90.0%;MIR-100和MIR-92a组合的灵敏度为88.0%,特异度为82.0%;MIR-92a和MIR-143组合的灵敏度为92.0%,特异度为92.0%;MIR-143和MIR-100组合的灵敏度为86.0%,特异度为82.0%。结论膀胱癌患者血清中对MIR-92a和MIR-143组合联合检测有助于对诊断膀胱癌的诊断。

  • 标签: 膀胱癌 MIRNA 诊断 RT-QPCR
  • 简介:目的探讨卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的表达水平,分析3者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法收集本院确诊的65例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本(卵巢癌组),采用实时定量RT-PCR(qRTPCR)法检测miR-29c、miR-133b及miR-1水平,收集对应卵巢癌患者的临床病理参数(年龄、临床分期、分化程度、组织类型及淋巴结转移),同时选取32例正常卵巢上皮组织(正常组)和39例良性卵巢上皮囊肿组织(良性组)作对照,以正常组的各指标均数为界值,将卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平分为高水平组(〉正常组)和低水平组(≤正常组),比较miR-29c、miR-133b及miR-1不同表达水平与卵巢癌临床病理参数的关系,同时分析卵巢癌组织中3者水平的关系。结果卵巢癌组miR-29c水平高于正常组和良性组,而miR-133b和miR-1水平均低于正常组和良性组,差异有统计学意义(P〈0.05);卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平均与分化程度有关,miR-29c水平与临床分期及淋巴结转移有关,而miR-133b亦与淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(P〈0.05);卵巢癌miR-29c水平与miR-133b和miR-1均呈负相关(r=-0.541、-0.361),miR-133b与miR-1呈正相关(r=0.447),差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论卵巢癌患者组织中miR-29c呈高表达,miR-133b及miR-1呈低表达,与临床病理学特征有关,且在卵巢癌诊断中有一定的价值,可用于辅助卵巢癌的诊断和病情评估。

  • 标签: 卵巢癌 微小RNA MiR-29c MiR-133b MIR-1
  • 简介:摘要目的探究桥本甲状腺炎(HT)患者外周血miR-454、miR-146a水平及意义。方法选取2018年1月至2020年6月来芜湖市第一人民医院就诊的桥本甲状腺炎患者56例作为HT组,并根据甲状腺功能分成甲状腺功能正常(HT-A组)16例,亚临床甲状腺功能减退(HT-B组)19例,临床甲状腺功能减退(HT-C组)21例,同期选取体检健康者50名作为健康组,比较HT组与健康组的甲状腺功能[促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)]、及外周血miR-454、miR-146a表达水平,探究miR-454、miR-146a与HT病情的关系。结果HT-A组、HT-B组、HT-C组外周血miR-454及miR-146a表达水平均高于健康组,随HT患者甲状腺功能减退而升高(P均<0.05);miR-454与TSH、TgAb、TPOAb均呈正相关,与FT3、FT4呈负相关(P<0.05);miR-146a与TSH、TgAb、TPOAb均呈正相关,与FT3、FT4呈负相关(P均<0.05)。结论HT患者外周血中miR-146a及miR-454水平均较健康人高,miR-146a及miR-454可能与甲状腺功能减退相关。

  • 标签: 桥本甲状腺炎 miR-454 miR-146a
  • 简介:摘要目的检测肾移植受者术后血浆外泌体miR-21、miR-210和miR-4639表达变化,分析外泌体miR-21、miR-210和miR-4639单独及联合对肾移植术后并发慢性移植肾肾病(CAN)的诊断价值。方法回顾性分析2018年1月至2019年1月苏州大学附属第三医院泌尿外科实施的同种异体肾移植受者临床资料,最终纳入34例受者,根据肾移植术后是否发生CAN将其分为CAN组及对照组。采用凝胶排阻色谱法提取血浆外泌体,采用Nanosight NS300分析外泌体粒径,采用蛋白质印迹法(WB)分析外泌体表面标志物(CD63和Alix)表达情况。采用卡方检验比较CAN组和对照组受者性别比例。采用成组t检验比较两组受者移植前年龄、末次血清肌酐、血清尿素氮和估算肾小球滤过率(eGFR)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆外泌体miR-210、miR-21和miR-4639对肾移植术后并发CAN的诊断效能。P<0.05为差异有统计学意义。结果CAN组(n=18例)和对照组(n=16例)受者性别以及移植前年龄、末次血清肌酐、血清尿素氮和eGFR差异均无统计学意义(χ2=0.04、t=0.86、-1.84、-1.83和0.85,P均>0.05)。透射电镜、Nanosight NS300及WB检测结果均提示提取样本为血浆外泌体。CAN组与对照组血浆外泌体miR-210、miR-21和miR-4639相对表达量差异均有统计学意义(t=4.13、3.38和2.33,P均<0.05)。miR-210预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.854(95%CI:0.730~0.979,P<0.05),当截断值=1.320时,敏感度为66.7%,特异度为93.8%。miR-21预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.774(95%CI:0.618~0.931,P<0.05),当截断值=1.243时,敏感度为55.6%,特异度为93.8%。miR-4639预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.670(95%CI:0.482~0.859,P<0.05),当截断值=0.936,敏感度为66.7%,特异度为75.0%。随后,构建基于miR-210、miR-21和miR-4639 3个指标的联合诊断模型,回归方程z=5.293×[miR-210]+5.046×[miR-21]+0.433×[miR-4639]-13.373,联合预测概率值p=ez/(1+ez)。miR-210、miR-21和miR-4639联合预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.938(95%CI:0.860~1.015,P<0.05),当截断值=0.587,敏感度为83.33%,特异度为93.75%。当联合预测值为0.587时,CAN组有83.3%(15/18)的个体被联合预测模型诊断出阳性结果,而对照组有93.8%(15/16)的个体被联合预测模型诊断出阴性结果,表明该联合预测模型有较好的诊断价值。结论miR-210、miR-21和miR-4639组成的miRNA阵列可能可以用于早期诊断肾移植术后并发CAN。

  • 标签: 慢性移植肾肾病 外泌体 微小RNA 联合诊断 肾移植
  • 简介:摘要目的探讨吉非替尼敏感与耐药非小细胞肺癌(NSCLC)患者miR-200c、miR-19a、miR-155表达差异,并分析miR-200c、miR-19a、miR-155表达差异对患者预后的影响。方法选取2015年8月1日至2019年8月1日南京医科大学第四附属医院采用吉非替尼治疗的80例Ⅲ~Ⅳ期NSCLC患者作为研究对象,其中吉非替尼敏感患者36例,作为敏感组,吉非替尼耐药患者44例,作为耐药组。比较两组患者一般资料、血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平,探究NSCLC患者吉非替尼敏感影响因素及血清miR-200c、miR-19a、miR-155与NSCLC患者临床病理特征的相关性。分析患者生存情况。结果与耐药组比较,敏感组患者吸烟例数较少(χ2=5.541,P=0.019)、临床分期Ⅲ期例数较多(χ2=8.984,P=0.003)、分化程度高分化例数较多(χ2=8.673,P=0.003)、淋巴结转移例数较少(χ2=6.082,P=0.014)、血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平均较高(t=7.249,P<0.001;t=8.222,P<0.001;t=10.467,P<0.001)。多因素logistic回归分析显示,吸烟(OR=0.355,95%CI为0.149~0.845,P<0.001)、临床分期(OR=0.494,95%CI为0.274~0.892,P=0.021)、分化程度(OR=6.062,95%CI为3.258~11.279,P=0.013)、淋巴结转移(OR=0.422,95%CI为0.245~0.726,P=0.019)、血清miR-200c(OR=5.521,95%CI为3.126~9.752,P<0.001)、miR-19a(OR=5.384,95%CI为2.947~9.836,P<0.001)、miR-155(OR=5.325,95%CI为3.058~9.274,P<0.001)水平均为NSCLC患者吉非替尼敏感的影响因素。血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平与NSCLC患者临床分期(t=3.230,P=0.002,r=-0.578;t=3.188,P=0.002,r=-0.612;t=3.123,P=0.003,r=-0.594)、分化程度(t=2.586,P=0.012,r=0.610;t=4.009,P<0.001,r=0.632;t=4.773,P<0.001,r=0.594)、淋巴结转移(t=2.902,P=0.005,r=-0.587;t=3.721,P<0.001,r=-0.629;t=3.391,P=0.001,r=-0.614)均显著相关。与miR-200c、miR-19a、miR-155低水平患者比较,miR-200c(63.19% vs. 4.37%,χ2=32.562,P<0.001)、miR-19a(61.01% vs. 4.75%,χ2=37.807,P<0.001)以及miR-155(57.82% vs. 0,χ2=44.454,P<0.001)高水平患者1年生存率均较高,差异均有统计学意义。结论血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平在吉非替尼敏感NSCLC患者中明显升高,是吉非替尼敏感的重要影响因素,且与NSCLC患者临床分期、分化程度、淋巴结转移密切相关,血清高水平患者预后较好。

  • 标签: 癌,非小细胞肺 微RNAs 吉非替尼 敏感 耐药
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA-214(miR-214)和miR-181c在胃癌组织中的表达水平及对预后的影响。方法选取2014年1月至2015年1月于川北医学院附属医院收治的68例胃癌患者为研究对象,均接受手术治疗,出院后随访1~60个月。利用实时荧光定量PCR技术检测患者癌组织和癌旁组织miR-214、miR-181c相对表达量;利用Kaplan-Meier曲线进行生存分析;Cox多因素回归分析影响胃癌患者预后的独立危险因素。结果胃癌组织中miR-214、miR-181c表达水平均明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。根据miR-214、miR-181c表达均值将患者分为高表达组和低表达组,miR-214、miR-181c表达水平与年龄、性别、淋巴结是否转移无关,与TNM分期、肿瘤分化程度有关(P<0.05)。患者总生存率为44.12%,miR-214低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.71%、57.69%,两组间比较差异有统计学意义(P=0.035);miR-181c低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.55%、60.87%,差异有统计学意义(P=0.024)。Cox多因素回归分析结果显示,TNM分期高(HR=1.569,95% CI:1.029~2.391,P=0.036)、miR-214低表达(HR=1.643,95% CI:1.294~2.087,P<0.001)及miR-181c低表达(HR=1.327,95% CI:1.045~1.685,P=0.021)是影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论miR-214、miR-181c在胃癌组织中表达显著下调,与胃癌患者临床病理参数及不良预后有关,参与胃癌的发生发展过程。

  • 标签: 微小RNA-214 微小RNA-181c 胃肿瘤 生存曲线 预后
  • 简介:摘要本文通过总结分析认为,颅脑CT扫描检查可以提供及时、准确的诊断结果,在脑血管意外及颅脑损伤的诊断中极为重要。

  • 标签: 脑血管意外 颅脑损伤 CT诊断 结果分析
  • 简介:摘要目的研究老年宫颈癌组织中微小RNA(micro RNA,miR)-424、miR-19a及miR-95的表达及各指标与放疗敏感性的相关性。方法应用荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测82例老年宫颈癌组织及癌旁正常组织中miR-424、miR-19a、miR-95的表达。统计学分析组间miR-424、miR-19a、miR-95的表达差异及与临床病理特征的关系,分析放疗前后各指标表达变化与放疗敏感性的相关性。结果与癌旁组织相比,宫颈癌组织中miR-19a表达明显较高,而miR-424、miR-95的表达明显较低(均P<0.05)。癌组织miR-424、miR-19a及miR-95表达与肿瘤FIGO分期、肿瘤分化有关(均P<0.05)。与放疗前相比,放疗后癌组织miR-19a表达降低,而miR-424、miR-95升高(均P<0.05)。放疗前后癌组织中miR-424、miR-19a及miR-95表达变化与放疗前后肿瘤体积变化呈显著正相关(r=0.625、0.578、0.611,均P<0.001)。放疗有效组患者放疗后癌组织中miR-19a水平较放疗前显著降低,而miR-424、miR-95显著升高(均P<0.05),而放疗无效组患者放疗前后miR-424、miR-19a及miR-95表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论老年宫颈癌患者癌组织中miR-19a表达升高,而miR-424、miR-95的表达降低,并且三者放疗前后水平变化与放疗敏感性有关,有望成为新的肿瘤标志物。

  • 标签: 宫颈癌 miR-424 miR-19a miR-95 放疗敏感性
  • 简介:摘要目的通过采集肿瘤患者放疗前后外周血,探讨照射对人外周血血清miR-150-5p、miR-23a-3p表达的影响,以期为寻找辐射生物标志物提供科学依据。方法以2021年10月至2022年3月63例行放疗的肿瘤患者为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法,检测患者放疗前后外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达水平。比较两种miRNAs放疗前后在患者外周血血清中的差异表达变化,分析其与肿瘤类型等因素的关系。结果放疗后,患者外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达量明显低于放疗前(t=4.97,Z=-2.77,P<0.05)。不同的肿瘤类型中,乳腺癌、食管癌和其他消化道肿瘤患者放疗后miR-150-5p的相对表达量降低(t=3.47、2.47、2.87,P<0.05),消化道肿瘤患者放疗后miR-23a-3p相对表达量下降(Z=-1.99,P<0.05)。在放疗前、后miR-150-5p的表达改变均不受性别、年龄、化疗和肿瘤类型等因素影响(P>0.05),而miR-23a-3p的表达改变在放疗后受性别、年龄和化疗等因素影响(t=2.04、-3.34、-2.29,P<0.05)。结论放疗可影响肿瘤患者血清中miR-150-5p的表达,其有作为辐射生物学标志物的潜力。

  • 标签: 放疗 血清 miR-150-5p miR-23a-3p 生物标志物
  • 简介:背景:早期诊断肝硬化并予早期干预可阻止病情进展,避免或延缓肝硬化失代偿发生。筛选血清学无创标记物是肝硬化临床诊断和评估研究的重要内容。目的:评价血清miR-192和miR-29a在肝硬化无创诊断中的应用价值。方法:通过文献检索和real-timePCR筛选验证发现在肝硬化患者血清中差异表达明显的miRNAs——miR-192和miR-29a,以real-timePCR检测两者在120例肝硬化患者和76名健康对照者血清中的表达水平;二元logistic回归建立两者联合检测诊断肝硬化的数学模型,ROC曲线评估诊断效能。结果:肝硬化组血清miR-192表达水平显著高于对照组,血清miR-29a表达水平则显著低于对照组(P<0.001)。由两者联合检测数学模型计算得到的风险评分诊断肝硬化的价值明显优于单一指标检测[ROC曲线下面积(AUC):0.968对0.887和0.933],且优于临床常用肝硬化血清学无创诊断指标APRI、FIB-4和ARR(AUC:0.796、0.793和0.571)。血清miR-192、miR-29a表达水平以及两者联合检测的风险评分与肝硬化Child-Pugh分级显著相关(P<0.05)。结论:miR-192、miR-29a以及两者联合检测的风险评分可作为肝硬化无创诊断和评估新的血清分子标记物。

  • 标签: 血清 生物学标记 肝硬化 无创诊断 miR-192 miR-29a
  • 简介:摘要目的探讨结直肠癌患者术前血清miR-20a、miR-17水平在术后不良临床结局评估中的价值。方法选择2013年8月至2016年2月华中科技大学同济医学院附属协和医院就诊的结直肠癌患者73例作为病例组,收集患者术前以及术后1周、1个月、3个月时的血清标本,另收集81名同期体检健康对照组的血清标本,采用实时荧光定量PCR法检测两组血清miR-20a、miR-17表达水平。根据表达平均数分为高表达组与低表达组,采用Kaplan-Meier法对两组进行生存分析;Cox比例风险回归模型筛选不良预后的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-20a、miR-17水平对结直肠癌不良预后的诊断效能。结果病例组患者术后血清miR-20a、miR-17水平呈下降趋势(P<0.05),且各检测点水平均高于对照组(P<0.05)。分化程度(HR=1.462,95% CI:1.096~1.951)、TNM分期(HR=1.642,95% CI:1.339~2.014)、术前血清miR-20a(HR=1.575,95% CI:2.035~3.652)、miR-17水平(HR=2.491,95% CI:2.131~2.914)是影响结直肠癌患者不良预后的独立危险因素(均P<0.001)。术前血清miR-20a、miR-17高表达者的3年总生存率更低(22.0% vs 78.3%,21.3% vs 73.1%,P<0.05);两者联合检测预测结直肠癌患者预后不良的曲线下面积为0.955,敏感度为97.6%,特异度为91.2%。结论结肠癌患者术前血清miR-20a、miR-17高表达与患者不良预后有关,术前检测有助于改善不良预后高风险患者的临床结局。

  • 标签: 结直肠肿瘤 微RNAs 预后 miR-20a miR-17
  • 简介:摘要目的探讨老年帕金森病(Parkinson disease,PD)患者血清微小RNA-124(miR-124)、微小RNA-494(miR-494)表达水平及其临床意义。方法选取2018年3月~2020年4月在郑州大学附属郑州中心医院住院治疗的90例PD患者(PD组);同期选择在医院体检中心检查且与PD患者年龄、性别相匹配的100名非PD老年人作对照组。所有研究对象空腹12 h后取清晨静脉血4 ml,采用帕金森等级量表(unified Parkinson disease rating scale,UPDRS)对所有PD组患者从精神状态、行为和情感、生活质量、运动检查进行评分,利用帕金森病Hoehn-Yahr分级量表对PD患者进行分级;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清miR-124和miR-494表达水平;作ROC曲线判断miR-124、miR-494对PD患者的诊断价值。结果UPDRS评分≤60分的PD患者Hoehn-Yahr分级明显低于UPDRS>60分的患者[(2.47±0.43)分,(3.42±0.47)分],差异有统计学意义(t=9.055,P<0.001),但血清miR-124、miR-494表达水平差异无统计学意义[miR-124:(0.72±0.14),(0.70±0.12);miR-494:(1.17±0.19),(1.18±0.22)](t=0.633,0.230,P=0.529,0.819);与对照组相比,PD组血清miR-124表达下调[(0.71±0.20),(1.05±0.24)],miR-494表达上调[(1.18±0.26),(0.96±0.22)](t=10.542,6.315,均P<0.001);ROC曲线结果显示,血清miR-124、miR-494诊断PD的曲线下面积(AUC)分别为0.847,0.760,截断值分别为0.901,1.126,灵敏度分别为86.67%、61.11%,特异度分别为75.03%、79.00%;二者联合诊断PD的AUC为0.898,灵敏度和特异度分别为85.56%、85.00%。结论PD患者血清miR-124呈低表达,miR-494呈高表达,提示二者的水平变化可能与PD的发生、发展有关。二者均对PD有一定的诊断价值,且联合诊断价值更高。

  • 标签: 帕金森病 老年人 微小RNA-124 微小RNA-494 诊断价值
  • 简介:摘要目的探究老年脑卒中抑郁患者血清中微RNA-26b(miR-26b)、微RNA-1(miR-1)表达情况及其与患者预后的关系。方法选取2017年3月至2018年2月在湖北省中医院进行治疗的148例老年脑卒中患者,根据入院后HAMD评分分为单纯脑卒中组(60例,HAMD评分<7分)和脑卒中抑郁组(88例,HAMD评分≥7分)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法对所有受试者血清中miR-26b、miR-1水平进行检测,分析miR-26b、miR-1表达与患者临床参数的关系;分析miR-26b、miR-1表达与患者预后的关系;采用logistic回归分析影响脑卒中患者抑郁预后影响因素。结果脑卒中抑郁组患者血清中miR-26b表达显著低于单纯脑卒中组,miR-1表达显著高于单纯脑卒中组(P<0.05)。miR-26b低表达者及miR-1高表达者HAMD评分显著高于miR-26b高表达者、miR-1低表达者(P<0.05)。Pearson分析显示,miR-26b与HAMD评分呈负相关(r=-0.364,P<0.01),miR-1与HAMD评分呈正相关(r=0.392,P<0.01)。不同预后的脑卒中抑郁患者中,痊愈组HAMD评分、miR-1表达显著低于未痊愈组,miR-26b表达显著高于未痊愈组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示HAMD评分、miR-1是影响脑卒中抑郁患者发生不良预后的危险因素,miR-26b是影响脑卒中抑郁患者发生不良预后的保护因素。结论老年脑卒中抑郁患者血清miR-1水平升高,miR-26b水平降低,两者与患者预后有关,均是脑卒中抑郁患者发生不良预后的影响因素。

  • 标签: 卒中 抑郁症 老年人 微RNAs 预后
  • 简介:摘要目的研究长链非编码RNA GAS5(long non-coding RNA GAS5,GAS5)靶向调控miR-29、miR-96和miR-208促进胰岛β细胞分泌胰岛素的作用及其机制。方法采用Q-PCR法检测122名健康人血清和88例2型糖尿病(T2DM)患者血清以及大鼠胰岛细胞瘤株INS-1832/13中,长链非编码RNA GAS5与miR-29、miR-96和miR-208的表达水平及其相关性。通过慢病毒载体构建,沉默和过表达GAS5观察对胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响。采用生物信息学预测GAS5与miR-29、miR-96和miR-208有互补结合位点,用荧光素酶报告系统验证其靶向关系。在胰岛β细胞中共转染GAS5 shRNA,用上述方法检测其对胰岛素受体(insulin receptor, INSR)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate-1, IRS-1)和磷酸肌醇3-激酶(phosphatidylinositide 3-kinase, PI3K)水平的影响,从而揭示GAS5刺激胰岛β细胞分泌胰岛素的作用机制。结果与健康人血清相比,2型糖尿病患者血清中GAS5的表达低于健康对照组(t=4.632, P<0.01),miR-29、miR-96和miR-208高于健康对照组(t分别为7.832、9.164、12.359,均P<0.01),而且GAS5水平与miR-29、miR-96和miR-208呈负相关(r分别为-0.50、-0.47、-0.70)。慢病毒过表达GAS5导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加,胰岛素含量增加。相反,GAS5的下调导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛素含量显著降低。利用生物信息学工具,筛选了miR-29、miR-96和miR-208作为GAS5的靶点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证GAS5可以通过靶向抑制miR-96、miR-29和miR-208的表达发挥作用。shGAS5显著降低INSR、IRS-1和PI3K的表达(P分别为0.022、0.038、0.009),而过表达GAS5在mRNA和蛋白水平上均显著上调INSR、IRS-1和PI3K的表达(P分别为0.024、0.045、0.016)。结论GAS5可能通过靶向调控miR-29、miR-96和miR-208的表达,进而对这些miRNA可能存在的负调控因子INSR、IRS-1和PI3K等的表达进行正向调控,刺激胰岛β细胞分泌胰岛素。

  • 标签: 糖尿病,2型 长链非编码RNA GAS5 胰岛素分泌 基因治疗