简介：摘要目的前列腺特异膜抗原(PSMA)适配体Apt-A10-3.2可作为前列腺癌早期诊断和靶向治疗的特异性配体。鼠双微体(MDM2)与前列腺癌恶性程度密切相关，且MDM2小干扰RNA(siRNA)可通过RNA干扰机制靶向沉默MDM2目的基因。设计合成PSMA Apt-MDM2 siRNA新型嵌合体，与多西他赛(DTX)联合以探讨PSMA阳性前列腺癌的靶向治疗及99Tcm标记嵌合体显像监测相结合的诊疗新模式。方法PSMA Apt-A10-3.2与MDM2 siRNA通过共价偶联合成嵌合体Apt-siRNA，在PSMA表达阳性的前列腺癌细胞株(22RV1及LNCaP)中，采用Apt-siRNA单独或联合DTX对细胞株进行处理，通过Western blot检测MDM2及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及其相关X蛋白(Bax)、聚ADP核糖聚合酶(PARP)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)]表达水平，评价治疗效果。取22RV1荷瘤裸鼠15只，分别予PBS、DTX+Apt(200 pmol)和DTX+Apt(400 pmol)处理，观察肿瘤体积与MDM2水平；行99Tcm-Apt-siRNA SPECT显像，获得肿瘤/肌肉放射性计数(T/M)比值。采用单因素方差分析和Tukey多重检验、线性回归分析等分析数据。结果在22RV1及LNCaP细胞株中，Apt-siRNA明显降低MDM2表达(0.25±0.02，F＝183.40，P<0.001；0.56±0.03，F＝37.15，P<0.001)；Apt-siRNA联合DTX治疗前列腺癌后，Bcl-2表达水平明显降低，Bax、PARP、caspase-3表达水平明显升高。在22RV1荷瘤裸鼠中，Apt-siRNA联合DTX明显抑制肿瘤MDM2蛋白表达(400 pmol：0.59±0.12；F＝49.99，P＝0.023)及肿瘤体积[400 pmol：(0.22±0.07) cm3；F＝71.30，P＝0.039]；SPECT显像示，治疗后T/M比值明显降低(400 pmol：2.07±0.22；F＝34.99，P＝0.022)，与MDM2表达水平有线性回归关系(R2＝0.875，P<0.001)。结论Apt-siRNA联合DTX能有效抑制前列腺癌进展，并通过偶联99Tcm实现PSMA阳性前列腺癌可视化靶向诊疗。

简介：摘要小干扰RNA（siRNA）具有沉默互补的目标信使RNA（mRNA）从而抑制疾病相关基因表达的作用。因其高效性及特异性，siRNA具有作为基因药物的巨大潜力，但其在体内易受到血管屏障、内涵体及RNA酶等因素的影响，从而难以发挥药效。因此，设计高效的能够负载siRNA的纳米载体以使其富集至靶标是目前siRNA药物研发的重要任务，高分子聚合物纳米载体是目前研究热点之一。本文就高分子聚合物纳米载体实现siRNA药物递送的研究进展进行综述。

简介：摘要目的观察小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）干扰囊泡膜核苷酸转运体（vesicular nucleotide transporter，VNUT）基因对大鼠胰腺β细胞（INS-1）胰岛素分泌的影响。方法2021年1月至6月通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白印迹和酶联免疫吸附剂测定（ELISA）等方法检测siRNA对VNUT基因表达的作用以及对胰岛素分泌的影响。采用独立样本t检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果siRNA转染INS-1细胞24 h后，VNUT基因表达明显下降，对照组和干扰组RNA表达结果分别为（0.452±0.218）和（0.319±0.116），蛋白分别为（0.514±0.297）和（0.369±0.203），差异均有统计学意义（均P<0.05）；胰岛素分泌明显抑制，对照组和干扰组结果为（281.45±24.92）ng/L和（176.54±15.70）ng/L，差异有统计学意义（P<0.05）。结论siRNA明显抑制VNUT基因表达与INS-1胰岛素分泌，深入研究VNUT基因对胰岛素分泌的影响可为2型糖尿病发病机制因素提供参考资料。

简介：摘要目的利用腺病毒包装质粒pBHGE3与携带LASP-1 siRNA的穿梭质粒pZD55-LASP-1、pCA13-LASP-1在HEK293细胞内，包装成病毒ZD55-LASP-1和Ad-LASP-1。方法利用Effectene DNA转染试剂将质粒pBHGE3与质粒pZD55-LASP-1、pCA13-LASP-1分别感染HEK293细胞，纯化并扩增病毒。通过PCR鉴定Ad-LASP-1、ZD55-LASP-1是否包含目的基因，E1区是否缺失及有无野生型腺病毒污染。鉴定正确的病毒进行扩增，CsCl梯度离心纯化，TCID50法测病毒滴度。结果PCR鉴定证明ZD55-LASP-1未混杂野生型腺病毒,且包含目的序列LASP-1 siRNA；Ad-LASP-1 E1区缺失,且包含目的序列LASP-1 siRNA。ZD55-LASP-1滴度为4×1010 PFU/ml，Ad-LASP-1滴度为2×1010PFU/ml。Western-blot证实ZD55-LASP-1在肿瘤细胞中表达E1A，Ad-LASP-1不表达E1A。结论靶向表达LASP-1 siRNA序列的病毒ZD55-LASP-1重组成功，为肾癌的下一步基因治疗提供了基础。

简介：摘要目的研究以小干扰RNA(siRNA)阻断Notch1、Notch2、Notch3和Notch4各亚型对支气管哮喘(哮喘)模型小鼠肺T细胞分化的影响，比较Notch各亚型在肺T细胞分化中的不同作用，探讨Notch信号通路与哮喘发病的关系。方法本研究为实验研究。制作哮喘小鼠模型，从肺组织中分离T细胞。在培养过程中分别采用特异siRNA片段阻断Notch1、Notch2、Notch3和Notch4，经小鼠CD3和CD28单克隆抗体活化T细胞，采用逆转录-聚合酶链反应方法检测活化肺T细胞的Notch1、Notch2、Notch3和Notch4的mRNA及Notch下游基因多毛和分裂增强子1 mRNA的表达，酶联免疫吸附试验法检测细胞培养上清中白细胞介素4(IL-4)、IL-5及干扰素γ(IFN-γ)水平。结果各特异性siRNA分别成功阻断了Notch1、Notch2、Notch3和Notch4。Notch1和Notch2被阻断后活化肺T细胞产生了同向效应，培养上清中IL-4、IL-5的量较对照组降低(P值均<0.05)，而IFN-γ的表达较对照组升高(P<0.05)；Notch3和Notch4被阻断后IL-4、IL-5及IFN-γ的量较对照组差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论不同的Notch亚型在哮喘的发病中有不同的作用，Notch1和Notch2可能起主要促进作用，siRNA阻断Notch1和Notch2可能成为哮喘基因治疗的新通路。

简介：摘要目的观察整合素连接激酶-小干扰RNA-特异性腺相关病毒(ILK-siRNA-AAV)对大鼠青光眼滤过术后滤过通道瘢痕形成的抑制作用。方法选取SPF级8~9周龄SD大鼠48只，采用随机数表法将其分为空白对照组、ILK-siRNA-AAV组、NC-siRNA-AAV组和丝裂霉素C(MMC)组，每组12只。每只大鼠均取左眼为实验眼，右眼不做特殊处理。采用前房植入引流管法建立大鼠青光眼滤过术球结膜滤过泡模型，空白对照组、ILK-siRNA-AAV组和NC-siRNA-AAV组术后1 d滤过泡内分别注入磷酸盐缓冲液、ILK-siRNA-AAV和NC-siRNA-AAV各5 μl，MMC组术中采用含0.4 mg/ml MMC的小棉片置于结膜瓣下5 min。术前及术后1、2、3、7、14、21、28 d，采用手持式眼压计测量术眼眼压；术后1、2、3、7、14、21、28 d，采用手术显微镜观察术眼滤过泡形成情况，采用Kaplan-Meier生存分析计算滤过泡生存天数；术后28 d，采用逆转录PCR及Western blot法检测术区结膜及结膜下组织中ILK的mRNA及蛋白表达，检测ILK基因沉默效应；采用苏木精-伊红染色观察ILK基因沉默对滤过通道组织形态的影响；采用Masson染色观察ILK基因沉默对球结膜滤过泡术区组织胶原纤维沉积作用，计算胶原纤维染色阳性面积占整个组织视野面积的百分比。结果各组大鼠手术前后不同时间点眼压总体比较，差异均有统计学意义(F分组＝76.84，P<0.001；F时间＝114.49，P<0.001)，其中ILK-siRNA-AAV组术后第1、7、14和28天眼压均低于空白对照组，MMC组术后第2、3、7、14和28天眼压均低于空白对照组，ILK-siRNA-AAV组术后第7、14、21和28天眼压均低于NC-siRNA-AAV组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示，空白对照组、NC-siRNA-AAV组、ILK-siRNA-AAV组和MMC组滤过泡生存天数分别为(3.50±1.51)、(5.00±3.41)、(31.50±3.15)和(31.33±2.46)d，总体比较差异有统计学意义(F＝395.83，P<0.05)，其中ILK-siRNA-AAV组和MMC组滤过泡生存天数均多于空白对照组和NC-siRNA-AAV组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组ILK mRNA及蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F＝222.32、752.69，均P<0.05)，其中ILK-siRNA-AAV组ILK mRNA及蛋白相对表达量明显低于空白对照组和NC-siRNA-AAV组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。苏木精-伊红染色结果显示，空白对照组和NC-siRNA-AAV组术区纤维结缔组织增生，细胞大量增生，成纤维细胞密度高，呈团块状生长；ILK-siRNA-AAV组球结膜较薄，纤维结缔组织排列疏松，少量成纤维细胞增生；MMC组结膜纤维层疏松、菲薄，形成空洞，细胞稀少。各组胶原纤维染色阳性面积百分比总体比较差异有统计学意义(F＝741.66，P<0.05)，其中与空白对照组比较，ILK-siRNA-AAV组和MMC组阳性染色百分比显著降低，ILK-siRNA-AAV组阳性染色百分比明显低于NC-siRNA-AAV组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ILK-siRNA-AAV沉默ILK表达可抑制大鼠滤过术后滤过区组织瘢痕形成，降低眼压。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)对人晶状体上皮细胞(LECs)凋亡的影响及其机制。方法收集2018年12月至2019年8月在新乡市第一人民医院行白内障手术的23例年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜组织，同时收集20例正常供体眼晶状体前囊膜组织。采用实时荧光定量PCR法检测并比较不同人群晶状体前囊膜组织中KCNQ1OT1和miR-199a-5p mRNA表达水平。体外培养人LECs(SRA01/04)，将细胞分为空白对照组、模型对照组、小干扰RNA-阴性对照(siR-NC)组、siR-KCNQ1OT1组、miR-NC组、miR-199a-5p组、siR-KCNQ1OT1+anti-miR-NC组和siR-KCNQ1OT1+anti-miR-199a-5p组，其中空白对照组不做任何处理，模型对照组采用100 μmol/L过氧化氢(H2O2)培养细胞24 h制作氧化应激损伤模型，其余各组分别采用相应转染试剂按照脂质体法转染6 h后换用100% μmol/L H2O2处理细胞24 h。采用实时荧光定量PCR法检测各组晶状体前囊膜组织和各组LECs细胞中KCNQ1OT1和miR-199a-5p表达水平；采用MTT法检测各组细胞活力值；采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率；采用Western blot法检测各组B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达水平；采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量；采用双荧光素酶报告实验检测KCNQ1OT1和miR-199a-5p的关系。结果年龄相关性白内障患者前囊膜内KCNQ1OT1相对表达量为2.41±0.42，明显高于正常人的0.97±0.19，差异有统计学意义(t＝14.112，P<0.001)；miR-199a-5p相对表达量为0.36±0.12，明显低于正常人的1.04±0.15，差异有统计学意义(t＝16.507，P<0.001)。与空白对照组比较，模型对照组中KCNQ1OT1和bax蛋白相对表达量、细胞凋亡率、MDA含量明显增加，miR-199a-5p和bcl-2蛋白相对表达量、细胞活力值、SOD活性值明显降低，差异均有统计学意义(均P<0.001)；与siR-NC组比较，siR-KCNQ1OT1组细胞中KCNQ1OT1和bax蛋白相对表达量、细胞凋亡率、MDA含量降低，bcl-2蛋白相对表达量、细胞生存率、SOD活性值增加，差异均有统计学意义(均P<0.05)。与miR-NC组比较，miR-199a-5p组KCNQ1OT1-WT荧光素酶活性显著降低，差异有统计学意义(t＝21.131，P<0.001)；与miR-NC组相比，miR-199a-5p组miR-199a-5p和bcl-2蛋白相对表达量、细胞生存率、SOD活性值明显升高，bax蛋白相对表达量、细胞凋亡率、MDA含量显著降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。siR-KCNQ1OT1+anti-miR-199a-5p组miR-199a-5p和bcl-2蛋白相对表达量、细胞生存率、SOD活性值明显低于siR-KCNQ1OT1+anti-miR-NC组，细胞凋亡率、bax蛋白相对表达量和MDA含量显著高于siR-KCNQ1OT1+anti-miR-NC组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论抑制KCNQ1OT1能够增强人LECs活力，抑制H2O2诱导的细胞凋亡和氧化应激反应，其作用机制可能与上调miR-199a-5p有关。

简介：【摘要】目的：探讨siRNA 沉默HnRNP L基因对RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3细胞生物学行为的影响。方法：通过合成了靶向HnRNP L的特异性siRNA，并通过了Western Blot在蛋白水平上进行检测，并筛选出干扰效率最高的3号序列来干扰RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3 细胞中HnRNP L的表达，观察其对三种不同细胞生长、凋亡、体外侵袭能力及迁移能力的差异。结果：沉默HNRNPL后，CCK-8实验提示三种细胞的增值都明显降低，划痕实验结果提示：沉默HNRNPL后，RWPE-1细胞和PC3细胞的迁移力明显减弱。Transwell检测结果提示：沉默HNRNPL后，RWPE-1细胞、Lncap细胞和PC3细胞的侵袭能力明显减弱。结论：HnRNPL对前列腺癌的多种生物学行为有明显的影响，参与了前列腺癌的发生、发展的恶性进程，促进了前列腺癌的生长、侵袭和转移。

简介：摘要：自改革开放以来，我国社会和经济的发展越来越快，建筑行业的发展相较之前也有了巨大的进步。建筑的设计关系到人们的生活水平，所以对于建筑工程要进行科学的设计规划才能达到人们理想的生活状态。建筑作为人们居住和生存的主要场所，它的施工水准关系到人们的生活水平，建筑企业大力进行节能设计与动力设计对于企业的持续发展有着非常重要的现实意义。基于此，本文主要阐述了建筑节能设计意义及管理概述、建筑暖通设计存在的问题、加强建筑暖通设计中动力设计与节能设计的策略，希望能为今后我国建筑暖通行业的发展带来一定的帮助。

简介：摘要：随着我国城市化进程的日益加快，建筑能耗也会随之增加，严重违背了低碳经济的发展原则。鉴于上述情况，对建筑暖通设计中的动力节能设计进行研究具有很重要的现实意义。基于此，文章将择取动力设计与节能设计角度，针对其建筑暖通设计应用进行详细探究，希望能够为相关设计人员带来有价值的理论帮助。

简介：摘要：如今随着人们生活水平的不断提高，对于建筑设计的需求也有了进一步提高，在关注建筑质量和安全的基础上同样关心节能与环保。在建筑设计中，暖通设计是其中的关键构成，而在如今的时代背景下暖通设计也面临着新的挑战，如何应用节能降耗的技术手段来优化动力与节能设计提高建筑整体建设效果成为了实现可持续发展目标的关键路径。本文主要围绕建筑暖通设计展开论述，探讨其中的动力与节能设计。

简介：摘要：随着我国城市化进程的日益加快，建筑能耗也会随之增加，严重违背了低碳经济的发展原则。鉴于上述情况，对建筑暖通设计中的动力节能设计进行研究具有很重要的现实意义。基于此，文章将择取动力设计与节能设计角度，针对其建筑暖通设计应用进行详细探究，希望能够为相关设计人员带来有价值的理论帮助。

简介：

简介：【摘要】服务设计服务过程中不仅能够体会设计与艺术的无穷魅力，提升文化审美水平、激发创意潜质，而且可以启发运用设计思维去解决生活与工作中可能遇到的难题。设计从服务本体的视角对作品进行衡量，把作品的典型性、形象性、人文性、审美性作为人文价值的艺术反映，凸显为谁创作、为谁服务这一根本问题。设计情绪能够激发行为，情绪板在服务设计服务过程中的作用体现在两个方面。一方面是从设计的角度，另一方面是从商业的角度。在设计初期情绪板可以用来定义服务设计服务的全貌。

简介：摘要：设计是不断发展成长的学科，涌现出的新设计不断为其注入新涵义，其中全设计发展到现在，由于共享经济的发展，共享单车这项设计品，为其补充了新内容。

简介：摘要：人们的生活水平在不断的提升，出行工具数量明显增加，对于道路桥梁的使用频率也在明显增加。桥梁是城市建设时的重要基础设施，在建设过程中，投入了较大的人力物力，在后续桥梁投入使用的过程中也会面临较大的困难。桥梁由于其特殊的结果，对于抗震性能要求较高，在市政桥梁的设计过程中就需要极为注重防震设计，这样才能从设计阶段做好预防，才能尽可能的减轻地震带来的损失。

简介：摘要：随着可持续发展理念的深入，绿色环保设计逐渐成为时代主题，对建筑设计领域也产生了一定影响。如今，打造高品质绿

简介：摘要：建筑工程是一个复杂的系统工程，涉及多个环节过程链，因此规划设计等前期基础工作十分重要。对于建筑项目的暖通空调设计，两个最重要的组成部分包括动力设计和节能设计。在实际实施过程中，应从当前经济社会运行和发展的客观要求和基本需求出发，采取有效措施，进一步加强和提高暖通空调动力设计和节能设计的整体有效性。

简介：摘要：作为建筑工程施工中的重要工程部分，暖通在建筑工程的施工建设中有着非常重要的作用效果。为此必须结合建筑工程建设要求开展暖通设计工作，使得暖通设计与建筑工程的施工建设要求相一致。此外，在暖通工程实施过程中，还应做好室内管网综合设计工作，保证暖通设计与室内管网设计的合理性。在改善建筑工程暖通项目建设的同时，确保暖通工程在建筑项目施工中的作用效果得以彰显。

简介：