简介：但是pSilencer3.1KDR3能够抑制PC3细胞中KDR基因和蛋白的表达,结果表明针对3号KDR基因位点的pSilencer3.1KDR3载体有效地抑制了PC3细胞中KDR基因和蛋白的表达.,pSilencer3.1KDR3组转染的PC3细胞的生长速度明显变慢

简介：目的观察人树突状细胞(Dendriticcells，DC)体外扩增及其诱导免疫效应细胞对胰腺癌细胞系(PC3)凋亡和抑制作用。方法用淋巴细胞分离液分离抗凝新鲜全血以获得单核细胞(Peripheralbloodmononudearcells，PBMC)，用贴壁法获取DC和去DC的单核细胞(即免疫效应细胞)，并分别用人粒／巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)、人白介素4(IL-4)、人肿瘤坏死因子(TNF—α)、PC3肿瘤相关抗原(PC3TAA)和人白介素2(IL-2)培养正常人或胰腺癌病人DC和免疫效应细胞，5—6天后将DC和免疫效应细胞混合培养1—2天并计数细胞。观察DC生长状况，检测DC表型(CD1a、CD80、CD83、CD86)。用乳酸脱氢酶法(1actatedehydrogenase)和MTT法检测DC诱导免疫效应细胞对PC3的抑制作用，TdT法检测培养上清液对PC3细胞的凋亡作用。结果体外多种细胞因子和肿瘤相关抗原能有效引起DC增殖，并高表达CD80、CD83、CD86；体外实验中，酶法：最大抑制(杀伤)效率为62．4％，MTT法：最大抑制(杀伤)效率为98．1％；DC培养上清液和DC混合免疫效应细胞培养上清液均能有效地引起PC3凋亡。结论DC在抗胰腺肿瘤中有重要作用。

简介：【摘要】目的：探讨siRNA 沉默HnRNP L基因对RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3细胞生物学行为的影响。方法：通过合成了靶向HnRNP L的特异性siRNA，并通过了Western Blot在蛋白水平上进行检测，并筛选出干扰效率最高的3号序列来干扰RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3 细胞中HnRNP L的表达，观察其对三种不同细胞生长、凋亡、体外侵袭能力及迁移能力的差异。结果：沉默HNRNPL后，CCK-8实验提示三种细胞的增值都明显降低，划痕实验结果提示：沉默HNRNPL后，RWPE-1细胞和PC3细胞的迁移力明显减弱。Transwell检测结果提示：沉默HNRNPL后，RWPE-1细胞、Lncap细胞和PC3细胞的侵袭能力明显减弱。结论：HnRNPL对前列腺癌的多种生物学行为有明显的影响，参与了前列腺癌的发生、发展的恶性进程，促进了前列腺癌的生长、侵袭和转移。

简介：目的：观察RNA干扰（RNAi）沉默MUC1-C的表达对前列腺癌PC3细胞增殖的影响。方法构建靶向MUC1-C的特异性小干扰RNA（siRNA）表达载体,用脂质体Lipofectamine3000TM转染人前列腺癌PC3细胞,以空白组和转染无关序列的阴性对照组细胞作对照,转染48h后收集样本,采用免疫印迹法检测MUC1-C蛋白的表达,噻唑蓝比色法检测细胞的增殖。结果与阴性对照组比较,转染MUC1-C48h后的PC3细胞,MUC1-C的表达降低,siRNA-144434、siRNA-144435和siRNA-144436的灰度值分别为1.18、0.72和0.28,差异具有统计学意义（P〈0.05）。转染组siRNA-144434、siRNA-144435和siRNA-144436的细胞增殖抑制率分别为（12.55±2.05）%、（15.11±2.70）%和（16.22±3.43）%,siRNA-144436作用较明显,与空白组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论靶向MUC1-C的RNAi可抑制MUC1-C在前列腺癌PC3细胞中的表达,从而延缓PC3细胞的增殖。

简介：摘要目的检测前列腺癌细胞株PC3中hTERT/PSA基因转录水平和蛋白表达水平。方法分三组采用荧光定量PCR及蛋白免疫印迹(Westernblot)方法检测正常前列腺组织及前列腺癌PC3细胞中基因和蛋白表达。结果荧光定量PCR及Wseternbolt检测前列腺癌PC3细胞较正常前列腺组织表达升高明显。结论hTERT/PSA在在人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3中表达升高，在靶向调控中起重要作用。

简介：瞄准：探索17β-雌二醇的反肿瘤行动是否被homeodomain抄写因素Nkx3.1的重新表示在PC3人的前列腺癌症cells.Methods提高：PC3房间稳定地有pcDNA3.1-Nkx3.1-His向量的transfected，它带人的Nkx3.1的afull长度cDNA。稳定地，有向量pcDNA3.1的transfected作为控制被设置的PC3房间。在房间的Nkx3.1蛋白质的表示被西方的污点分析证实。PC3房间的房间增长上的Nkx3.1的Theeffect与MTT试金被检验。17β-雌二醇的Theantiproliferative和apoptotic效果被使用MTT生长测试和流动cytometric分析独自或在有Nkx3.1的联合在PC3房间上估计。表示ofapoptosis相关的蛋白质用西方的弄污被分析。结果：带Nkx3.1gene的原生质标志在PC3房间导致了Nkx3.1蛋白质的高表示。外长的Nkx3.1did的重新表示不在细胞的增长引起重要减小，而Nkx3.1enhanced的表示在PC3房间的17β-雌二醇anti-proliferative效果。Nkx3.1表示promoted17β-PC3房间的导致estradiol的apoptosis由Bcl-2的分析出现Bax，Caspase-3andpoly(自动数据处理核糖)聚合酶表示。结论：现在的学习证明Nkx3.1的thatre表示在PC3人的前列腺癌症房间提高17β-雌二醇反肿瘤行动。在试管内学习建议Nkx3.1的重新表示与雌激素反肿瘤治疗作为雄激素独立人士前列腺癌症的辅佐疗法值得进一步的考虑。

简介：摘要目的观察沉默中介体复合物亚基19(Med19)基因对人前列腺癌PC3细胞裸鼠体内增殖、生长作用的影响，探讨其机制。方法采用针对Med19的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体转染PC3细胞，3 d后，应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测Med19-siRNA转染组(siRNA)与对照组(scRNA)Med19基因和蛋白表达，噻唑蓝(MTT)实验评估肿瘤细胞增殖和生长能力，Western blot检测肿瘤细胞中p27、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)的表达。构建经慢病毒转染的PC3裸鼠模型，测量移植瘤的大小和增殖、凋亡指数。结果Med19-siRNA慢病毒感染PC3细胞后，转染组Med19 mRNA[表达率为(16.88±3.40)%]和蛋白表达与对照组比较明显降低，差异有统计学意义(t＝9.089，P<0.01)；MTT实验表明转染组细胞增殖较对照组缓慢(t＝10.492，P<0.01)；在PC3-Med19-si细胞中，p-Akt和p-PI3K的表达降低，而p27的表达升高；转染组裸鼠移植瘤的重量和增殖指数均低于对照组，差异有统计学意义[(0.17±0.08) g比(0.39±0.19) g，t＝2.488，P<0.05；(18.30±6.55)%比(33.22±4.36)%，t＝3.792，P<0.01)。两组中的细胞凋亡指数差异无统计学意义(t＝0.184，P>0.05)。结论沉默Med19基因后，通过调节p27、p-Akt、p-PI3K的表达来抑制前列腺癌PC3的生长，导致前列腺癌在增殖、生长能力均受到显著抑制。

简介：摘要目的探讨山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和miR-182的影响。方法制备山茱萸提取物，根据MTT法确定山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞的半数抑制浓度。实验分为阴性对照组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。阴性对照组细胞不进行处理；阳性对照组采用终浓度5 mg/L的顺铂干预细胞；低剂量组、中剂量组和高剂量组分别用终浓度为20、40、80 mg/L的山茱萸提取物干预细胞，48 h后，采用流式细胞术检测各组PC3细胞的凋亡率。采用实时荧光定量PCR检测各组PC3细胞中miR-182、Bcl-2和促凋亡因子(Bax) mRNA水平，同时采用蛋白印迹法检测各组PC3细胞中Bcl-2和Bax蛋白水平。结果随着山茱萸提取物浓度增加，PC3细胞的增殖率降低(P<0.05)。当山茱萸提取物浓度为80 mg/L时，增殖率最先降到50%左右，故选择80 mg/L作为半数抑制浓度。与阴性对照组比较，其余各组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平增加，Bcl-2 mRNA和蛋白水平降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)；与阳性对照组比较，低、中、高剂量组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平降低，Bcl-2 mRNA和蛋白水平增加，且随着山茱萸提取物剂量增加，各指标呈剂量反应关系，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论山茱萸提取物可诱导PC3细胞凋亡，抑制PC3细胞增殖，其机制可能与山茱萸提取物通过上调miR-182表达进而抑制Bcl-2活性有关。

简介：p27是从G1调整房间的前进到房间周期的S阶段的一个cyclin依赖的kinase禁止者。p27的损失在前列腺癌症与疾病前进并且与不利结果被联系了。在这研究，我们调查了在人的雄激素无关的前列腺癌症PC3细胞线的外长的p27表示是否在细胞生长上有任何效果，并且我们学习了包含的分子的机制。p27表示被plasmid交货在PC3房间恢复。房间增长和apoptosis与p27在PC3房间transfected被估计。我们也在表皮的生长因素受体(EGFR)上调查了p27的效果在PC3房间的/phosphatidylinositol3-kinase(PI3K)/Akt发信号小径。由在PC3房间恢复p27表示，我们观察了在G0/G1的减少的增长和导致的拘捕分阶段执行的那p27。而且，p27-transfectedPC3房间经历了apoptosis，由流动cytometric分析和Bcl-2的西方的弄污分析出现Bax，坏，caspase-3并且poly(自动数据处理核糖)聚合酶表示。而且，导致p27的反瘤行动与表明小径，由西方的弄污证实了EGFR的分析和测密度术的EGFR/PI3K/Akt的抑制相关PI3K(p85)，Akt和p-AktS473表示。我们的结果建议p27的那个外长的表达式通过G1拘捕的正式就职禁止PC3房间的增长，apoptosis，和这与表明小径的EGFR/PI3K/Akt的抑制处理相互关联。

简介：Smoothened(SMO)是表明小径的刺猬的一个重要成员。我们为RNA干扰构造了特定的recombinantlentiviral向量，指向SMO基因(NM_005631)观察它在人的雄激素敏感的前列腺癌症房间线的SMO表示，房间增长和房间周期上的效果，LNCaP，并且在雄激素无关的前列腺癌症房间线，PC3。四个siRNA序列被设计并且插入了到lentiviral向量pGCSIL-GFP构造四recombinant向量。有最高的介入效率的向量是有在293T房间包装向量(pHelper1.0和pHelper2.0)为分别地感染LNCaP和PC3房间线由liposome装配lentivirus粒子的co-transfected。SMOmRNA，肿瘤房间增长和房间周期的表示水平被量的实时聚合酶链反应(qRT-PCR)测量，3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide(MTT)试金和流动cytometry分别地。顺序结果证明recombinantlentiviral向量成功地被构造。pGCSIL-GFP-723有最高的介入效率，在co-transfection，LNCaP和PC3房间与排队以后的命名Lv-SIL-SMO723被感染。与控制组相比，显著地显示出的结果减少了(P<0.05)LNCaP和PC3，S阶段房间的更低的吝啬的百分比和G2/M的更高吝啬的百分比的SMOmRNA表情分阶段执行房间，以及显然减缓增长(P<0.01)在感染的组的LNCaP。然而，PC3的增长没被改变(P>0.05)。在结论，recombinantlentivirus粒子能压制SMO表示，在LNCaP和PC3房间线调整房间周期并且显著地禁止LNCaP房间然而并非PC3房间的增长。

简介：

简介：目的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,TRAIL）能够诱导人前列腺癌细胞株PC-3细胞凋亡而不损伤正常细胞。部分PC-3细胞能够对TRAIL产生抵抗作用,本研究对其发生发展的分子机制进行进一步探讨和阐述。方法将体外培养的PC-3细胞分为对照组（仅加培养基）和实验组（不同浓度滴度的TRAIL处理）,作用时间24-72小时。MTT法检测细胞抑制率,筛选出抵抗TRAIL治疗的PC-3细胞,Q-PCR检测Fas相关死亡域样白介素1B转换酶抑制蛋白（FLICEinhibitoryprotein,FLIP）、死亡受体4（deathreceptor,DR4）、DR5、Fas相关死亡域（Fas-associateddeathdomain,FADD）和caspase-8基因表达情况。结果TRAIL对PC-3细胞具有一定增殖抑制作用,细胞平均存活率随着TRAIL作用时间延长而减少;同时与TRAIL浓度有关,在200ng/ml的TRAIL时,对PC-3细胞的增殖抑制作用较强。Q-PCR检测结果显示TRAIL作用24小时的PC-3细胞较对照组的FLIP、DR4、DR5、FADD和caspase-8基因的表达降低;随着TRAIL作用时间延长至72小时,DR4、DR5、FADD和caspase-8基因的表达下降,而FLIP表达上升。结论体外实验TRAIL对于PC-3治疗具有一定效果,和TRAIL浓度作用时间有关,在TRAIL作用一定时间内,随着作用时间延长,细胞增殖抑制作用越强。TRAIL对PC-3抑制作用与药物浓度有一定关系,在200ng/ml时对PC-3细胞抑制生长率最强。PC3-TR的DR4、DR5、FADD和caspase-8及FLIP在TRAIL短时间治疗内表达下降,而在长时间治疗时DR4、DR5、FADD和caspase-8表达下降,FLIP表达上升。

简介：目的观察鞣花酸对前列腺癌PC-3细胞株的影响。方法：体外培养人前列腺癌PC-3细胞，加入0μg/ml、2．5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的鞣花酸作用于PC-3细胞，分别作用12小时、24小时和48小时后，应用MTr法测定各浓度组鞣花酸对PC-3细胞的生长抑制作用。应用流式细胞仪检测鞣花酸作用48小时后，PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况。应用免疫细胞化学检测10μg/ml鞣花酸作用24小时后，实验组与对照组细胞Caspase-3蛋白表达情况。结果：鞣花酸明显抑制PC-3细胞的生长，抑制效应呈时间依赖型和浓度依赖型，与对照组比较均有统计学意义（P〈0．05）。应用流式细胞仪检测结果显示，鞣花酸可将PC-3细胞阻滞于G1／S期，并诱导PC-3细胞凋亡。免疫细胞化学结果显示实验组Ctmpase-3蛋白表达明显升高。结论：鞣花酸对前列腺癌PC-3细胞株有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。

简介：目的：研究鱿鱼墨多肽酸法提取工艺及不同浓度鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：以料液比、加酸量、酸解时间和酸解温度为因素．以酸解液的氨基氮含量为指标．通过正交试验确定提取鱿鱼墨多肽的酸解条件。采用CCK-8法检测其对DU-145和PC-3的生长抑制作用。采用AnnexinV—FITC／PI双标记流式细胞术检测和A0厄B双染法，观察鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的早期凋亡情况。结果：酸法提取鱿鱼墨多肽最佳组合为0．02mol／L盐酸、酸提料液比1：1、酸解时间2h、酸解温度35℃：鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞有增殖抑制作用，能诱导DU-145和PC-3细胞凋亡。结论：鱿鱼墨多肽能抑制DU-145和PC-3细胞增殖，并诱导其细胞凋亡。

简介：目的构建针对N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V（GnT-V）的小片段发夹状RNA（shRNA）表达质粒，研究shRNA表达质粒沉默GnT-V基因后对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法设计针对GnT-V基因的小于扰RNA（siRNA）靶序列，构建shRNA表达载体并转染PC-3细胞，通过G418筛选，建立稳定表达GnT-V基因的细胞株，采用RT-PCR和蛋白质印迹检测GnT-VmRNA和蛋白的表达，并通过CCK-8增殖实验、流式细胞仪评价GnT-VshRNA对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。结果成功构建了GnT-VshRNA表达质粒，且该质粒明显下调GnT-V的表达；PC-3细胞GnT-V／1079的tuRNA和蛋白质水平的抑制率分别为76．5％和67．0％，对PC3细胞呈明显抑制效应；CcK-8增殖实验显示，与对照组相比，PC-3GnT-V／1079的增殖受到明显抑制（P〈0．01），以48h为著；流式细胞仪检测结果表明，PC-3GnT-V／1079的凋亡率明显增加（P〈0．05）。结论shRNAGnT-V能显著降低GnT-V基因的表达水平，从而有效抑制PC-3细胞增殖。并促进细胞凋亡，该GnT-V的siRNA序列可能成为治疗前列腺癌的有效靶点。

简介：AnaffordablesolutiontoTier-3RegionalCenter(RC)ispresentedinthistalk,asimpleprototypehasbeensetupforevaluationofthesystemperformance,thisprototypecanbeeasilyscaledtobiggerone.Asetofmeasurementshavebeenconductedinbothcomputerandnetworksystembehavioursinmultipleconcurrentlyrunningjobscontexts.Inthetalkthesemeasuredresultsaretalkedanddiscussed,includingsystemandnetworkeffectiveutilizationsandlimitations,andtheidentifiedbottlenecksindifferentnetworklayouts,andthecomparisonswithsimulation.

简介：摘要目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体微小RNA(miR)-20a对前列腺癌细胞间通讯连接(GJIC)、侵袭和转移能力的影响及其机制。方法构建CAFs来源近红外荧光蛋白(IRFPs)标记外泌体，以不同浓度(0、10、100、200 mg/L)与PC-3细胞共培养。蛋白质印迹法检测PC-3细胞中CX43蛋白的相对表达水平；荧光漂白恢复技术测定PC-3细胞间缝隙连接功能；Transwell小室侵袭和迁移实验检测PC-3侵袭能力。构建高表达和低表达miR-20a的CAFs，分别与PC-3细胞共培养，检测缝隙链接蛋白43(Connexin 43, CX43)表达、细胞缝隙连接功能、细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证PC-3细胞中miR-20a与CX43基因是否直接结合。用Student’t检验分析组间差异。结果PC-3细胞的CX43表达水平及细胞缝隙连接功能均随外泌体浓度增加而降低(0.715±0.058、0.544±0.039、0.313±0.028和0.196±0.020，F＝19.031，P<0.05)，差异有统计学意义。Transwell小室检测结果表明，CAFs来源外泌体促进PC-3细胞迁移[各组每视野穿膜细胞数分别为(176.0±9.2)、(485.0±12.8)、(159.5±9.7)和(198.0±10.5)个，F＝11.475，P<0.01]和侵袭[各组每视野穿膜细胞数分别为(150.0±8.4)、(443.0±21.7)、(182.0±11.2)和(153.5.0±10.1)个，F＝16.306，P<0.01]，差异有统计学意义；增强细胞缝隙连接能抑制此效应(F＝14.052，P<0.01；F＝14.804，P<0.01)。高表达miR-20a组的PC-3细胞的CX43表达水平(0.126±0.062比0.834±0.103，t＝9.430，P<0.05)、荧光恢复率[(25.02±7.85)%比(46.65±6.98)%，t＝5.782，P<0.05]均显著低于低表达miR-20a组，但细胞的迁移[(502.5±18.6)个比(128.5.0±9.4)个，t＝9.120，P<0.05]和侵袭能力(458.0±16.8比194.5±9.2，t＝6.286，P<0.05)均显著高于表达miR-20a组，差异均有统计学意义。双荧光素酶报告实验结果显示，野生型CX43的PC-3细胞中，转染miR-20a的细胞荧光活性显著低于miR-NC组(0.46±0.08比0.99±0.14，t＝10.208，P<0.05)，差异有统计学意义；而突变型CX43的PC-3细胞中，miR-20a组与miR-NC组细胞荧光活性差异无统计学意义(0.94±0.06比0.97±0.08，t＝0.142，P>0.05)。结论CAFs来源外泌体miR-20a通过直接作用CX43基因，下调PC-3细胞CX43的表达，从而显著降低细胞间通讯连接功能，增强前列腺癌细胞的增殖、侵袭和转移能力。

简介：目的体外检测骨髓基质细胞分泌物对PCI2细胞的活性作用,并探讨其产生的可能机制.方法收集培养至第4代第7天的SD大鼠MSCs培养上清,按不同的体积百分比浓度加入到PC12细胞培养体系中,在倒置相差显微镜下观察1d和4d的细胞形态学改变;用丙二酸钠对PC12细胞造成氧化应激损伤,同时加入不同体积百分比浓度的MSCs培养上清,采用MTT法测定24h后的细胞活性.结果有突细胞/总细胞数、最长突起长度随培养时间及MSC培养上清体积百分比的增加而增加;PC12细胞氧化损伤后,加入一定浓度MSC培养上清组的PC12细胞活性较未加入组增高,差异有显著性.结论MSCs能够合成和分泌具有神经营养活性的物质,该物质能诱导PC12细胞分化并减轻氧化应激对PC12细胞的损伤.

简介：摘要目的观察不同氧分压对大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤(pheochromocytoma, PC12)细胞生存的影响，探讨可能的机制。方法PC12细胞长满培养瓶底70%～80%时随机分为0.1 MPa组、0.2 MPa组和0.4 MPa组，分别置于实验舱中，0.1 MPa组常压下呼吸纯氧，另2组升压速度0.03 MPa/min，稳压在相应压力下予纯氧1 h。用四甲基偶氮唑[3-(4, 5-dimethylthiazol-2yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide，MTT]比色法测定细胞存活率、培养液中乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase，LDH)水平，流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，MMP)。结果(1)0.2 MPa组较0.1 MPa组细胞存活率升高[(118.35±5.42 )%vs. (100.38±5.08)%)，差异具有统计学意义(P<0.01)，而0.4 MPa组的细胞存活率[(83.50±7.11)%]较0.1 MPa组及0.2 MPa组降低，差异有统计学意义(P<0.01)。(2)0.4 MPa组内的LDH水平(1 071.67±35.36)明显增加，与0.1 MPa组(959.19±34.06)和0.2 MPa组(966.66±31.38)比较，差异均具有统计学意义(P<0.01)。(3)ROS水平随着压力的增加而上升，0.1 MPa组(97.48±6.08)和0.2 MPa组(112.48±3.14)、0.1 MPa组和0.4 MPa组(148.62±4.79)、0.2 MPa组与0.4 MPa组的ROS水平差异均具有统计学意义(P<0.01)。(4)Rh123的荧光强度与MMP负相关，3组分别为(797.63±60.05)、(798.20±58.54)、(1 362.32±40.68)，0.2 MPa组的MMP与0.1 MPa组相比，差异无统计学意义(P＝0.79)，0.4 MPa组的MMP较0.1 MPa组及0.2 MPa组降低，差异有统计学意义(P<0.01)。结论适当的氧分压增加PC12细胞的存活率，过高的氧分压对细胞产生毒性作用，产生过量ROS，引起MMP降低可能是机制之一。

简介：摘要目的探究微小RNA(miRNA，miR)-143通过调控Kras的表达影响前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移的机制。方法选用购自美国典型培养物保藏中心细胞株PC-3，保持在补充有10%胎牛血清(Hyclone)的F-12培养基(Hyclone)中。细胞在5%CO2和37 ℃的湿润环境下生长。根据实验需求对细胞进行实验分组，随机分为PC-3转染组、PC-3对照组。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)试剂盒对细胞活力进行测定。通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞中miR-143与Kras mRNA表达；通过蛋白质印迹反应检测各组细胞因子CD133、Oct4、Klf4的蛋白表达情况。组间比较采用单因素方差分析或者重复测量的方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果RT-qPCR分析各组miR-143 mRA和Kras mRNA表达为：miR-143 mRNA PC-3对照组(1.06±0.02)较PC-3转染组(3.17±0.23)降低；Kras mRNA PC-3对照组(2.75±0.11)较PC-3转染组(1.23±0.03)升高，差异有统计学意义(t＝5.167，P<0.05)。蛋白印迹检测发现CD133、Oct4、Klf4的蛋白表达PC-3对照组(2.67±0.11、3.18±0.23、2.84±0.26)较PC-3转染组(1.15±0.03、1.26±0.14、1.18±0.15)升高，差异有统计学意义(t＝4.862，P<0.05)。细胞活力检测发现PC-3对照组(1.62±0.14)较PC-3转染组(0.58±0.02)细胞活力值升高，差异有统计学意义(t＝4.154，P<0.05)。结论miR-143可通过抑制Kras的基因表达来控制前列腺PC-3的增殖及迁移状况，miR-143的高表达可有效抑制前列腺癌细胞的增殖及侵袭。