简介：Inordertostudythemechanismoftheeffectofheparinonapoptosisincarcinomacells,thenasopharyngealcarcinomacelllineCNE2wasusedtoidentifytheeffectofheparinonapoptosisassociatedwiththeexpressionofc-myc,bax,bcl-2proteinsbyuseofHoechst33258staining,terminaldeoxynucleotidyltransferase-mediateddUTPnick-endlabeling(TUNEL),agarosegelelectrophoresis,andflowcytometry,aswellasWesternblotanalysis.TheresultsshowedthatheparininducedapoptosisofCNE2cellsincludingthemorphologicchangessuchasreductioninthevolume,andthenuclearchromatincondensation,aswellasthe“ladderpattern”revealedbyagarosegelelectrophoresisofDNAinaconcentration-dependentmanner.ThenumberofTUNEL-positivecellswasdramaticallyincreasedto33.6±1.2%from2.8±0.3%bytreatmentwithheparinindifferentconcentrations(10～40kU/L).Theapoptoticindexwasincreasedto32.5%from3.5%bydetectingSubG1peaksonflowcytometry.Westernblotanalysisshowedthatlevelsofbcl-2,baxandc-mycweresignificantlyoverexpressedbytreatmentwiththeincreaseofheparinconcentrations.TheseresultssuggestthatheparininducesapoptosisofCNE2cells,whichmayberegulatedbydifferentialexpressionofapoptosis-relatedgenes.

简介：摘要目的观察芒果苷对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响。方法采用倒置显微镜观察芒果苷对人鼻咽癌CNE2细胞形态学的影响；采用CCK8法检测芒果苷对人鼻咽癌CNE2细胞生长的影响。结果加入芒果苷作用后，人鼻咽癌CNE2细胞形态发生改变，细胞变小变圆，核固缩，细胞离壁，聚集成团。集落形成受到抑制，细胞数量不再增加。随着芒果苷浓度的增加，细胞增殖受到不同程度的抑制，其抑制率也随之增大，其中200μmol/L芒果苷作用细胞5天的抑制率为55.9%。结论芒果苷对人鼻咽癌CNE2细胞增殖有抑制作用，且呈现剂量、时间-效应关系。

简介：摘要目的通过研究水蛭素单药及联合顺铂对鼻咽癌CNE２细胞生长的影响，探讨其抑制作用。方法以体外培养的鼻咽癌CNE２细胞为研究对象，采用MTT法检测水蛭素单药及联合顺铂对CNE２细胞的生长抑制率。结果水蛭素对CNE2细胞有明显的生长抑制作用，抑制率随剂量、时间的增加而增强（P＜0.05）；水蛭素和顺铂联合应用，对CNE2细胞的抑制率高于两者单独应用（P＜0.05）。结论水蛭素有抑制鼻咽癌CNE2细胞生长的作用，并可增强顺铂的抑癌效应。

简介：摘要目的研究ZD1839对鼻咽癌细胞株CNE2放射增敏作用。方法采用MTT法测定ZD1839的半数抑制浓度(IC50)，克隆形成实验计算细胞存活率,拟合生存曲线,流式细胞仪检测ZD1839联合放疗的凋亡率及细胞周期分布。结果单药组，CNE2细胞的存活率ZD1839浓度的增加而降低，其IC50约为2.26μmol/L。联合组，ZD1839作用CNE2细胞24h后均见到放射增敏作用，增敏比为1.529±0.135。ZD1839或照射均可增加凋亡率,减少S期细胞比例及增加G2/M期细胞比例(P<0.01)。结论ZD1839联合电离辐射可提高鼻咽癌细胞的放射敏感性，其机制之一可能是ZD1839促进细胞凋亡、干扰细胞周期分布及下调Bcl-2蛋白表达。

简介：摘要目的分析不同作用机制端粒酶抑制剂分别作用于CNE2鼻咽癌细胞株后蛋白表达谱的变化。方法用EGCG等八种不同的端粒酶抑制剂分别作用于CNE2细胞,提取药物作用后细胞的总蛋白，运用基层辅助激光解析时间飞行质谱技术检测蛋白的变化,筛选共同差异蛋白。结果CNE2细胞经八种端粒酶抑制剂作用后，分别有14，26，27，23，31，42，26，30个蛋白低表达；分别有22，11，18，18，7，7，13，8个蛋白质高表达；均呈低表达的差异蛋白1个，相对分子量为2657.14Da，无共同高表达的差异蛋白。结论八种端粒酶抑制剂作用后，CNE2细胞表现出共性变化的蛋白。这些蛋白可能参与端粒酶活性的调控，可能是不同机制端粒酶抑制剂作用的共同靶点。

简介：目的研究ZD6474对鼻咽癌细胞株CNE2放射增敏作用。方法采用MTT法测定ZD6474的半数抑制浓度（50％inhibitionconcentration，IC50），克隆形成实验计算细胞存活率，拟合生存曲线计算放射生物学参数，流式细胞仪检测ZD6474联合放疗的凋亡率及细胞周期分布。结果单纯用药组，CNE2细胞的存活率随ZD6474浓度的增加而降低，其IC50约为2．15μmol·L^-1。ZD6474作用CNE2细胞24h后均见到放射增敏作用，增敏比为1．535±0．134。ZD6474或照射均可增加凋亡率，减少S期细胞比例及增加G2／M期细胞比例（P〈0．01）。结论ZD6474联合照射应用可提高cNE2细胞的放射敏感性并阻碍细胞增殖、促进凋亡和干扰细胞周期分布。ZD6474有望成为EGFR高表达CNE2细胞的放射增敏剂。

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简介：摘要目的探讨IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株凋亡的影响，为临床应用提供理论依据。方法取鼻咽癌CNE-2Z细胞株,进行细胞培养；采用碘化丙锭染色、流式细胞仪分析和细胞核形态检测两种方法同时检测体外培养的CNE-2Z细胞株增殖、分化过程中的凋亡状况；观察IL-24对它们的影响，并进行了定量分析。结果IL-24可诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞株的凋亡。结论在培养的48小时，IL-2450ng/m1实验组细胞凋亡程度较没加IL-24的对照组明显增加。结论IL-24可呈时间和剂量依赖性的诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞株的凋亡。

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简介：目的观察卡培他滨对人鼻咽癌细胞CNE-2的放射增敏作用，并探讨其可能的机制。方法用MTF法测定卡培他滨抑制细胞增殖20％的药物浓度（IC20），以卡培他滨24hIC20值对CNE-2细胞分别处理3h、6h、12h、24h，依次设为4个卡培他滨＋照射组，对其给予6MeVX线分别单次照射0、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy，另设对照组为单纯照射组；用克隆形成试验计算各组的放射增敏比，得到细胞生存曲线；5组细胞均给予6MVX射线单次照射6Gy，流式细胞仪检测各组的细胞周期变化情况及凋亡率。结果卡培他滨的24hIC20值为0．26μ/mL，卡培他滨处理3h、6h、12h、24h后的放射增敏比分别为1．08、1．15、1．22和1．35；卡培他滨处理后的照射组可将细胞阻滞在S期，且作用24h组的细胞凋亡率达45．9％；S期细胞比例及细胞凋亡率与卡培他滨作用时问成正相关。结论卡培他滨（24hIC20）对CNE-2细胞有放射增敏作用，其增敏比随作用时间的延长而增大，24h后增敏作用达最强，主要通过诱导细胞S期阻滞及促进凋亡来影响增敏。

简介：摘要目的探讨重组人肿瘤坏死因子-α（rhTNF-α）对鼻咽癌细胞CNE-2体外抗肿瘤作用的研究。方法以人鼻咽癌细胞CNE-2为细胞模型，用不同浓度rhTNF-α作用于体外培养的CNE-2鼻咽癌细胞，用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胸苷磷酸化酶（TP）。结果rhTNF-α浓度分别为10ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml时，TP表达水平分别为5.02±0.32ng/ml，15.38±1.05ng/ml，5.86±1.63ng/ml，44.31±2.17ng/ml，差异有统计学意义（F=23.43，P<0.01）。结论rhTNF-α在体外能有效抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖，能剂量依赖性上调胸苷磷酸化酶的表达。

简介：目的构建稳定过表达X连锁凋亡抑制蛋白相关因子1（X-linkedinhibitorofapoptosisassociatedfactor1,XAF1）基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。方法分别将携带XAF1基因感染复数（multiplicityofinfection,MOI）为50的慢病毒稀释液。MOI为100的慢病毒原液和MOI为100的慢病毒原液加入终浓度为5μg/mL的聚凝胺（polybrene）转染人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。通过倒置荧光显微镜观察细胞内荧光数量及强度评判转染效率,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,qRT-PCR）和蛋白免疫印记法（westernblot）检测XAF1基因mRNA和蛋白的表达。结果慢病毒稀释液转染,约60%的细胞可观察到微弱荧光;慢病毒原液转染,约70%的细胞观察到较弱荧光;慢病毒原液加入5μg/mLpolybrene的转染效率较高,约90%的细胞观察到较强荧光。嘌呤霉素筛选上述转染效率最高的慢病毒原液加5μg/mLpolybrene组细胞,其成功将携带XAF1基因的慢病毒转入鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。qRT-PCR和westernblot进一步证实细胞株稳定过表达XAF1基因。结论慢病毒加polybrene转染可成功构建稳定过表达XAF1基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。

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简介：摘要目的探讨重组人肿瘤坏死因子-α（rhTNF-α）对鼻咽癌细胞CNE-2体外抗肿瘤作用的研究。方法以人鼻咽癌细胞CNE-2为细胞模型，用不同浓度rhTNF-α作用于体外培养的CNE-2鼻咽癌细胞，用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胸苷磷酸化酶（TP）。结果rhTNF-α浓度分别为10ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml时，TP表达水平分别为5.02±0.32ng/ml，15.38±1.05ng/ml，5.86±1.63ng/ml，44.31±2.17ng/ml，差异有统计学意义（F=23.43，P<0.01）。结论rhTNF-α在体外能有效抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖，能剂量依赖性上调胸苷磷酸化酶的表达。

简介：摘要目的探讨重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)对鼻咽癌细胞CNE-2体外抗肿瘤作用的研究。方法以人鼻咽癌细胞CNE-2为细胞模型，用不同浓度rhTNF-α作用于体外培养的CNE-2鼻咽癌细胞，用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测胸苷磷酸化酶（TP）。结果rhTNF-α浓度分别为10ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml时，TP表达水平分别为5.02±0.32ng/ml，15.38±1.05ng/ml，5.86±1.63ng/ml，44.31±2.17ng/ml，差异有统计学意义(F=23.43，P<0.01)。结论rhTNF-α在体外能有效抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖，能剂量依赖性上调胸苷磷酸化酶的表达。

简介：摘要目的探讨化合物UC2288对CNE-2R细胞及裸鼠移植瘤放射敏感性影响。方法化合物UC2288浓度参照以往实验结果(IC50＝12.20 μmol/L)，克隆形成实验检测UC2288联合2、4、6、8 GyX线照射对CNE-2R细胞放射敏感性影响。CCK8实验检测UC2288联合X线2、4、6、8 Gy照射对细胞增殖作用。构建CNE-2R细胞裸鼠移植瘤模型，体内探讨UC2288联合X线2 Gy/次连续3 d照射对移植瘤放射敏感性影响。结果UC2288实验浓度为8 μmol/L。UC2288联合2、4、6、8 GyX线照射可降低细胞克隆形成能力，放射增敏比为1.60。UC2288联合X线2、4、6、8 Gy照射明显抑制细胞增殖。UC2288能抑制CNE-2R细胞裸鼠移植瘤生长，且随观察时间延长作用增强，16 d时最明显(P<0.01)，放射增敏比为4.33。结论UC2288对鼻咽癌放射抗拒细胞CNE-2R具有放射增敏作用。

简介：目的：探讨ebv-miRNA在低分化NPC细胞株C666-1（EBV＋）和CNE-2Z（EBV表达水平随传代次数增加而逐渐降低）中的差异性表达进而分析其功能.方法：常规培养NPC细胞株C666-1和CNE-2Z,分别提取总RNA并进行质检;RT-PCR检测LMP-1和LMP-2AmRNA的表达以判断EBV的感染情况;miRNA芯片技术检测EBVmiRNAs的表达并对其表达谱进行差异性分析;荧光定量RT-PCR进行验证;复习文献了解ebv-miRNA调控的靶基因以了解其功能.结果：从C666-1和CNE-2Z两株细胞抽提的总RNA纯度高,A260/A280〉2.0,A260/A230〉2.1,RNA完整性好.C666-1具有比CNE-2Z更高的LMP-1和LMP-2AmRNA表达.ebv-miRNA表达谱的差异分析表明39个ebv-miRNAs中19个在两株细胞显著差异性表达;荧光定量RT-PCR结果证实ebv-miR-BHRF1-1和ebv-miR-BART14＊在C666-1中表达升高而ebv-miR-BART8＊表达降低,与芯片结果趋势一致;复习文献,EBVmiRNAs功能远不清楚,少数已知的靶基因涉及信号转导、转录调控、细胞凋亡、增殖、免疫反应和病毒DNA复制等方面.结论：ebv-miRNA在低分化NPC中具有差异性表达并广泛参与基因调控.不同NPC细胞中EBVmiRNA表达差异预示着基于ebv-miRNA的NPC个性化治疗的可能性.