简介:LIGAtechniquehasbeendevelopedsince1993atBSRF,includingthefabricationofLIGAmask,deepX-rayLithography,electroplating,thepouringmoldingandtheapplicationsinsomefields.TheLIGAmaskwithgoldabsorbingstructuresof20μmthicknessand5μmwidthandKaptonmembraneofaround5μmthicnesshasbeensuccessfullfabricatedandappliedtothedeepX-raylithographywiththePMMAstructureof1mmthicknessorobove.thebeamlineformawigglerisusedforthedeepX-raylithographyofLIGAstatiionandisopentootheinstitutesresearchingthedeepX-raylithography.ThenormalprocessofLIGAtechniquewiththeexceptionofmoldinghasbeenestablishedwiththePMMAstructuresof500μmthicknessatBSRF.ThelargestaspectratioofPMMAstructruescanreachabout50withtheheightof500μmandthelateralsiaeof10μm.Thenickelandcopperstructureswiththetheicknessof0.5mmand1mmhavebeenmadebyusingtheelectroplatingtechnique.TheSU8asaresistmaterialofdeepetchlithographywithUVlightisalsodevelopedinthefabricationofLIGAmaskandsomedevicesatBSRF.Electromagneticsteppingmicromotor,haetexchange,accelerator,structuresusedintheEDM(electrodischargemachinging)arebeingdevelopedforthefutureapplications.
简介:
简介:[摘 要] 目的 将小鼠Sox2基因、穿膜肽TAT以及小分子泛素样修饰蛋白SUMO融合并转入大肠杆菌中进行表达,最终获得大量具有高效穿膜活性的Sox2蛋白。 方法 利用PCR技术扩增得SUMO-TAT融合基因,并插入到pET-3c载体。再通过扩增获得小鼠Sox2基因,将其与pET3c-SUMO-TAT基础载体连接,构建得重组表达载体pET3c-SUMO-TAT-Sox2,然后转化到Rosseta(DE3)表达菌中,经IPTG诱导表达,使用Ni-NTA亲和层析进行分离纯化。 结果 成功构建了pET3c-SUMO-TAT-Sox2原核表达载体,经终浓度为1 mmol /L的IPTG诱导4 h后表达约为57kDa的融合蛋白,以包涵体形式存在,Western Blotting检测显示良好特异性,经300 mmol/L咪唑洗脱可获得纯度较高的SUMO-TAT-Sox2融合蛋白。 结论 得到大量带有穿膜肽TAT的融合蛋白Sox2,为今后利用重编程因子融合蛋白诱导体细胞重编程为iPS细胞奠定基础。
简介:摘要目的统计检验科ISO15189质量管理体系运行前后不同项目急诊检验标本周转时间(Turn-Around Time, TAT)中位数、检验报告规定时限符合率、报告超时率,分析基层医院ISO15189质量管理体系对急诊检验TAT的管理效果,为持续提高基层医院检验科的服务能力提供客观依据。方法LIS系统导出检验项目的原始数据,利用mircosoft Excel 2019软件筛选出急诊数据,统计出各急诊项目的TAT,利用函数功能计算TAT中位数、检验报告规定时限符合率和检验报告超时率,列出报告超时原因并进行统计分析。结果ISO15189质量管理体系建立前(2018年1-10月)急诊检验各类项目的TAT中位数与ISO15189质量管理体系建立后(2019年1-10月)比较,除肌钙蛋白(CTNI)外,其他项目TAT均有不同程度缩短,差异具有统计学意义(P<0.05);4个急诊项目的检验报告时限平均符合率从93.4%增高为96.8%,增高了3.4个百分点,主要超时原因前4位依次是标本量增加(64.1%)、可疑结果复检(16.3%)、仪器故障(14.2%)和工作人员岗位轮换(5.4%)。结论基层医院建立ISO15189质量管理体系可以缩短急诊检验项目的周转时间,提高医学实验室为临床服务的能力。
简介:Fortilinisamultifunctionalproteinimplicatedinmanyimportantcellularprocesses.SinceinjectionofPm-fortilinreducesshrimpmortalitycausedbywhitespotsyndromevirus(WSSV),thereispotentialapplicationoffortilininshrimpculture.Inthepresentstudy,inordertoimprovetrans-membranetransportationefficiency,theproteintransductiondomainofthetransactivatoroftranscription(TAT)peptidewasfusedtofortilin.ThePichiapastorisyeastexpressionsystem,whichiswidelyacceptedinanimalfeeds,wasusedforproductionofrecombinantfusionprotein.Greenfluorescenceprotein(GFP)wasselectedasareporterbecauseofitsintrinsicvisiblefluorescence.Thefortilin,TATandGFPfusionproteinwereconstructed.Theirtrans-membranetransportationefficiencyandeffectsonimmuneresponseofshrimpwereanalyzedinvitro.ResultsshowedthatTATpeptideimprovedinvitrouptakeoffortilinintothehemocytesandmidgutofLitopenaeusvannamei.Thephenoloxidase(PO)activityofhemocytesincubatedwithGFP-FortilinorGFP-Fortilin-TATwassignificantlyincreasedcomparedwiththatinthecontrolwithoutexpressedfortilin.ThePOactivityofhemocytesincubatedwith200μgmL-1GFP-Fortilin-TATwassignificantlyhigherthanthatinthegroupwiththesameconcentrationofGFP-Fortilin.HemocytesincubatedwithGFP-Fortilin-TATatallconcentrationsshowedsignificantlyhighernitricoxidesynthase(NOS)activitythanthoseinthecontrolorintheGFP-Fortilintreatment.ThepresentinvitrostudyindicatedthatTATfusionproteinimprovedtheimmuneeffectoffortilin.
简介:摘要目的探讨微柱凝胶技术与传统试管法抗人球蛋白试验技术在新生儿溶血病(HDN)中的检测效果。方法选取来自本院的新生儿溶血病患者及其母亲血液标本各一份,总共600份,检测新生儿与母亲血型是否相同,将ABO-HDN患者血液标本均分为两份,标记为传统检测组及凝胶技术组,每组各包含新生儿血液标本共295份,然后对传统检测组新生儿血液标本进行传统试管法抗人球蛋白试验技术(tubeanti-personglobulinexperimenttechnique,TAT)检测;凝胶技术组则进行微柱凝胶技术法(microcolumngelexperimenttechnique,MGT)检测。分析比较两组检测效果。结果血型检测结果为300例患儿中ABO-HDN295例(98.33%),RH-HDN4例(1.33%),其他新生儿溶血病患者1例(0.33%);传统检测组295例标本中有197例(66.78%)被诊断为新生儿溶血病,低于凝胶技术组221例(74.92%);传统检测组中直接Coombs试验阳性44例(14.92%)低于凝胶技术组68例(23.0%);游离抗体试验阳性50例(16.95%)低于凝胶技术组110例(37.29%),抗体释放试验阳性197例(66.78%)低于凝胶技术组221例(74.92%),两组比较具有统计学意义(P<0.05)。结论微柱凝胶技术在新生儿溶血病(HDN)中的检测效果较传统试管法显著。
简介:建立了旋转振荡法配制弗氏不完全佐荆(IFA)抗原,并在精制破伤风抗毒素(TAT)生产中,与传统方法配制的IFA抗原进行比较。随机抽出40匹生产马(骡)分为两组,每组20匹,分别采用两方法配制的抗原实施免疫。于免疫第6程开始,两组再随机抽出10匹作为各自的实验组,辅以静脉注射小牛胸腺肤以提高其免疫血浆效价。结果:四组在小牛胸腺肽应用前的第5程,其免疫血浆效价比较(F=0.35,P>0.05)。至第11程四组比较(F=9.16,P<0.01)。提示:两方法在免疫及提高血浆效价方面,效果一致。本研究为实验室、尤其是临床血清生产中IFA抗原的制奋以及其他水油乳剂的乳化,提供了简便、快速,且能大量配制的可靠而有效的方法。
简介:摘要总结破伤风抗毒素致迟发过敏反应的护理。加强破伤风抗毒素致迟发过敏反应的观察与护理确保患者的生命安全。
简介:6ml/瓶)、药物含量、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等因素进行模型稳定性研究,转染后细胞接种到24孔板的浓度对药物抑制作用的影响确定了两种转染质粒的配比及转染过程中NCS含量关系,HIV-1Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型的构建经以上实验建立方法后
简介:摘要目的研究HAD和非HAD的艾滋病患者不同部位来源的Tat蛋白氨基酸位点变异及其对U87细胞氧化应激的影响。方法采用BLAST和MEGA6对一例HAD患者(H)和一例非HAD患者(N)的基底节(BG)、脾脏(SPL)共4个部位来源的HIV-1 Tat蛋白进行序列分析,研究其氨基酸位点变异,并将tat基因转染至U87细胞,显微镜观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)初步判断Tat蛋白表达情况,Western blot检测细胞Tat蛋白的表达;并使用cck-8法、Western blot、MDA检测试剂盒研究不同部位Tat蛋白对细胞活性、氧化应激指标GPX、MDA水平的影响。结果氨基酸序列分析显示N-BG、N-SPL、H-BG、H-SPL来源的HIV-1 Tat蛋白关键氨基酸位点存在差异;Tat蛋白可抑制U87细胞的活性,抑制作用可以被抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)逆转。与对照组相比,四个实验组MDA水平均升高,GPX蛋白表达量均降低,差异具有统计学意义(P=0.012,P=0.004,P=0.000,P=0.003;P=0.000,P=0.016,P=0.000,P=0.021);且不同部位的Tat蛋白诱导细胞氧化应激的能力不同,H-BG组MDA水平高于N-BG部位,差异具有统计学意义(P=0.023);且无论是HAD还是非HAD患者BG组GPX含量均低于SPL组,差异有统计学意义(P=0.01,P=0.007,P=0.01,P=0.007)。结论HAD及非HAD患者外周及中枢神经系统中的Tat蛋白关键氨基酸位点存在差异,对细胞氧化应激的影响也不同。
简介:6ml/瓶)、药物含量、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等因素进行模型稳定性研究,转染后细胞接种到24孔板的浓度对药物抑制作用的影响确定了两种转染质粒的配比及转染过程中NCS含量关系,HIV-1Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型的构建经以上实验建立方法后
简介:克隆河南人免疫缺陷病毒(HIV)感染者HIV-1B型株tat基因完整编码框序列,并分析比较其编码产物的序列结构特点.使用重叠PCR技术,从河南省1名HIV-1感染者外周血标本中扩增出tat基因第一和第二外显子并重组为完整的tat基因序列.获得的HIV-1B病毒株tat基因,第一外显子为263bp,第二外显子为214bp.将该基因编码产物与其他HIV-1株Tat蛋白经DNA软件编辑并翻译成蛋白质,使用ClustalX1.81进行多序列对比分析发现,第一外显子编码产物的3个保守区域的氨基酸组成大致相同,只有少数氨基酸存在差异.由于Tat蛋白不同病毒株间有高度保守的Cys富集区、核心区和碱性氨基酸富集区,tat基因的克隆为研究其功能并以其为靶点设计和筛选抗艾滋病的药物奠定了基础.
简介:虽然“5.12”汶川地震已经过去了一年多的时间,但是灾区中小学生仍需要持续的心理援助。国外的两种学生心理援助模式——教师作为治疗师(TAT)以及学生帮助计划(SAP),对我国目前相关工作的开展具有很强的借鉴意义。在这两种模式的基础上,结合我国的实际情况,本文提出了适合我国的心理援助模式:(1)专家组和教练组相结合,为教师量身定做培训体系;(2)TAT和支架式教学相结合,促进专业力量的提升;(3)TAT与朋辈咨询相结合,增强专业力量的合作;(4)培育学校内部力量,为心理健康教育提供有效保障;(5)学校和家长共同工作,以发挥家长的重要作用;(6)行政力量和民间组织相结合,有效利用外部资源。