简介：摘要目的观察二磷酸腺苷(ADP)核糖化因子鸟苷酸激酶1(ASAP1)在调节甲状腺乳头状癌细胞自噬中的作用。方法通过免疫荧光检测郑州大学第一附属医院60例甲状腺乳头状癌组织和癌旁组织中ASAP1以及自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达水平，分析60例标本中ASAP1的表达水平与患者临床病理特征之间的关系，用慢病毒CRISPR/Cas9技术敲除ASAP1来构建稳定细胞系，通过免疫荧光和蛋白质印迹法(Western blot)检测ASAP1敲除组与对照组之间自噬水平的差异，各变量比较采用χ2检验和t检验。结果甲状腺乳头状癌组织中ASAP1蛋白平均荧光强度为276.33，癌旁组织中ASAP1蛋白平均荧光强度为74.67，两组比较差异有统计学意义(P<0.01)；甲状腺乳头状癌组织中LC3蛋白平均荧光强度为74.67，癌旁组织中LC3蛋白平均荧光强度为290.67，两组差异有统计学意义(P<0.01)；在甲状腺乳头状癌细胞中，ASAP1敲除组LC3Ⅱ蛋白的表达量高于对照组，两组比较差异有统计学意义(MDA-T32细胞：0.463±0.081，P<0.05；MDA-T85细胞：0.750±0.050，P<0.01)。结论ASAP1能够调节甲状腺乳头状癌细胞的自噬，这可能是ASAP1参与甲状腺乳头状癌细胞转移调控的机制之一。

简介：摘要鸟苷酸环化酶（GC）在心力衰竭（心衰）的发生发展中起重要作用。本文将介绍GC相关信号传导通路在心衰发病机制中的作用，以及血管紧张素受体脑啡肽酶抑制剂（ARNI）和新型可溶性GC（sGC）刺激剂治疗心衰的机制。

简介：【摘要】可溶性鸟苷酸环化酶 （sGC） 是一氧化氮的生理传感器，其功能的改变与多种病理生理条件密切相关，本综述旨在总结目前新兴的可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂在心力衰竭患者中的应用。

简介：摘要Rho相关蛋白激酶(ROCK)是Ras同源基因家族成员A(RhoA)的下游靶标，参与多种细胞生物学过程。RhoA/ROCK在骨关节炎进展机制中发挥重要作用。目前已有研究开发靶向抑制RhoA/ROCK的药物用于治疗骨关节炎，发现对关节软骨具有保护作用。本文通过对RhoA/ROCK在骨关节炎发病机制中的作用和治疗骨关节炎的研究进展进行综述。

简介：摘要目的评价克罗恩病(CD)患者血浆鸟苷前体激素(ProGN)和尿鸟苷前体激素(ProUGN)水平在临床中的价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对克罗恩病患者和健康对照者血浆ProGN和ProUGN水平进行检测，并分析其与临床疾病活动性及24 h大便次数的相关性。结果与健康对照者相比，CD患者血浆ProGN与ProUGN水平均明显降低(均P<0.05)。亚组分析显示，缓解期与活动期患者血浆ProGN水平均显著低于健康对照组(均P<0.001)，活动期患者水平低于缓解期患者，但差异无统计学意义(P＝0.121)；缓解期患者血浆ProUGN水平显著低于健康对照组(P<0.001)，活动期患者低于健康对照组，但差异无统计学意义(P＝0.266)；缓解期患者显著低于活动期患者，差异有统计学意义(P＝0.011)。Pearson相关性分析显示，血浆ProGN及ProUGN水平与患者24 h大便次数均呈显著负相关(r＝-0.804与r＝-0.767，均P<0.001)。血浆ProGN水平与Best克罗恩病活动指数呈显著负相关(r＝-0.561，P<0.001)；而ProUGN水平与Best克罗恩病活动指数无线性相关(r＝-0.155，P＝0.314)。结论克罗恩病患者疾病临床活动性和腹泻可能是血浆ProGN水平的决定因素。

简介：摘要在人类和动植物活的机体中，普遍存在一类特殊蛋白质。它们参与生化反应，而且使反应进行得极快，这类物质是天然催化剂－－酶类。酶具有高度专一性和极高的活性，使有机化合物在体内以一定的反应顺序转换。酶是生物细胞合成的，存在于细胞内的称为胞内酶；由细胞内合成而分泌到细胞外起作用的酶称作胞外酶。各种动物器官、组织和体液中含有酶的种类和数量差别甚大。通常所含酶的总量并不很少，但每一种酶的含量却很少，常在百万分之几至百分之几。因此酶的提取、分离、纯化与确认要靠较高水平的生物化学技术。酶的发现是十九世纪（1833年）有人从麦芽浸液中提得第一个具有活力的蛋白质－－淀粉酶。到目前科学家们已从生物体内提纯确认出八百多种酶。

简介：摘要

简介：人体内细胞的正常代谢及致癌物的活化代谢均可产生大量的活性氧自由基（reactiveoxygenspecies,ROS）,ROS在许多慢性疾病的发生、发展及演变过程中起着至关重要的作用。适量的ROS有利于维持人体内环境稳态及正常免疫功能,一但过量的ROS在细胞内积聚,则会影响核酸结构和代谢,引起DNA损伤。

简介：摘要胸苷酸合成酶(TS)是DNA合成中的关键酶，常常作为化疗药物作用靶点。TS在多种肿瘤(如非小细胞肺癌、结直肠癌、乳腺癌等)中的表达与患者的临床预后及化疗药物耐药密切相关。通过各种分子机制降低肿瘤组织中TS的表达成为提高化疗疗效及改善临床预后的重要手段。

简介：

简介：摘要目的探究硫化氢的抗癫痫机制即调控环磷酸鸟苷/蛋白激酶G（cGMP/PKG）信号通路对三磷酸腺苷敏感性钾通道（KATP）亚基Kir6.2表达的影响。方法将60只SD大鼠按随机数字表法分为6个组（每组10只）：（1）正常对照组；（2）癫痫组；（3）硫化氢供体干预组；（4）硫化氢供体加PKG抑制剂（KT5823）组；（5）硫化氢供体加KATP抑制剂（格列本脲）组；（6）硫化氢供体正常对照组。采用腹腔注射戊四氮致大鼠癫痫发作，记录潜伏期、首次发作级别、持续时间；记录癫痫发作时海马脑电图的变化；采用 蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应法检测海马组织中PKG、Kir6.2 mRNA和蛋白的表达水平，酶联免疫吸附测定法检测海马组织中cGMP、磷酸化PKG的浓度。结果癫痫组出现Ⅳ~Ⅴ级发作，级别为4.500（4.000，4.875）级，潜伏期短［（10.37±8.21） min］， 持续时间长［（69.50±24.37） s］。与癫痫组相比，硫化氢供体干预组的发作级别降低（P=0.004），潜伏期延长（P<0.001）和持续时间缩短（P<0.001）。硫化氢供体加PKG抑制剂组与硫化氢供体干预组相比，潜伏期缩短（P<0.001），持续时间延长（P<0.001）。硫化氢供体干预组癫痫波明显减少，波幅与癫痫组相比差异有统计学意义（P<0.001）；硫化氢供体加PKG抑制剂组与硫化氢供体干预组相比癫痫波增加，波幅增大（P<0.001）。组间比较结果提示，各组PKG mRNA和蛋白的表达水平存在差异（分别为n=5， H=26.714， P<0.001和n=5， F=30.597， P<0.001）；其中与正常对照组相比，癫痫组PKG mRNA（分别为1.000±0.001和0.782±0.064，P=0.023）和蛋白（分别为0.550±0.037和0.145±0.020，P=0.042）的表达水平显著下降。组间比较结果提示，各组Kir6.2 mRNA和蛋白的表达水平存在差异（分别为n=5， H=27.761， P<0.001和n=5， F=60.659， P<0.001）；其中与正常对照组相比，癫痫组Kir6.2 mRNA（分别为1.000±0.001和0.897±0.033，P=0.004）和蛋白（分别为0.384±0.035和0.215±0.016，P=0.024）的表达水平显著下降，cGMP（P<0.001）、磷酸化PKG（P<0.001）的浓度降低；与癫痫组相比，硫化氢供体干预组PKG mRNA（P=0.047）、Kir6.2 mRNA（P=0.011）、PKG 蛋白（P<0.001）和Kir6.2蛋白（P<0.001）的表达水平则上升，cGMP、磷酸化PKG的浓度升高（均P<0.001）；尤其是与硫化氢干预组相比，硫化氢供体加PKG抑制剂组PKG mRNA（P=0.015）、Kir6.2 mRNA（P=0.013）、PKG 蛋白（P=0.027）和Kir6.2蛋白（P=0.017）的表达水平下降，cGMP（P=0.005）、磷酸化PKG（P<0.001）的浓度降低。结论硫化氢可抑制大鼠癫痫发作，其机制之一可能与激活海马中cGMP/PKG信号通路上调KATP通道亚基Kir6.2的表达从而降低海马的兴奋性有关。

简介：摘要目的通过8-氧化鸟苷（8-oxo Gsn）和8-氧化脱氧鸟苷（8-oxo dGsn）探讨高血压患者体内DNA和RNA氧化水平。方法现状调查。征集2018年8月至12月无其他慢性疾病的高血压患者以及健康对照者各139例，平均年龄分别为（49.6±12.4）岁和（48.5±11.7）岁。采集空腹静脉血及晨尿，使用液相色谱串联质谱法测定尿液中DNA氧化产物8-oxo Gsn和RNA氧化产物8-oxo dGsn。使用全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶、肌酐、尿酸、血糖、总甘油三酯、总胆固醇及尿液肌酐（U-Cr）等。8-oxo Gsn和8-oxo dGsn结果以中位数（四分位数）表示。使用IBM SPSS 22.0以及GraphPad Prism 5进行统计学分析，采用非参数检验比较健康对照组与高血压患者8-oxo Gsn和8-oxo dGsn的差异。结果高血压患者尿液中DNA和RNA氧化产物8-oxo Gsn和8-oxo dGsn以及其经U-Cr校正的8-oxo Gsn/U-Cr和8-oxo dGsn/U-Cr分别为14.38（10.39~19.91）ng/ml、12.97（7.92~18.96） ng/ml、1.10（0.88~1.38） μg/μmol、0.96（0.75~1.30） μg/μmol，均显著高于健康对照组对应的结果：11.95（7.52~18.01） ng/ml、10.12（6.42~15.04） ng/ml、0.86（0.59~1.21） μg/μmol、0.72（0.50~1.02） μg/μmol。经性别分组之后，男性高血压患者和健康对照组相比，尿液DNA氧化产物8-oxo Gsn差异无统计学意义（Z=-1.474，P=0.14），女性高血压患者与健康对照组相比，尿液8-oxo Gsn和8-oxo dGsn均无统计学差异，但经过U-Cr校正后，无论在男性还是女性人群，8-oxo Gsn/U-Cr以及8-oxo dGsn/U-Cr高血压组均显著高于健康对照组。结论高血压患者体内DNA和RNA氧化水平高于健康对照人群。

简介：目的探讨胸苷激酶1（thymidinekinase1，TK1）在良恶性乳腺肿瘤中的表达及意义。方法选取2013年5月至2015年5月青岛大学医学院第二附属医院乳腺医学中心收治的16—79岁女性乳腺疾病180例，其中乳腺癌112例（乳腺癌组），乳腺纤维腺瘤68例（乳腺纤维腺瘤组）。患者平均年龄47岁，中位年龄43岁。所有对象均采集空腹静脉血，检测TK1水平，并比较其在纤维腺瘤及乳腺癌患者中表达水平的差异，及血清TK1水平在不同病理特征的患者中的差异。结果乳腺癌患者的TK1水平明显高于纤维腺瘤患者的TK1水平，差异有统计学意义（P〈0．01）。在乳腺癌组中，肿块的大小与TK1的表达无关（P〉0．05）；TNM分期较晚的患者血清TK1水平高于TNM分期早期的患者，差异有统计学意义（P=0．038）；淋巴结分期晚期的患者血清TK1水平高于分期早期患者，差异有统计学意义（P=0．048）。M1的患者TK1水平高于M0的患者，差异有统计学意义（p=0．018）。结论TK1作为一种新型细胞增殖指数标志物，可较为准确地反映人体内肿瘤细胞的增殖水平，可作为一种监测肿瘤增殖程度和鉴别肿瘤良恶性的重要参考指标。

简介：

简介：摘要目的探讨髓源性抑制细胞（MDSC）在鸟苷酸结合蛋白1（GBP1）促进胶质瘤U87细胞增殖中的作用及其相关机制。方法选择过表达GBP1的胶质瘤U87细胞（U87-GBP1细胞）和转染空载体的对照U87-Lacz细胞进行实验。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测两种U87细胞GBP1和CC趋化因子配体2（CCL2）mRNA相对表达量或蛋白表达水平，采用CCK-8法检测两种细胞增殖变化。利用免疫磁珠从健康人外周血中分选出CD14+单核细胞和CD3+ T淋巴细胞。用U87-Lacz或U87-GBP1细胞培养液处理CD14+单核细胞，分别为U87-Lacz培养液组和U87-GBP1培养液组；采用流式细胞术检测CD14+单核细胞中MDSC比例，用两培养液组作用的CD14+单核细胞与活化的CD3+ T淋巴细胞共培养，流式细胞术检测活化的CD3+ T细胞增殖情况，分别以未经U87细胞培养液处理的单核细胞或活化CD3+ T淋巴细胞作为对照组。用加入抗人CCL2抗体U87-Lacz或U87-GBP1细胞培养液处理CD14+单核细胞，分别为U87-Lacz+抗CCL2培养液组和U87-GBP1+抗CCL2培养液组，采用流式细胞术分析CD14+单核细胞中MDSC比例。分别将U87-GBP1细胞和U87-Lacz细胞原位接种至BALB/c裸鼠颅内致瘤，1周后各分为CC趋化因子受体2（CCR2）抑制剂RS504393治疗组（U87-Lacz+RS裸鼠组和U87-GBP1+RS裸鼠组）和未经治疗的对照组（U87-Lacz裸鼠组和U87-GBP1裸鼠组）；30 d后处死裸鼠，分离全脑、脾脏和骨髓组织，采用苏木精-伊红（HE）染色观察裸鼠脑中移植瘤，计算移植瘤体积，采用流式细胞术检测各组织MDSC比例。结果U87-GBP1细胞中GBP1蛋白表达水平高于U87-Lacz细胞，但两组细胞体外增殖水平差异无统计学意义（P>0.05）。U87-GBP1培养液组MDSC比例高于U87-Lacz培养液组[（7.75±0.80）%比（4.50±0.08）%，P=0.003]，两组均高于对照组[（2.55±0.31）%）]（F=18.27，P=0.002）；U87-GBP1培养液组作用的活化CD3+ T淋巴细胞增殖率低于U87-Lacz培养液组[（47.38±0.08）%比（61.70±5.05）%，P=0.040]。U87-GBP1细胞中CCL2 mRNA相对表达量及其培养液中CCL2蛋白表达水平[30.66±0.17和（1 005.00±12.23）ng/L]高于U87-Lacz细胞[1.29±0.15和（111.60±11.44）ng/L]（均P<0.01），U87-Lacz+抗CCL2培养液组和U87-GBP1+抗CCL2培养液组MDSC比例分别低于U87-Lacz培养液组和U87-GBP1培养液组（均P<0.05）。U87-GBP1裸鼠组脑移植瘤体积大于U87-Lacz裸鼠组，U87-GBP1+RS裸鼠组和U87-Lacz+RS裸鼠组脑移植瘤体积较未经治疗的相应裸鼠组增长减慢，差异均有统计学意义（均P<0.05）；U87-GBP1裸鼠组脑移植瘤、脾脏和骨髓中MDSC比例高于U87-Lacz裸鼠组，U87-GBP1+RS裸鼠组和U87-Lacz+RS裸鼠组各组织MDSC比例均较未经RS504393治疗相应裸鼠组低，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论GBP1可能通过促进胶质瘤U87细胞中CCL2表达，招募MDSC，在胶质瘤微环境中集聚形成免疫抑制，进而促进胶质瘤U87细胞在体内增殖。

简介：以菊苣茎为试验材料,利用DPPH、·OH自由基和FRAP法研究菊苣茎中5种组分的抗氧化活性,并通过DPPH和Isobologram分析法研究菊苣酸、绿原酸和木犀草苷之间的相互抗氧化作用。结果表明：5种抗氧化组分对DPPH、·OH自由基的清除效果是：菊苣酸〉木犀草苷〉绿原酸〉咖啡酸〉酒石酸,对铁还原力能力的排序是：酒石酸〉咖啡酸〉木犀草苷〉绿原酸〉菊苣酸。菊苣酸与绿原酸或木犀草苷复配后,效应点均在相加线和95%置信区间的下方,且相互作用指数γ值均小于1,表明菊苣酸与绿原酸或木犀草苷复配后呈现协同抗氧化作用,且菊苣酸与木犀草苷的协同效果强于菊苣酸与绿原酸的协同效果。

简介：摘要：目的：建立HPLC法同时测定复方芩兰口服液口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷的含量。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为AgilentC18分析色谱柱(4.6mm×250mmID,5μm)，流动相A为5%甲醇(含0.5%磷酸),流动相B为甲醇,进行梯度洗脱。结果：黄芩苷、绿原酸和连翘苷苷与各自相邻峰的分离度>1.5，黄芩苷、绿原酸、连翘线性范围分别为100.9～336.2μg·mL-1,14.5～48.4μg·mL-1,7.4～24.6μg·mL-1。绿原酸、连翘苷和黄芩苷回收率分别为98.89%、99.27%和99.68%,RSD分别为1.5%、2.0%和2.0%。结论：该方法简便、准确，可同时测定复方芩兰口服液中的黄芩苷、绿原酸、连翘苷的含量。

简介：摘要丙酮酸激酶缺乏症（pyruvate kinase deficiency，PKD）是一种常染色体隐性遗传的红细胞酶病，以肤色苍白或黄疸、肝脾肿大、严重贫血为特征，治疗以长期规律性输注红细胞、脾切除为主。本文报道1例新生儿PKD，患儿生后出现极重度溶血性贫血，基因检查发现PKLR基因编码区存在2个杂合错义变异，输血治疗后好转。

简介：摘要：在完成血脂及酶类临床检验工作的过程中，能够更好地在检验结果的支撑下对患者的病情进行更加准确的判断，并且给予患者更加专业的治疗意见。然而，为了更有序地推进这项医疗工作的开展，就要在临床工作中加上对检验工作的重视，研究推动血脂和酶类检验工作效率和质量提升的方法，认真分析检验的过程，得出更准确的结论，以此来支撑各项医疗活动的开展，更加准确地把控患者病情的进度，方便完成疾病的预防和治疗。基于此，本文就从血脂及酶类临床检验实验样本的选择、检验的方法、检验结果及存在问题讨论四个层面进行论述。

简介：摘要目的通过酶类及血脂的临床检验情况来分析酶类及血脂检验对患者病情确定的推进作用。方法选取2009年3月～2013年3月在本院门诊进行酶类和血脂检验的患者120例分为3组，对其检验方法进行分析并进行了数据对比。结果酶类和血脂检验对糖尿病、冠状动脉、心血管疾病的病情提供了较为准确的数据，可以帮助医护人员确定患者的病情严重程度。结论对于酶类检验结果要综合多种情况进行最终评价；血脂检验对心血管疾病的预防有重要的帮助，对有心血管疾病的患者来说要尽量多进行空腹血脂检验。