简介：摘要目的观察脯氨酸羟化酶-2(PHD-2)对肝细胞肝癌(HCC)生物学行为的影响并探讨机制。方法应用2006年1月至2010年12月郑州大学第一附属医院HCC患者组织建立Hep3B肝癌细胞株，建立HCC裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植瘤模型，PHD-2沉默组利用瘤体内注射的方式将胆固醇修饰的PHD-2 RNA干扰(RNAi)注射入瘤体内，同时设立空白组(不做处理)和生理盐水对照组(注射生理盐水)进行对照研究，每4 d注射1次，观察并记录裸鼠的瘤体生长变化，开始注射药物后第16天处死裸鼠，采集瘤体标本用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测PHD-2、p-Smad2/3及癌基因c-Myc的表达。采用免疫组织化学技术(IHC)检测220例HCC临床标本中c-Myc的表达，分析其与PHD-2以及HCC患者临床病理特征的相关性。计数资料进行χ2检验，相关性分析采用Spearman等级相关检验。结果(1)在HCC裸鼠移植瘤模型中PHD-2沉默组裸鼠瘤体增长缓慢(F＝15.607，P<0.05)，差异有统计学意义。瘤体标本中PHD-2沉默组p-Smad2/3表达水平明显高于空白组和对照组(0.589±0.074比0.086±0.012、0.091±0.008，F＝286.537，P<0.05)，差异有统计学意义，而PHD-2沉默组c-Myc的表达水平明显低于其他两组(0.108±0.004比0.539±0.023、0.592±0.087，F＝189.468，P<0.05)，差异有统计学意义。(2)IHC技术检测220例HCC临床标本中PHD-2及c-Myc的表达，c-Myc的高表达与肿瘤体积较大、分化程度较低、TNM分期较晚、高水平的甲胎蛋白显著相关，与PHD-2的表达显著相关(r＝0.557，P<0.01)。结论PHD-2的高表达可以促进HCC细胞在体内的增殖，PHD-2促进HCC进展的作用有可能是通过抑制TGF-β1-Smad信号通路中的p-Smad2/3表达，进而上调癌基因c-Myc的表达来实现的。

简介：摘要肾性贫血是慢性肾脏病最常见的并发症，主要发病原因为体内促红细胞生成素（EPO）缺乏。低氧诱导因子（hypoxia inducible factor，HIF）可直接调控EPO基因转录表达，促进红细胞生成，其稳定性由对氧敏感的脯氨酸结构域（prolyl hydroxylase domain，PHD）的羟化状态决定。近年来，多种低氧诱导因子-脯氨酸羟化酶抑制剂（hypoxia-inducible factor-prolyl hydroxylase inhibitors，HIF-PHIs）被成功开发，并相继完成了临床试验，有望成为新一代肾性贫血治疗药物，其中罗沙司他（roxadustat，FG-4592）已在中国获准上市。本文主要综述HIF-PHIs在肾性贫血治疗中的研究进展。

简介：摘要低氧诱导因子是在缺氧或低氧时启动适应性转录反应的主要调节因子，其在常氧环境下被脯氨酸羟化酶羟基化后降解失去活性。脯氨酸羟化酶抑制剂是一种新上市的小分子口服制剂，通过抑制脯氨酸羟化酶，减少低氧诱导因子的降解，从而激活低氧诱导途径，调节包括刺激红细胞生成、铁吸收和动员、血管生成、脂质和糖代谢、炎症、能量代谢、细胞生长和分化等多种生理反应，展现出较多临床益处。近年来，脯氨酸羟化酶抑制剂在肾性贫血领域的应用已经取得了明确的疗效，并且在缺血性心脏病领域中的研究也取得了较大的进展，未来在缺血性心脏病治疗等方面有良好的应用前景。

简介：酪氨酸羟化酶(tyrosinebydroxylase，TH)是多巴胺(dopamine，DA)生物合成途径的关键酶，帕金森病(Parkinson'sdisease，PD)是由于黑质纹状体DA严重不足导致的一种神经变性疾病。综述TH主导的DA代谢调节与PD发生的相互关系，主要介绍TH结构、DA代谢的调节以及TH在PD发生发展和治疗中的作用。

简介：摘要回顾性分析2例表型不同的酪氨酸羟化酶缺乏症(THD)患儿的临床及基因突变资料。例1为重型婴儿帕金森症伴运动落后，婴儿期以全面发育落后起病，不伴肌张力障碍，症状具有波动性。例2为轻型多巴反应性肌张力不全，学龄期以进行性下肢肌张力障碍起病。基因检测发现2例患儿均携带酪氨酸羟化酶(TH)基因突变，例1为c．457C>T和c.698G>A复合杂合变异。例2为c.457C>T和c.1481C>T复合杂合变异。2例均对多巴丝肼治疗反应良好。提示对于波动性症状或波动性运动障碍的患儿，伴或不伴智力损害，均需考虑THD的可能，基因诊断尤为重要。

简介：摘要本文对TPH相关基因与自杀行为的关联研究的进展做一综述。

简介：啤酒混浊主要由混浊敏感蛋白和多酚相互作用而形成。脯氨酸特效内切蛋白酶是由黑曲霉发酵产生的一种脯氨酸专一性内切酶，能水解混浊敏感蛋白的脯氨酸而使其“失活”。通过对发酵过程主要指标的跟踪及最终发酵液质量评价，研究了该酶对啤酒酿造性能的影响；通过对不同过滤条件下（PVPP和硅胶）啤酒的非生物稳定性及抗冻性的综合比对，研究了该酶对啤酒非生物稳定性的影响。研究发现使用脯氨酸内切酶能在不影响发酵性能的前提下显著提高啤酒的非生物稳定性。

简介：摘要目的为苯丙氨酸羟化酶缺乏症患者筛选新的治疗药物。方法2019年10月至2020年10月，南京医科大学附属妇产医院医学遗传中心应用计算机针对苯丙氨酸羟化酶和药物空间结构结合力特点进行虚拟药物筛选，从美国食品药品监督管理局（FDA）药物库（包含2 697种原料药）中共筛选出10种候选老药；运用真核表达系统在分子水平上检测药物对苯丙氨酸羟化酶活性的影响，并筛选药物敏感突变体。结果10种候选老药中，盐酸奈福泮、醋酸氟轻松及利司培酮分别可增加23%［t=18.21，P<0.001，与苯丙氨酸羟化酶非药处理组（即反应体系中只加入溶剂，不加药物）相比］、21%（t=3.44，P<0.05，与苯丙氨酸羟化酶非药处理组相比）、31%（t=19.57，P<0.001，与苯丙氨酸羟化酶非药处理组相比）的苯丙氨酸羟化酶酶活，其余老药对酶活性影响较弱甚至抑制。p.D101N突变体可被利司培酮激活25%（t=15.86，P<0.001，与p.D101N突变体非药处理组相比）。结论盐酸奈福泮、醋酸氟轻松及利司培酮可作为苯丙氨酸羟化酶缺乏症的潜在治疗药物，且p.D101N突变体可作为药物敏感突变位点。

简介：脯氨酸内肽酶（Prolylendopeptidase，PEP）是一类能够特异性水解低分子质量多肽链中脯氨酸残基羧基端肽键的内切酶，与胶原蛋白的后期降解有密切关系。以淡水鱼草鱼为原料。采用硫酸铵分级沉淀。DEAE—Sephacel阴离子交换，Phenyl—Sepharose疏水层析和羟基磷灰石层析等方法从草鱼肌肉中分离纯化得到一种脯氨酸内肽酶。SDS—PAGE结果显示，草鱼PEP的分子质量为75ku。酶学性质分析表明，其最适pH为6．0，在pH5．5～7．5间有较好的稳定性。酶的最适温度为30℃，其热稳定性较差。PEP能够特异性分解肽链羧基端为脯氨酸残基的荧光底物，PEP的特异性抑制剂SUAM以及丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟对其有强烈的抑制作用。酶动力学研究表明，草鱼PEP的k为19．23μmol／L，kca为2．5s-1。肽指纹质谱分析结果表明，草鱼PEP与青锵鱼、罗非鱼、斑马鱼PEP的序列同源性分别为98-3％．96．1％和94．4％。

简介：摘要脯氨酸-丝氨酸-苏氨酸磷酸酶相互作用蛋白1 (PSTPIP1)基因突变引起的自身炎症性疾病除了经典的化脓性无菌性关节炎-坏疽性脓皮病-痤疮(PAPA)综合征以外，还包括PSTPIP1相关的髓系蛋白血症炎症(PAMI)、坏疽性脓皮病-痤疮-化脓性汗腺炎(PASH)等一组临床综合征。本文综述PSTPIP1相关的自身炎性疾病的扩展谱及其临床特征，以提高临床医师对本病的认识，早期诊断，从而改善患者的预后。

简介：摘要目的探讨奥希替尼对过表达赖氨酸羟化酶2(PLOD2)的HCC827细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其PLOD2诱导奥希替尼耐药的作用机制。方法应用LV－vector和LV－over/PLOD2慢病毒载体转染肺癌HCC827细胞，应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT－PCR)和Western blot法检测PLOD2的表达情况，应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测奥希替尼的抗细胞增殖能力，应用细胞划痕实验和Transwell实验检测肿瘤细胞的迁移和侵袭能力，应用免疫荧光法检测E－cadherin和vimentin的表达，应用Western blot法检测上皮间质转化(EMT)、FAK－PI3K/AKT和MAPK信号通路相关蛋白的表达。结果MTT检测结果显示，过表达PLOD2的HCC827－PLOD2细胞对奥希替尼的敏感性降低，半数抑制浓度>1 000 nmol/L，耐药指数>100。细胞划痕实验结果显示，HCC827－PLOD2细胞迁移的距离为HCC827－vector细胞的(2.13±0.21)倍。Transwell结果显示，HCC827－PLOD2细胞的穿膜细胞数为(212.78±10.43)个，与对照组HCC827－vector细胞[(101.32±12.52)个]比较，差异有统计学意义(P<0.01)。免疫荧光检测结果显示，与HCC827－vector细胞比较，HCC827－PLOD2细胞中E－cadherin的表达下调，vimentin的表达上调；奥希替尼可下调HCC827－vector细胞中vimentin的表达，上调E－cadherin蛋白的表达，但对HCC827－PLOD2细胞中E－cadherin和vimentin的表达无明显调控作用。Western blot结果显示，过表达PLOD2可下调E－cadherin蛋白的表达，上调vimentin蛋白的表达，奥希替尼可抑制HCC827－PLOD2细胞中磷酸化表皮生长因子受体的表达，但对PLOD2、p－FAK、p－AKT、p－ERK和vimentin等蛋白的表达无明显抑制作用，对E－cadherin蛋白的表达亦无上调作用。结论PLOD2可能通过促进EMT的表达，激活FAK－PI3K/AKT及MAPK信号通路诱导奥希替尼耐药。

简介：摘要目的探讨酪氨酸羟化酶缺陷病（THD）患儿的临床特征，从而对本病进行早期识别、优化治疗并改善预后。方法回顾性分析2018年5月至2020年5月于复旦大学附属儿科医院就诊且确诊为THD的9例患儿的临床资料，包括患儿姓名、性别、年龄、发病年龄、就诊年龄、确诊年龄、临床表现、头颅影像学、酪氨酸羟化酶基因变异、治疗随访等结果，依据Willemsen方法进行分型，总结其临床特点并进行文献复习。结果9例THD患儿中男性5例，女性4例，发病年龄为新生儿期至2岁6个月（中位年龄3个月），确诊病程为4个月至5年7个月（中位病程9个月），其中A型THD患儿6例，B型THD患儿3例；7例患儿首发症状为运动发育迟缓，其余临床表现包括运动减少8例，四肢肌张力障碍5例，躯干肌张力低4例，吞咽/构音障碍4例，动眼危象4例，震颤3例，肌强直3例，表情僵硬3例，眼睑下垂2例，过度流涎/出汗2例，昼夜波动2例，肌阵挛1例，肌张力障碍持续状态1例。7例患儿头颅磁共振成像正常，2例非特异性异常（1例髓鞘化落后，1例双侧脑室扩大、白质减少）。对患儿进行基因检测共发现8个酪氨酸羟化酶变异，分别为4个错义变异，2个移码变异，1个剪切变异，1个无义变异，其中3个变异既往未见报道［c.1505_1518dup（p.R507Afs*23）、c.1128_1138del（p.Q377Gfs*12）、c.1058A>G（p.H353R）］。所有患儿均服用多巴丝肼片，A型THD患儿起始剂量及维持剂量分别为1.7~8.3 mg·kg-¹·d-¹及4.5~20.0 mg·kg-¹·d-¹；B型THD患儿起始剂量及维持剂量分别为1.7~12.5 mg·kg-¹·d-¹及4.6~12.0 mg·kg-¹·d-¹；A型THD患儿中4例有异动症，通过下调左旋多巴剂量或延缓加量，异动症均缓解。B型THD患儿中1例有异动症，未处理自行缓解。结论THD虽临床表现多样，但1岁以内首发症状多为运动发育迟缓，临床表现以运动减少、躯干肌张力低、四肢肌张力障碍多见。推荐THD患儿（无论临床分型）在1.0~5.0 mg·kg-¹·d-¹范围内按便于分割的最小剂量起始，维持剂量可根据患儿个体化反应进行调整。本病异动症发生率不低，通过下调用药起始剂量、延缓加量速度多数可以中止。

简介：

简介：摘要17α-羟化酶缺陷症(17OHD)是由编码17α-羟化酶(P450c17酶)的CYP17A1基因突变所致肾上腺皮质激素和性激素合成障碍的一种罕见常染色体隐性遗传病。高血压、低钾血症、性发育异常等为其主要表现，由于该疾病临床表现复杂多样，患者早期症状不典型，临床上误诊率和漏诊率高。结合目前最新的研究证据，介绍17OHD的流行病学、病因和发病机制、临床表现、诊断和鉴别诊断、治疗和预后，可加深对该疾病的认识，从而更好的指导临床工作。

简介：摘要目的探索肺结核临床诊断的临床检验指标，血清脯氨酸肽酶（prolidase,PLD）。方法测定66例肺结核患者、86例非结核肺部疾病患者和48例健康体验合格者血清脯氨酸肽酶（prolidase,PLD）水平，应用受试者工作特征曲线（ROC）进行评价。结果肺结核患者组血清PLD活性水平高于非结核肺部疾病患者组和健康对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。血清PLD活性的ROC曲线下面积为0.925，血清PLD活性的最优截断点约为999U/L，灵敏度和特异度为86.4%和85.1%。结论通过ROC曲线评价，本研究认为PLD活性检测可作为结核鉴别诊断的有益补充，对鉴别肺结核和其他肺部疾病有重要的诊断意义。

简介：本文论述水分胁迫下脯氨酸的累积、累积途径和其可能的意义

简介：摘要目的观察缺氧对软骨细胞体外培养时的失分化过程的影响，探讨胶原蛋白脯氨酰4-羟化酶（collagen prolyl 4-hydroxylases，C-P4Hs）在其中的作用。方法对软骨细胞进行不同浓度的COCl2处理，筛选用于缺氧诱导的最佳COCl2浓度为100 μmol/L后，将小鼠肋软骨细胞分为：常氧组、缺氧组，分别检测第3代0.5-72 h及1、3、5、7代于72 h的各项指标。使用CCK8法及细胞计数测定增殖率，RT-qPCR、免疫荧光染色、Western blot检测各组HIF-1α、P4Hα1、P4Hα2和Col-II的动态变化。结果肋软骨细胞在不同浓度COCl2条件下培养48 h，100 μmol/L的COCl2组增殖率最高，呈典型的铺路石状；当COCl2浓度>150 μmol/L时，增殖率（P<0.05）降低。常氧与缺氧下诱导肋软骨细胞0-72 h，RT-qPCR显示缺氧组P4Hα2、ColⅡmRNA表达升高（P>0.05）。免疫荧光显示缺氧下HIF-1α与P4Hα2累积于胞核内，P4Hα2逐渐由胞核进入胞浆中。Western-blot显示缺氧组HIF-1α、P4Hα2蛋白表达（P<0.05）增高。缺氧组ColⅡ蛋白表达（P<0.05）在诱导后期增高。常氧与缺氧下培养肋软骨细胞1-7代，CCK8与细胞计数结果显示缺氧组各代细胞增值率及细胞数均增高（P<0.05），且传至6-7代时仍有增殖的潜力。RT-qPCR显示缺氧组各代细胞中P4Hα2、ColⅡ的mRNΑ均增高（P<0.05）。Western-blot显示，缺氧组各代HIF-1α、P4Hα2、ColⅡ蛋白表达（P<0.05）均增高。结论通过缺氧诱导高表达HIF-1α，从而使P4Hα2表达增高，可加速ColⅡ在软骨细胞内翻译后修饰过程，增加ColⅡ的合成和累积。缺氧条件下体外培养软骨细胞增殖率增高、失分化过程延缓可能与P4Hα2有关。

简介：摘要细胞冷冻保存应用广泛，但冷冻会损伤细胞导致代谢紊乱，而冷冻保护剂可缓解该过程。脯氨酸是一种渗透性冷冻保护剂，可快速透过细胞膜进入细胞内，与细胞内水氢键结合抑制低温下冰晶形成，同时可与细胞内水结合减少细胞内水流失，保护细胞内蛋白质的结构和功能，保护细胞膜。脯氨酸可提高植物、动物及人类体细胞冷冻复苏后存活率。在生殖细胞冷冻中，研究表明脯氨酸可用于卵母细胞冷冻，可提高小鼠卵母细胞冷冻后存活率及保护线粒体功能，但其对于精子的冷冻效果报道尚不一致。脯氨酸冷冻保护剂涉及多种细胞类型且冷冻效果较强，其未来可能更广泛应用于低温生物学领域。本文总结了脯氨酸作为天然小分子冷冻保护剂的应用研究进展，希望能够帮助人们更好地了解生殖细胞冻存的低温生物学机制，为改良生育力冷冻保存技术提供参考。

简介：

简介：摘要目的本论文探讨了慢性肝炎患者肝组织中糜酶活性与羟脯氨酸含量的相关性。方法选择40例慢性肝炎患者，行肝组织活检，按肝纤维化分期分组，肝组织中糜酶活性检测采用ELISA法，肝组织羟脯氨酸含量测定采用胃酶酸解法。结果①慢性病毒性肝炎患者肝组织中糜酶浓度升高，且纤维化分期高的（S3,S4）患者，其肝组织中糜酶浓度分别明显高于纤维化分期低的患者，有统计学意义（P<0.01）；另外，纤维化分期高的（S3+S4）患者，其肝组织中糜酶浓度明显高于纤维化分期低的（S1+S2）患者，两者之间有显著性差异（P<0.01）。②慢性肝炎患者肝组织中糜酶活性与肝组织HYP含量呈正相关性，r=0.672,P<0.01。结论慢性肝炎患者肝组织中糜酶活性与肝纤维化关系密切。