简介：

简介：上皮-间质转化（epithelial-mesenchymaltransition,EMT）指上皮组织在发生局部损伤后诱发的上皮细胞向间质细胞表型的转化。近几年,EMT被认为是受损肾脏产生肌成纤维细胞的关键,可能是导致肾间质纤维化发生的最重要的机制之一。蛋白尿是肾小球滤过功能缺陷的临床表现,是大量肾小球疾病进展至终末期肾衰竭的早期标志。

简介：背景：脂肪间充质干细胞在跟腱组织工程再生领域越来越受到重视，研究其诱导分化的有利环境（氧体积分数）尤为必要。目的：将脂肪间充质干细胞与跟腱细胞在不同氧体积分数条件下间接共培养，比较氧体积分数对脂肪间充质干细胞向跟腱细胞分化能力的影响。方法：无菌条件下获取SD大鼠跟腱细胞。SD大鼠脂肪间充质干细胞直接购买，经培养传至第1代后，与跟腱细胞一起在常氧（体积分数20%）和低氧（体积分数2%）条件下经Transwel间接共培养体系共培养。在培养7，14和21d，实时荧光定量PCR检测跟腱细胞的特异指标胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ，Tenomodulin，Thrombospondin-4，Scleraxis基因相对表达量，免疫荧光染色法检测胶原蛋白Ⅰ和Thrombospondin-4蛋白表达量。结果与结论：脂肪间充质干细胞与跟腱细胞经间接共培养后，低氧组检测到的跟腱细胞的相关特异指标在基因和蛋白水平上表达水平均高于常氧组。提示氧体积分数可显著影响脂肪间充质干细胞向跟腱细胞分化的潜能，低氧是脂肪间充质干细胞向跟腱细胞分化的有利条件之一。

简介：1问题人教版高中《生物·必修1·分子与细胞》P．118认为“就一个个体来说，各种细胞具有完全相同的遗传信息”只是“在个体发育过程中，不同细胞中遗传信息的执行情况不同”，这说明细胞分化过程中遗传物质没有发生变化。

简介：本研究观察人树突状细胞（dendriticcells，DC）来源的外泌体（DC—derivedexosome，DCex）对人骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSC）成骨分化的影响。采用超速离心法从树突状细胞培养上清中获取DCex，应用电子显微镜观察DCex形态并通过流式细胞术检测和鉴定其细胞来源。取第3代MSC，设3组培养诱导体系：①对照组：d—MEM基础培养液组；②实验组：d—MEM基础培养液＋DCex（10μg/m1）组；③α-MEM基础培养液＋标准诱导剂组。采用荧光实时定量PCR、琼脂糖凝胶电泳检测各组成骨分化转录因子Runx2mRNA的表达情况，并进行碱性磷酸酶（ALP）活性检测。另外，荧光染料DiI标记DCex，应用共聚焦显微镜观察DCex进入MSC的过程。结果显示，在电子显微镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构，直径为40—100nm，并表达DC细胞的标志物CD83，CD86，CD80和HLA—DR。在DCex处理MSC后6h时，可在共聚焦显微镜下观察到进入到MSC胞质内的DCex，随着作用时间延长，细胞荧光强度增加。按组培养第7天，DCex实验组Runx2表达较对照组增高，差异有统计学显著性（P〈0．05）；MSC培养第14天，DCex组ALP含量OD值与对应蛋白比为2．22±0．27，显著高于阴性对照组（1．20±0．21）（P〈0．01），但低于标准诱导组（3．22±0．24）（P〈0．05）。结论：DCex可以促进MSC向成骨细胞分化，其且体机制仍需讲一步研穷证实．

简介：

简介：脂肪源性干细胞因具有生物学特性稳定、来源广泛、取材方便、数量充足、易于培养扩增的优点,且在特定的诱导条件下可以分化为心肌细胞,有望成为细胞治疗的理想来源。诱导方法的选择,影响分化因素的研究已成为了细胞治疗领域研究的热点。本文就脂肪源性干细胞向心肌细胞诱导分化的方法和机制的研究进展进行综述。

简介：背景：人脐带间充质干细胞较骨髓、脂肪等来源的间充质干细胞易取材、更为原始，并不受伦理、法律的限制，是中枢神经系统损伤修复最具治疗潜力的细胞来源之一。目的：探讨重组人碱性成纤维生长因子、重组人表皮生长因子定向诱导人脐带间充质干细胞分化为神经干细胞的潜能。方法：采用碱性成纤维生长因子、表皮生长因子作为诱导剂，体外诱导人脐带间充质干细胞；在倒置显微镜下动态观察细胞形态学变化，并用免疫荧光法检测人脐带间充质干细胞向神经干细胞分化的情况，实时荧光定量PCR技术检测诱导前后神经干细胞标记蛋白巢蛋白在mRNA水平的相对表达量。结果与结论：形态学观察经诱导后的人脐带间充质干细胞呈神经干细胞球改变；免疫荧光法及实时荧光定量PCR技术均可检测到神经干细胞标记物巢蛋白，并可进一步分化表达神经元标志蛋白神经元特异性烯醇化酶、微管相关蛋白2以及神经胶质细胞蛋白、神经胶质原纤维酸性蛋白。碱性成纤维生长因子、表皮生长因子可定向诱导人脐带间充质干细胞向神经干细胞及神经元、神经胶质细胞分化。

简介：目的对表达hTERT基因的大鼠骨髓间充质干细胞（Bonemesenchymalstemcells,BMSCs）进行成瘤风险评估及类肝样细胞分化能力的鉴定.方法将表达hTERT基因的大鼠BMSCs进行裸鼠致瘤试验评估成瘤风险,通过序贯法诱导成肝分化,于诱导后观察细胞形态变化、检测ALB和AFP的表达、糖原染色鉴定糖原储备能力.结果裸鼠致瘤实验提示表达hTERT基因的大鼠BMSCs无成瘤风险.成肝诱导后,细胞形态逐渐变为圆形;ALB仅在诱导第21天部分阳性表达,AFP在诱导第14天起阳性表达;糖原染色阳性.结论表达hTERT基因的大鼠BMSCs无致瘤风险,且具有类肝样细胞的分化能力.

简介：摘要成人角膜内皮细胞失去增殖能力，损伤后无法正常再生。当CECs密度下降到一定程度时，就会引起角膜基质水肿，角膜混浊和视力下降。临床上针对角膜内皮失代偿首选角膜内皮细胞移植，但体外培养角膜内皮存在增殖过于缓慢，且易分化为间质细胞等问题，很难达到长期稳定传代的目的。越来越多研究表明，一些信号通路参与了调控角膜内皮增殖与分化的过程，通过干预这些信号通路有望获得长期稳定传代的角膜内皮细胞。本文就这些信号通路进行综述。

简介：目的探讨体外脂肪源性干细胞（ADSCs）向软骨诱导的过程中,不同浓度白细胞介素-1β（IL-1β）对ADSCs向软骨细胞分化的影响.方法体外成功分离、培养大鼠ADSCs,实验分4组（n=12）：对照组、实验A、B、C组,每组加入等量的细胞数（1×105个）,实验A、B、C组中分别加入浓度为1、2、3ng/mL的IL-1β.培养6、12、18d应用实时定量聚合酶链式反应检测各组成软骨基因（Ⅱ型胶原和糖胺聚糖蛋白）和成脂基因（脂肪酸结合蛋白）的表达量.结果ADSCs免疫化学染色结果显示CD44和CD105呈阳性表达培养6、12、18d,实验B组Ⅱ型胶原、糖胺聚糖蛋白基因表达量较对照组明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）;而实验A、C组之间及分别与对照组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.培养6、12、18d,实验A组脂肪酸结合蛋白基因表达量较对照组和实验B组明显增加,实验B组脂肪酸结合蛋白基因表达量较对照组明显减少,差异均有统计学意义（P＜0.05）;而实验C组与对照组之间比较差异无统计学意义（D＞0.05）.结论当IL-1β浓度为1、3ng/mL时,其对ADSCs向软骨细胞分化未见明显促进作用;但当IL-1β浓度为2ng/mL时,可对ADSCs的成软骨分化产生促进作用.

简介：摘要目的探讨并分析淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖及骨向分化的影响。方法体外进行人牙周膜细胞的培养，基于矿化诱导这一条件下，把第三代细胞和六个不同浓度淫羊藿苷进行互相作用，即浓度为零（对照组）、浓度为10mg/L、1mg/L、0.1mg/L、0.01mg/L、0.001mg/L，借助于BSP表达水平、噻唑蓝比色法以及ALP活性测定，就其对于人牙周膜细胞增殖与骨向分化的影响进行分析。结果作用24个小时后，不同药物浓度都可使人牙周膜细胞增殖；48小时后，淫羊藿苷在1-0.001mg/L区间，对于人牙周膜细胞增殖能力的强化较为显著，在10mg/L时影响较小；72个小时后，淫羊藿苷浓度在0.1-0.001mg/L区间时，增殖能力较为显著；作用72个小时后，浓度在1-0.001mg/L区间的组数推动人牙周膜细胞骨向分化，相对于对照组而言，所存差异具有统计学意义，即P＜0.05，而10mg/L组和对照组之间所存差异不具统计学意义，即P＞0.05。结论基于一定的浓度范围内，利用淫羊藿苷不仅可以推动人牙周膜细胞的增殖，同时还可进一步推动其骨向分化。

简介：目的以血小板内皮细胞黏附分子-1（Plateletendothelialcelladhesionmolecule-1,PECAM-1）为标志,去除小鼠胚胎干细胞（Embryonicstemcells,ESCs）中残留未分化的细胞,以去除其致瘤性,为ESCs在研究中的安全应用提供思路。方法将小鼠R1胚胎干细胞株在撤去白血病抑制因子的培养基中悬浮培养6d,体外自发分化形成类胚体,消化打散后,以PECAM-1为标志进行磁珠分选,得到阳性与阴性细胞群体,分别以2×10^6个/点注射入裸鼠背部皮下,6-8周后观察畸胎瘤形成情况,组织学分析瘤体构成。结果裸鼠背部成瘤结果显示,PECAM-1^＋细胞群注射8个点中7个成瘤,成瘤率87.5%;而PECAM-1^-细胞群注射8个点中1个成瘤,成瘤率12.5%。PECAM-1^＋细胞群与PECAM-1^-细胞群成瘤率具有统计学差异（P=0.01）。结论应用PECAM-1可去除体外分化过程中的残留未分化ESCs,并去除其致瘤性。

简介：目的探讨组蛋白赖氨酸去甲基化酶KDM5A在人牙髓细胞（hDPC）中的表达模式及成牙本质分化诱导对其表达量的影响。方法体外培养hDPC,实时荧光定量聚合酶链反应和Westernblot检测第1代至第8代（P1-P8代）hDPC中KDM5AmRNA和蛋白的表达量;免疫荧光检测KDM5A在hDPC中的分布;对P3代细胞进行成牙本质分化诱导,于第7天和第14天分别检测KDM5AmRNA和蛋白的表达水平。结果体外传代培养hDPC中可检测到KDM5A的表达,KDM5AmRNA和蛋白量均呈先增加后减少的趋势;hDPC细胞质及细胞核中均表达KDM5A;成牙本质向分化诱导7和14d,KDM5AmRNA和蛋白量高于未诱导组细胞,诱导14d表达量高于诱导7d（P〈0.05）。结论hDPC表达KDM5A,矿化诱导可提高KDM5A的表达。

简介：目的研究蒙古黄芪中的异黄酮类成分及其对成骨细胞增殖、分化的影响,为黄芪抗骨质疏松提供实验依据。方法利用柱层析法结合现代光谱技术从蒙古黄芪获得单体化合物并进行结构鉴定,采用MTT法观察化合物对成骨细胞增殖的作用,通过测定碱性磷酸酶活性评价化合物对成骨细胞分化的影响。结果从蒙古黄芪的95%乙醇提取物中获得4个异黄酮类化合物,分别鉴定为（1）芒柄花素,（2）毛蕊异黄酮,（3）芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷,（4）毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷,所有化合物均能够明显促进成骨细胞增殖及增强碱性磷酸酶活性。结论从蒙古黄芪中分离得到的异黄酮类成分能够明显促进成骨细胞增殖、分化,为黄芪抗骨质疏松活性提供了依据。

简介：“分化”是近代以来武术内容嬗变的一个重要特征。运用文献资料、比较分析等研究方法，在对武术发展的历史进行整体把握的基础上，对近代以来武术发生的分化现象进行了分析论证；并预测继续分化仍将会是今后武术发展的一个重要方向。

简介：目前从骨髓中成功分离、鉴定BMSCs的方法较为成熟。新发现一些物质能诱导BMSCs向成骨细胞分化因子，其中对BMP研究较多。其机制可能是通过结合Ⅰ、Ⅱ型BMP受体后激活Smad信号通路诱导成骨。其诱导方法主要包括直接应用天然BMP或者将BMP及其协同基因转入BMSCs，通过靶细胞的持续表达BMP促进新骨形成。本文将近10年BMP诱导BMSCs向成骨分化的研究现状及发展趋势做一综述。

简介：目的：本实验拟将分离纯化得到的滑膜间充质干细胞（synovial-derivedmesenchymalstemcells，SMSCs）在体外培养条件下进行成软骨刺激诱导，并从转录和翻译两个水平寻找进入软骨细胞分化谱系的证据，进而判断转化生长因子β3（transforminggrowthfactor-β3，TGF-β3）、骨形态发生蛋白（bonemorphogeneticprotein-2，BMP-2）和地塞米松（dexamethasone，DEX）诱导SMSCs进入软骨细胞分化谱系。方法贴壁法分离纯化得到SMSCs，在体外培养条件下用含500ng/mlBMP-2、10ng/mlTGF-β3、10-7MDEX的高糖DMEM培养基进行刺激诱导，并在倒置相差显微镜下观察分化过程中其形态学的变化，以RT-PCR检测I、II型胶原及软骨特异性Aggrecan（AGN）的mRNA表达，细胞免疫荧光化学染色的方法检测细胞分化过程中I、II型胶原的表达，碱性甲苯胺蓝细胞化学染色检测软骨特异性GAG的表达，证实SMSCs的诱导成软骨作用。结果SMSCs在前述诱导条件下，诱导后14天细胞逐渐由小梭形变为多角形、类软骨细胞样形态，RT-PCR可以检测到I、II型胶原及AGN基因的表达，细胞免疫荧光化学染色I、II型胶原、碱性甲苯胺蓝细胞化学染色结果呈阳性。而未经诱导的SMSCs形态基本保持梭形，基因表达和染色呈阴性，两组间差异显著。细胞免疫荧光化学染色分析SMSCs在软骨诱导培养基中诱导后14天表达I、II型胶原；未经诱导的SMSCs不表达I、II型胶原。说明SMSCs在软骨诱导培养基中诱导后14天进入软骨细胞分化谱系，可作为种子细胞在同样的诱导条件下向软骨分化。结论SMSCs作为新的MSCs家族成员，显示出与BMSCs相似的多向分化潜能，500ng/mlBMP-2、10ng/mlTGF-β3、10-7MDEX的高糖DMEM培养基中培养后14天，SMSCs已进入软骨细胞分化谱系。SMSCs可作为半月板组织工程的种子细胞。

简介：目的研究PI3K/AKT信号通路对人牙髓细胞（hDPC）体外增殖作用和成牙本质向分化能力的影响.方法体外培养hDPC,采用PI3K通路抑制剂LY294002（LY）处理hDPC,CCK8法检测细胞增殖情况,Westernblot蛋白印记检测PI3K/AKT通路下游蛋白AKT、磷酸化AKT（p-AKT）水平在6、12、24、48、72h的改变,检测成牙本质向分化指标DSPP的蛋白水平变化;设立空白对照组、矿化诱导组、LY组、矿化诱导＋LY组共4组,成牙本质向矿化诱导14d,茜素红染色检测矿化结节形成情况.结果CCK8结果显示,LY294002在24、48和72h可抑制hDPC的增殖（24h：Z=-0.358,P＜0.05;48h：t=11.674,P＜0.05;72h：t=10.832,P＜0.05）;Westernblot显示,LY294002抑制PI3K/AKT通路下游蛋白p-AKT活性,在24h时作用最明显,成牙本质向分化指标DSPP蛋白水平降低;茜素红染色结果显示,矿化结节的数量B组最多、C组最少.结论PI3K/AKT信号通路可促进hDPC的增殖和成牙本质向分化能力.

简介：目的：观察丹酚酸B（SalB）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肺成纤维细胞增殖及分化的影响。方法：将人胚肺成纤维细胞（MRC-5）随机分为6组：对照组（未加入TGF-β1或SalB）;1μmol/LSalB组;10μmol/LSalB组;10ng/mLTGF-β1组;TGF-β1（10ng/mL）＋1μmol/LSalB组;TGF-β1（10ng/mL）＋10μmol/LSalB组。采用MTT法观察各组细胞增殖情况;RT-PCR和Westernblot方法分别检测各组细胞α-SMAmRNA和蛋白的表达情况;免疫荧光方法检测细胞内纤维形肌动蛋白（Factin,FibrousActin）重组及观察细胞形态变化。结果：与对照组比较,TGF-β1组细胞增殖率、α-SMAmRNA和蛋白的表达水平均明显增加,细胞形态发生明显改变,胞内可见大量F-actin聚合形成的应力纤维（stressfiber）（P〈0.01）;与对照组比较,单纯加入SalB对细胞增殖、α-SMA表达、细胞形态和F-actin重组均未产生影响（P〉0.05）;与单纯TGF-β1组比较,TGF-β1＋SalB两组细胞增殖率、α-SMAmRNA和蛋白表达水平均下降,发生形态改变的细胞减少,胞内F-actin聚合形成的stressfibers减少（P〈0.05）,且10μmol/LSalB对TGF-β1抑制效应优于1μmol/LSalB,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：SalB体外能够抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞增殖和向肌纤维母细胞分化。