简介:摘要目的建立外周血白细胞、骨髓有核细胞和巨核细胞形态学分类计数的参考区间。方法选取2012年4月至2020年6月河北燕达陆道培医院参与筛查造血干细胞移植的健康供者4 221名,年龄36(3~72)岁,其中男2 520名,女1 701名。按照年龄分为4组:儿童组:≤14岁[334名,年龄11(3~14)岁];青年组:>14岁且<45岁组[2 855名,年龄33(15~44)岁];中年组:≥45岁且<60岁组[929名,年龄49(45~59)岁];老年组≥60岁[103名,年龄62(60~72)岁]。此外,同一年龄组根据不同性别分为2组。儿童组又根据造血特点将其分为儿童1组[48名,年龄6(3~7)岁]和儿童2组[286名,年龄11(8~14)岁]。按照临床血细胞形态学常规检验方法,对外周血白细胞(分类计数100个白细胞)、骨髓有核细胞(计数200个有核细胞)及巨核细胞(细胞数/4.5 cm2)进行分类计数。比较不同年龄组和同年龄不同性别组间细胞计数结果的差异,对差异有统计学意义或临床意义的不同组分别建立形态学分类计数参考区间。结果儿童与成人组之间、成人组不同性别间细胞计数结果差异均有统计学意义(均P<0.05),因此对儿童组、成人不同性别组分别建立参考区间。儿童1组外周血分叶核细胞和淋巴细胞形态学计数参考区间分别为46.65(43.97~49.32)%和44.00(10.60~65.10)%,儿童2组分别为50.73(49.50~51.96)%和39.55(38.36~40.74)%,成人组分别为57.00(39.00~75.23)%和33.00(17.00~52.00)%。儿童1组骨髓中性分叶核粒细胞、晚幼红细胞、成熟淋巴细胞形态学计数参考区间分别为11.54(10.68~12.41)%、14.20(13.19~15.21)%和23.99(22.06~25.92)%,儿童2组分别为12.50(7.00~21.50)%、15.00(9.50~25.50)%和21.02(20.24~21.81)%,成人男性组分别为13.50(7.50~21.00)%、16.50(10.50~26.00)%和15.50(7.50~26.00)%,成人女性组分别为14.50(8.00~24.50)%、14.50(9.00~23.00)%和17.50(8.50~29.00)%。儿童1组和2组粒红比参考区间均为1.86∶1(1.14∶1~3.23∶1),成人男性组为1.96∶1(1.12∶1~3.19∶1),成人女性组为2.22∶1(1.30∶1~3.69∶1)。儿童组骨髓颗粒型巨核细胞和产板型巨核细胞参考区间分别为138(25~567)、86(13~328)个/4.5 cm2,成人组分别为92(13~338)、38(3~162)个/4.5 cm2。结论建立了外周血白细胞、骨髓有核细胞和巨核细胞的形态学分类计数的参考区间,有助于提高临床血细胞形态学检验在疾病筛查、诊断和监测中的应用水平。
简介:摘要目的探讨人髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)外泌体对诱导人尿源干细胞(urine-derived stem cells,USCs)向髓核样细胞分化的作用。方法体外分离培养USCs和NPCs,提取NPCs外泌体,以Western-blot检测外泌体标记蛋白;以GFP慢病毒转染标记USCs细胞质、DAPI染料标记USCs细胞核以及PKH26染料标记NPCs外泌体;将USCs与NPCs外泌体共孵育12 h并观察摄取情况,采用NPCs外泌体和非接触共培养方法诱导USCs分化,检测各组髓核细胞标志基因mRNA的相对表达量和450 nm波长处的吸光度。结果分离的USCs具备向骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞分化的能力,高表达干细胞标志蛋白CD29(99.57%)、CD44(97.46%)、CD73(97.71%),低表达干细胞阴性蛋白CD31(0.59%)、CD45(0.19%)。分离的NPCs高表达髓核细胞标志蛋白COL2A1、ACAN、SOX-9。提取的NPCs外泌体高表达标志蛋白CD63、CD81、Tsg101。共孵育12 h后,NPCs外泌体与USCs细胞膜融合并出现在USCs细胞质中。共培养第3、5、7天时,外泌体组USCs细胞吸光度值(0.44±0.004、0.76±0.004、0.82±0.006)高于共培养组(0.39±0.022、0.63±0.035、0.69±0.012),差异有统计学意义(P<0.05)。第3、7、14、21天外泌体组USCs髓核标志基因的mRNA相对表达量分别为ACAN(1.80±0.31、3.50±0.21、5.35±0.31、7.46±0.12)、COL2A1(1.43±0.15、4.33±0.23、6.89±0.22、8.11±0.31)、SOX-9(2.21±0.13、3.13±0.11、3.96±0.14、4.52±0.26)、HIF-1α(1.45±0.16、2.14±0.21、4.31±0.41、4.01±0.25)均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);第14、21天外泌体组USCs髓核标志基因的mRNA相对表达量为ACAN(5.69±0.21、6.69±0.13)、COL2A1(6.33±0.17、7.89±0.15)、SOX-9(4.19±0.29、4.38±0.12)、HIF-1α(4.49±0.32、4.96±0.26)高于非接触共培养组ACAN(3.69±0.35、5.13±0.23)、COL2A1(3.40±0.16、6.79±0.19)、SOX-9(2.26±0.32、3.69±0.26)、HIF-1α(2.39±0.11、3.96±0.13),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论人髓核细胞外泌体在体外可诱导人尿源干细胞分化为髓核样细胞,与非接触共培养相比外泌体法具有更高的诱导效率,并可更好地保持髓核样细胞的增殖活性。
简介:摘要目的比较分析UF-1000i全自动尿沉渣分析仪和XN-1000全自动血液分析仪在脑脊液和胸腹水有核细胞计数中的应用。方法随机抽取我院2016年住院和门诊患者送检脑脊液和胸腹水标本共478例,同时采用UF-1000i尿沉渣分析仪和XN-1000血液分析仪体液模式检测有核细胞数,并用XN-1000进行白细胞分类,以手工镜检法为标准进行比较,并作统计学分析。结果UF-1000i尿沉渣分析仪对高、中、低三组标本有核细胞数检测结果与镜检法相比显著相关,r分别为0.863、0.912和0.946。XN-1000血液分析仪对三组标本有核细胞数检测结果与镜检法相比也显著相关,r分别为0.918、0.951和0.968,相关性优于UF-1000i。有核细胞分类的结果都与镜检分类法差异无统计学意义。结论使用UF-1000i尿沉渣分析仪和XN-1000全自动血液分析仪检测脑脊液和胸腹水中有核细胞数均具有可行性;但因XN-1000的相关性优于UF-1000i,且XN-1000还可用于用于有核细胞的分类,所以XN-1000的临床应用价值更大!
简介:目的探讨富集母血中胎儿有核红细胞的适宜密度梯度离心方法。方法对10例脐血分别用Percoll1090单密度梯度离法、Percoll1075与Percoll1090双密度梯度离心法、Ficoll1077单密度梯度离心法3种方法进行有核红细胞的分离,然后用适宜的密度梯度离心法分离12例10mL母血中的胎儿有核红细胞。结果(1)Percoll1090单密度梯度离法每mL脐血富集(70.58±5.67)×10^4个有核红细胞;Percoll1075与Percoll1090双密度梯度离心法每mL脐血富集(23.62±1.90)×10^4个有核红细胞;Ficoll1077单密度梯度离心法每mL脐血富集(4.53±0.26)×10^4个有核红细胞。(2)采用Percoll1090单密度梯度离法从12例10mL母血中富集到的平均有核红细胞数为12.9±5.4个。结论Percoll1090单密度梯度分离法可有效增加脐血中有核红细胞的分离数量,并从孕妇外周血中成功富集到胎儿有核红细胞。
简介:摘要目的探讨SysmexXE5000全自动血液分析仪计数外周血有核红细胞(NRBC)的临床应用价值。方法应用SysmexXE5000血液分析仪对105例外周血标本进行NRBC计数,同时对同一份外周血标本的有核红细胞采用人工显微镜镜检进行百分率计数。以镜检法作为参考标准,比较不同方法的计数结果。结果SysmexXE5000血液分析仪与人工显微镜镜检计数外周血中NRBC结果有很好的相关性(r=0.975)且两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论SysmexXE5000全自动血液分析仪能快速、准确地自动计数外周血有核红细胞,可以作为外周血有核红细胞计数的一种过筛检测方法。
简介:摘要目的对SYSMEXXN-9000全自动血液分析仪检测外周血有核红细胞(nucleatedredbloodcell,NRBC)的可靠性进行评价。方法选取本院2018年1月到2018年6月SYSMEXXN-9000全自动血液分析仪检测出NRBC>0/100个WBC的标本共324例,同时段仪器检测出NRBC为0/100个WBC的标本共100例,同时采用镜检法计数有核红细胞。结果324例NRBC阳性标本的仪器法与镜检法计数NRBC结果呈明显正相关(R2=0.9994),仪器法与镜检法计数NRBC的结果差异的95%一致性界限为(1.98±9.76)个NRBC/100个WBC,仅有7例(2.16%)在一致性界限范围外,且仪器法检测NRBC的灵敏度为99.7%,特异性为96.1%。结论SYSMEXXN-9000全自动血液分析仪检测外周血NRBC结果可靠,基本可替代镜检法检测外周血NRBC,缩短检测时间,提高工作效率。`