简介:摘要目的探究人类抗原R(HuR)对乳腺癌功能表型的影响及其对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的调控方式。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库了解HuR在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达,选取与HuR显著相关的基因进行基因本体(GO)分析及基因富集分析(GSEA)。以MCF-7和SK-BR-3细胞作为研究对象,通过瞬时转染小干扰RNA(siRNA)沉默HuR基因,利用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HuR的表达。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕、Transwell实验检测两种乳腺癌细胞系的增殖、迁移、侵袭。通过蛋白质印记法(Western blot)检测PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达。组间差异采用秩和检验、方差分析和t检验。结果HuR在肿瘤组织中的表达高于癌旁组织(3.429±0.300比3.913±0.370,Z=-15.216,P<0.01),GO和GSEA结果显示HuR相关基因主要富集于通过死亡结构域受体对外部凋亡信号传导途径的负调节、血液微粒、细胞外基质结构组分、S期激酶相关蛋白2(SKP2)和E2F信号通路及脂肪酸氧化。HuR在两株乳腺癌细胞系中沉默后,CCK-8结果显示在不同时间点,沉默HuR组细胞的增殖能力显著低于对照组(0.148±0.001比0.151±0.001比0.160±0.002比0.159±0.003,0.163±0.002比0.163±0.002比0.172±0.001比0.172±0.000,0.214±0.002比0.215±0.001比0.238±0.003比0.236±0.002;0.146±0.002比0.146±0.003比0.155±0.002比0.154±0.001,0.156±0.001比0.158±0.002比0.172±0.002比0.172±0.001,0.193±0.002比0.197±0.001比0.229±0.007比0.229±0.006,F=29.811、45.663、105.662、16.735、65.344、53.219,P<0.01)。划痕实验结果显示,实验组在24 h细胞迁移的能力显著低于空白对照组(0.038±0.020比0.067±0.025比0.223±0.047比0.167±0.035,0.082±0.040比0.140±0.027比0.318±0.023比0.254±0.041,F=20.045、30.130,P<0.01)。Transwell实验显示,实验组通过小室的MCF-7和SK-BR-3细胞数量显著低于对照组(971.000±154.049、873.333±186.100比1 939.333±11.547,1 301.333±81.132、1 152.000±109.421比2 278.000±244.461,t=7.328、8.067、8.190、9.442,P<0.01)。Western blot实验结果表明在两株细胞中,实验组的PI3K、Akt及mTOR的磷酸化水平均显著低于阴性对照组(0.560±0.015、0.738±0.011比0.968±0.030,0.866±0.003、0.788±0.030比0.970±0.021,0.843±0.009、0.832±0.014比1.003±0.009;0.862±0.011、0.855±0.020比0.981±0.020,0.754±0.083、0.821±0.024比0.939±0.083,0.708±0.038、0.687±0.027比0.936±0.049,t=30.666、18.216、9.036、14.279、20.708、22.206、10.934、11.440、5.026、3.665、10.549、11.288,P<0.01、0.05)。结论HuR可提高乳腺癌的增殖、迁移及侵袭能力,并且可通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路来促进乳腺癌增殖。
简介:摘要人类白细胞抗原-G(humanleukocyteantigen-G,HLA-G)属非经典人类白细胞抗原Ⅰ类分子,它是机体内重要的免疫调节分子,可通过多种机制诱导母胎间免疫耐受,是妊娠成功的重要条件之一。近年来大量研究表明,HLA-G在母胎免疫、自身免疫病、感染及肿瘤的发生发展中有着重要意义。本文对HLA-G与妊娠并发症的研究进展进行综述。
简介:摘要目的比较Luminex筛查法(LMX)及酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测人类白细胞抗原(HLA)抗体的检测性能,为器官移植实验室选择合理HLA抗体检测方案提供参考。方法对124例连续送检的样本同时采用单抗原微珠法(single antigen-bead assay,SAB)、ELISA及LMX方法检测,分析检测结果的差异。以SAB检测为参考方法,分析两种筛查方法的敏感性和特异性,设置P<0.05为差异有统计学意义。结果ELISA与LMX筛查方法检测HLA抗体的敏感性均较低,HLA Ⅰ类分别为34.4%和31.3%,HLA Ⅱ类分别为29.7%和51.3%,特异性均较高,HLA Ⅰ类均为98.9%,HLA Ⅱ类分别为100%和91.9%。在124例样本中,SAB(+)LMX(-)ELISA(-)的例数为17,而SAB(-)LMX(+)ELISA(+)的例数为0,提示有相当一部分筛查存在漏检的可能性。在SAB(+)ELISA(-)LMX(-)的情况中,SAB检测的中位荧光强度(MFI)值分布范围为750~7 000。结论由于两种筛查方法的敏感性均较低,对于先做筛查,检测为阳性后再进行特异性抗体检测的方案存在较大抗体漏检的风险,应给予重视,尤其对于受者有致敏史的阴性结果,应考虑采用SAB或其他检测方法给与复核。而初检时直接采用敏感性和特异更高的SAB法可提高检测的准确性,同时可以结合SAB检测的MFI值,确定是否再辅以其他检测方法来验证SAB结果。
简介:摘要目的通过对葡萄膜炎患者中HLA-B27的阳性表达检测,探讨HLA-B27的阳性表达与临床表现关系。方法采用流式细胞术对50例葡萄膜炎患者外周血进行HLA-B27抗原表达的检测,观察HLA-B27阳性与临床关系,对数据进行统计分析。结果在50例患者中,HLA-B27抗原阳性40例,阳性率80%,其中女性30例,阳性率(83.3%);男性10例,阳性率(25.0%),女性阳性率大于男性患者。性别的年龄分布无明显差异(P>0.05),临床表现单眼多见,以尘状KP,发病时视力下降明显,易复发,激素治疗效果佳。结论对葡萄膜炎患者检测HLA-B27,有助疾病诊断,女性是HLA-B27相关性葡萄炎发生的危险因素之一。
简介:系统性红斑狼疮(Systemiclupuserythematosus,SLE)是一种累及多脏器的自身免疫性炎症性结缔组织病。当肾脏受累并出现临床表现时,称为狼疮性肾炎(Lupusnephritis,LN)。SLE的全过程中约50%~80%合并LN,LN对SLE预后影响甚大,肾功能衰竭是SLE的主要死亡原因之一。SLE的病因和发病机制尚未明确,目前的研究认为其发病与遗传因素相关。在LN与遗传因素相关的研究中,又以LN与人类白细胞抗原(humanleucocyteantigen,HLA)-Ⅱ类基因相关性研究最多。现就HLA-Ⅱ类基因与LN相关性研究进展综述如下。
简介:急性非淋巴细胞白血病异基因造血干细胞移植的成功率为60%~70%。但复发后二次缓解属难治性病例,如行异基因造血干细胞移植,据文献报道成功率仅为45%左右,人类白细胞抗原(HLA)半相合异基因造血干细胞移植的成功率就更小。2007年1月,我科成功地为1例复发性急性非淋巴细胞白血病,且HLA半相合患者进行了异基因造血干细胞移植术,术后患者恢复良好,顺利出院,现报道如下。