简介:用修改了的异硫氰酸胍法从两种森林昆虫Closteraanastomosis和Saperdapopulnea的不同组织中快速提取总RNA.电泳检测和cDNA合成分析结果表明,RNA未降解.经紫外分光光度计检测,A260/A280在1.8到2.0之间,表明RNA的纯度很高.用RT-PCR合成的双链cDNA的长度大于2kb,表明mRNA的完整性.用PCR的方法克隆了C.anastomosisβ肌动蛋白和几丁质酶的基因片段,表明RNA可用于其它分子操作.使用这个方法,在4个小时内可至少从8个样品中提取RNA并进行电泳分析.这些结果表明用这个修改后的一步法提取昆虫总RNA是省时,省钱和有效的.
简介:摘要目的探讨采用ELISA一步法检测导致出现(HBsAg)钩状效应(HBsAg假阴性)的原因。方法选择我院健康体检者150例,其中,HBeAg阳性HBsAg阴性标本35例,倍比稀释标本后分别应用ELISA二步法和一步法检测HBsAg,观察两种方法的阳性率及不同稀释比与吸光度的变化。结果检测35份标本原血清结果,一步法HBsAg均为阴性,二步法均为阳性;一步法,大部分标本从原血清至17均为阴性,吸光度值OD为0.076,117稀释后OD值逐渐升高,从1126至11023吸光度变化不大(OD值3.30±0.15),12058后OD值逐渐下降;二步法从原血清到1266吸光度变化不大(OD值3.20±0.17)),1524后OD值逐渐下降。结论ELISA二步法可避免HBsAg浓度过高致钩状效应所引起的HBsAg检测结果假阴性。
简介:一步法体外扩增结合Southem杂交检测M53鼠肺支原体标准株,设计一对特异寡核苷酸引物及探针,合成、纯化、建立了特异、敏感、快速的检测手段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果显示鼠肺支原体M53株基因组DNA710bp特异谱带。对50只SD大鼠进行检测,结果PCR方法检出率高于分离培养法,扩增产物行Southemblot杂交验证,采用碱性磷酸酶标记寡核苷酸探针,可与膜上特异靶DNA序列杂交,而阴性对照无杂交信号。特异性实验检出10pg的DNA。充分说明一步法PEN,具有高度、特异、灵敏、快速等优势,适应与大、小鼠监测中应用。
简介:日本大赛尔(Daicel)化学工业公司与位于大阪的Kansai大学应用化学系合作,开发了从苯和cO制取苯酚的一步法工艺。其他的直接法制取苯酚的探索,如苯与氢和氧在钯膜反应器中制取苯酚,产率很低(低于15%)。通常,制取苯酚需要3个反应步骤。首先,苯与丙烯反应生成异丙苯;异丙苯再氧化为过氧化氢异丙苯;过氧化氢异丙苯进一步分解为苯酚和副产物丙酮。在新的工艺中,苯酚直接在空气存在下(0.5.1MPa分压)利用CO(1-1.5MPa分压)为还原剂合成。该反应发生在约90℃的含水醋酸溶液中,采用杂多酸催化剂,如磷钼钒酸。在实验室条件卞,一次通过转化率达到25%-30%,苯酚选择性达到90%。催化剂可使用5次以上再更换。
简介:摘要回顾性分析2016年8月至2019年8月本院收治的因胰头肿瘤和远端胆管癌等接受胰十二指肠切除术的140例患者的临床资料。所有患者均采用"简化一步法"Blumgart胰肠吻合技术,围手术期出现生化瘘15例(10.7%),B级胰瘘7例(5.0%),无C级胰瘘发生,临床相关胰瘘发生率为5.0%。我们认为"简化一步法"Blumgart胰肠吻合法是一种简便、安全可靠的手术方法,更适用于全腹腔镜下胰管空肠吻合。