简介：AbstractLong-term and stable preservation of bacteriophages is of crucial importance. Although many efforts have been made in the past decades to explore the influence of external factors on bacteriophage preservation, there is still little understanding, and a systematic description is lacking. In this study, we explored the influence of different factors on the preservation of lytic bacteriophage VP3, one of the typing bacteriophages of Vibrio cholerae O1 biotype El Tor, and attempted to optimize its preservation. We examined external factors, including temperature, solution, and cryoprotectant, in stable cooling/freezing conditions or alternate cooling/freezing and thawing. We found that whether in Luria-Bertani (LB) medium or SM buffer, in terms of 20-week stable cooling or freezing, -20 °C was the most damaging while 4 °C, -80 °C, and -196 °C were protective. Thirteen cycles of alternate cooling/freezing and thawing caused a loss in the survival rates of bacteriophages. The addition of cryoprotectant, glycerol (30%, w/v) or dimethyl sulfoxide (DMSO, 10%, w/v) significantly improved the survival rates of bacteriophages preserved at -20 °C. However, at 4 °C, -80 °C, and -196 °C, the cryoprotectant effect was only slightly positive or even harmful. In summary, for bacteriophage VP3, the best preservation method is to directly preserve the bacteriophage stocks in LB medium at -80 °C or -196 °C instead of storing them in SM buffer or adding cryoprotectant. Our results provided insights into the external influencing factors on bacteriophage VP3 during preservation at low temperature and can be applied to the optimization of bacteriophage preservation in the future.

简介：摘要目的探索依托泊苷(VP-16)对人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus-1, HIV-1)潜伏感染的激活作用并研究其潜在的分子机制。方法将HIV-1潜伏感染细胞系J-Lat分为二甲基亚砜(DMSO)处理组、VP-16处理组及伏立诺他(SAHA)处理组，利用流式细胞技术检测细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)阳性比例，评估高浓度VP-16对HIV-1潜伏感染的激活效率；通过流式细胞技术检测VP-16在不同作用浓度及不同作用时间下对HIV-1潜伏感染的激活效果；通过流式细胞技术检测在VP-16作用下J-Lat细胞中CD25、CD69及白介素-6(interleukin-6, IL-6)的表达情况；运用双荧光素酶报告系统检测VP-16对HIV-1长末端重复序列(long terminal repeat, LTR)转录水平的影响；使用蛋白质印迹技术(western blot, WB)检测VP-16作用下蛋白沉默信息调节因子1(silent information regulator 1, SIRT1)及核因子κB(nuclear factor κB, NF-κB)乙酰化p65的表达水平；利用慢病毒介导的靶向SIRT1短发夹RNA(SIRT1 short-hairpin RNA, SIRT1-shRNA)敲低J-Lat细胞的SIRT1表达并检测相应的激活效果。结果流式细胞技术分析结果显示，VP-16能够特异性地激活HIV-1潜伏感染细胞系J-Lat，其激活效果存在浓度依赖和时间依赖；VP-16激活HIV-1潜伏感染的同时会一定程度上调J-Lat细胞的CD25及CD69，但IL-6的表达水平无明显变化；双荧光素酶报告实验提示VP-16通过NF-κB信号通路正向调控HIV-1 LTR的转录水平；WB结果表明VP-16能够抑制SIRT1的蛋白表达并促进NF-κB p65的乙酰化水平；慢病毒SIRT1-shRNA成功敲低J-Lat细胞中SIRT1的mRNA和蛋白表达，能够有效激活HIV-1潜伏感染。结论VP-16通过抑制SIRT1表达从而上调NF-κB p65的乙酰化水平，继而促进HIV-1 LTR的转录并最终激活HIV-1的潜伏感染。

简介：

简介：  【摘要】根据学生学习文言文倒装句时碰到的实际困难，本文试图通过现代汉语一般陈述句的表达习惯与文言文倒装句式句子成分位置的对照比较，找出差异，使学生在学习文言倒装句方面找到一个突破口，达到容易理解文言文倒装句的目的。

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简介：摘要：目的：为确保来曲唑片从小试批量到商业化生产线的工艺可行性，在固体车间对实验室研究确定的处方工艺进行工艺确认（批量变更前后生产使用的设备均未发生改变），研究并确定关键工艺步骤及关键工艺参数。

简介：摘要：目的：为确保来曲唑片从小试批量到商业化生产线的工艺可行性，在固体车间对实验室研究确定的处方工艺进行工艺确认（批量变更前后生产使用的设备均未发生改变），研究并确定关键工艺步骤及关键工艺参数。

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简介：摘要：《来禽馆集》为明代著名书法家刑侗生前所撰，分诗文集编次，目前所存的刻本多达六个：明万历四十六年刻本、明崇祯十年留都书肆刻本、明崇祯十年版筑居刻本、清康熙十九年刻本、道光刻本、光绪十七年刻本。就六个刻本的关系各馆却众说纷纭，为厘清此书的版本源流，笔者将一一进行比对并梳理。

简介：摘要：诗词作为中国传统文化中的一块瑰宝，不但形象地反映了历史，真实地记录了古代劳动人民的生产生活状况，而且也可以帮助学生理解信息技术学科中“数据”这个概念。如果在历史和信息技术教学中加以恰当的引用，不仅可以帮助学生从文学角度去认识和了解历史的演进，感受历史场景的壮阔，而且有利于学生对广义的数据和信息的理解和认识。

简介：摘要：PLC技术是工业生产领域中常用技术之一。PLC技术具备适应性强、操作便捷的特点，此应用提升了工业生产的可靠性。在PLC技术支持下可全面监控机电设备及其内部所有部件，能够快捷发现故障问题，并分析出故障原因，进而精准判断故障点，可为机电设备故障问题的及时发现与处理提供保障，进而减少因设备故障带来的损失。文章从PLC功能特点及原理分析入手，进一步阐述了基于PLC的智能故障诊断技术优势，分析了利用PLC诊断机电设备故障的应用方法与实现方式，而后通过实例分析，验证了利用PLC判断机电设备故障的应用效果。

简介：摘要：积极探寻有效的教学实施方法是确保数学教学提效提质的重要保证。本文探讨了营造民主和谐教学氛围、融知识于游戏而实施、密切联系学生生活以及利用信息技术手段施教四种有效实施方法。

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