简介：无

简介：AbstractObjective:To investigate the relationship between the concentration of L-carnitine in semen and sperm parameters and investigate the epigenetic profile in sperm cell after L-carnitine usage.Methods:From February 2017 to February 2018, 46 semen samples from asthenospermic males and 41 semen samples from healthy donors were acquired. Motility parameters were assessed using computer-assisted sperm analysis (CASA, n = 78) and the DNA fragmentation index (DFI) was evaluated through flow cytometry (n = 86), %DFI = % cells outside main population. Other oxidative stress markers, such as reactive oxygen species (ROS) levels (n = 86) and the mitochondria DNA copy numbers, were detected (n = 78). The concentration of L-carnitine and acetyl-L-carnitine was detected (n = 82), and methylation was analyzed (n = 30). After that, we collected 13 fresh semen samples from asthenospermic males and 23 fresh semen samples from healthy donors. These samples were used in a freeze-thaw model that was used to determine whether adding L-carnitine could change sperm progressive motility (n = 23), apoptosis index (n = 9), and methylation analysis (n = 7). In total, we have done 13 asthenospermia samples for Western blot, and except for the poor Western result, we analyzed 6 samples for H3K9ac detection, 7 samples for H3K9m3 and H3K27m3 detection, and immunofluorescence (n = 3). Finally, we had recruited 30 volunteers, and they were given oral administration of L-carnitine for 3 months and then collected semen samples at different time points for methylation analysis.Results:The concentration of acetyl-L-carnitine is negatively correlated with the %DFI value (r2 = 0.1090; P = 0.0026), and the concentration of acetyl-L-carnitine is positively correlated with sperm forward motility (r2 = 0.0543; P = 0.0458) and ROS (r2 = 0.1854; P < 0.0001), and the acetyl-L-carnitine level is negatively correlated with %DFI in asthenospermia (r2 = 0.1701; P = 0.0066), and the level of acetyl-L-carnitine in asthenospermic semen is significantly lower than the normal group (P = 0.0419). In addition, this study indicates that adding L-carnitine significantly improved sperm motility (P = 0.0325) and reduced sperm apoptosis (P = 0.0032). Importantly, Western blotting (P = 0.0429) and immunofluorescence staining results showed that the addition of L-carnitine reduced H3K9Me3 methylation level in sperm, respectively. Furthermore, semen samples from asthenospermic patients had reduced methylation levels in a specific region (16thP= 0.0003; 17thP= 0.0016) of the brain-derived neurotrophic factor (BDNF) promoter. The 16th methylation decreased with age (r2 = 0.1564; P = 0.0306), and the 17th methylation was decreased after treatment with L-carnitine for 28 days (P = 0.0341).Conclusion:L-carnitine can reduce the %DFI and also affect the methylation of the histone modification marker in sperm as a possible epigenetic regulator.

简介：

简介：摘要目的观察甲状腺干扰物4，4-二氯二苯二氯乙烯（p，p’-DDE）处理甲状腺Nthy-ori-3-1细胞后，其LHX4和DIS3L mRNA水平及蛋白表达量的变化。方法取对数生长期Nthy-ori-3-1细胞，配制0、0.5、1.0、2.0和5.0 μg/ml p，p’-DDE溶液，按浓度梯度给药，处理Nthy-ori-3-1细胞。显微镜观察细胞生长状态、细胞形态。基因芯片检测基因表达谱变化，通过实时荧光定量PCR检测LHX4和DIS3L mRNA水平，通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测LHX4和DIS3L蛋白表达量。结果p，p’-DDE浓度为0、0.5、1.0和2.0 μg/ml时，Nthy-ori-3-1细胞均生长正常。2.0 μg/ml组细胞差异基因共33个，其中，13个基因表达下调，20个基因表达上调。与对照组比较，1.0、2.0 μg/ml组细胞LHX4、DIS3L蛋白表达水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05），1.0 μg/ml组细胞LHX4和DIS3L蛋白mRNA相对表达量降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论p，p’-DDE处理Nthy-ori-3-1细胞会影响LHX4和DIS3L蛋白表达水平。

简介：摘要目的对一圆头精子症家系的DPY19L2基因进行变异分析，明确其遗传学病因。方法应用全外显子组捕获测序及生物信息学技术对该家系基因组进行分析，Sanger测序及实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术对致病基因的变异进行验证。结果全外显子组测序分析、Sanger测序及qRT-PCR验证显示家系两患者及其母亲均存在DPY19L2基因c.384dup(p.Glu129*)杂合变异，两例患者及父亲存在覆盖DPY19L2基因全长约164.5 kb的大片段杂合缺失。结论两例圆头精子症患者DPY19L2基因c.384dup(p.Glu129*)变异及DPY19L2基因缺失是其致病原因，符合常染色体隐性遗传规律。

简介：摘要: 目的 观察正骨调脊手法[1]治疗L3错位致膝关节疼痛的疗效。方法 回顾性分析2017年4月到2020年4月在门诊运用正骨调脊手法[1]治疗L3错位致膝关节疼痛48例，观察疗效。结果 运用正骨调脊手法[1]治疗L3错位致膝关节疼痛48例，有效率达91.7%。结论 正骨调脊手法[1]治疗L3错位致膝关节疼痛48例,疗效满意。

简介：【摘要】目的 ： 探讨孕产妇 α -L- 岩藻糖苷酶的变化及意义。 方法 ： 选取我院 2019 年 60 例患者为研究对象，均分成两组，为孕产妇组和非孕产妇组。入院时为每个患者测量 α -L- 岩藻糖苷酶含量， 24 周后再为每位患者测量一次，对比两组患者在入院前后 α -L- 岩藻糖苷酶含量的变化。 结果 ： 在 24 周后，孕产妇组的 α -L- 岩藻糖苷酶含量 变化 过多，而非孕产妇的 α -L- 岩藻糖苷酶含量 变化 较少。 结论 ： 孕妇在做检查时，应先检查 α -L- 岩藻糖苷酶含量变化，再决定是否患有肝病。

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简介：摘要目的探讨原发性肝癌（肝癌）患者外周血循环肿瘤细胞（CTC）的程序性死亡-配体1（PD-L1）表达及其与肝癌患者临床病理特征的关系。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月中山大学孙逸仙纪念医院收治的30例肝癌患者临床资料。患者均签署知情同意书，符合医学伦理学规定。其中男27例，女3例；年龄29～77岁，中位年龄51岁。多重RNA原位分析检测患者外周血中CTC分型及其PD-L1表达水平，分析PD-L1表达与临床病理特征之间的相关性。相关性分析采用χ2检验或Fisher确切概率法。结果共检出CTC 275个，其中上皮型82个，间质型51个，混合型142个。混合型PD-L1平均表达水平为0.89，明显高于上皮型的0.55及间质型的0.49。混合型CTC为主型肝癌患者数量及PD-L1表达水平亦明显高于其他分型患者。PD-L1阳性的CTC分型与患者肝硬化及肝被膜侵犯相关（χ2=9.707，7.153；P<0.05）。肝癌患者平均PD-L1表达水平仅与患者饮酒史相关（P=0.042）。结论肝癌患者CTC以混合型为主，其PD-L1表达水平高于其他分型患者。PD-L1阳性的CTC分型与肝硬化及肝被膜侵犯相关，而PD-L1表达水平仅与患者饮酒史相关。

简介：摘要目的探讨计算机辅助成角双L型截骨术矫正颧骨肥大的临床效果。方法回顾性分析2014年6月至2019年4月唐都医院烧伤整形科进行颧骨截骨内推术的35例女性患者的临床资料。根据患者意愿选择手术方式，其中计算机辅助成角双L型截骨26例(计算机辅助组)，年龄(28.4 ± 6.6)岁；常规手术9例(常规手术组)，年龄(27.3 ± 4.8)岁。计算机辅助组患者行手术导板指引下成角双L型截骨，预弯钛板辅助颧骨截骨块就位，钛板、钛钉固定。常规手术组患者行L型截骨，内推后以钛板、钛钉固定。记录手术时间，观察术后并发症(骨不连、双侧不对称)发生情况，术后3个月调查患者满意度。计算机辅助组比较手术模拟与术后3个月CT的差异。对2组的手术时间进行独立样本t检验；对患者满意度和不对称发生率进行卡方检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果计算机辅助组手术时间(85.1 ± 17.8) min，常规手术组手术时间(62.2 ± 11.7) min，2组比较差异有统计学意义(t＝3.53，P＝0.020)；2组患者术后早期均未发生明显截骨块移位，也未出现明显软组织下垂，常规手术组有1例患者右侧颧骨发生骨不连，左侧颧骨骨块部分吸收。计算机辅助组不对称发生率为3.8%(1/26，不要求手术纠正)，常规手术组为33.3%(3/9，其中1例要求手术纠正)，2组比较差异有统计学意义(χ2＝6.179，P＝0.046)；计算机辅助组患者满意度为100%(26/26)，常规手术组为78%(7/9)，2组比较差异有统计学意义(χ2＝7.929，P＝0.019)；计算机辅助组患者术后CT与手术模拟CT图像显示，颧骨块的位置偏差为(0.21±0.19) mm。结论采用计算机辅助成角双L型截骨术治疗颧骨肥大，可以实现颧骨的精确截骨和截骨块的精确就位，可提高患者满意度，并可降低骨不连和双侧不对称等并发症的发生率。

简介：摘要目的了解本院HIV感染合并肾病患者载脂蛋白L1（APOL1）基因突变情况，探讨其与HIV感染患者合并肾病的相关性。方法检测8例HIV合并肾病患者肾活检组织的APOL1基因调控区和7号外显子，了解APOL1基因突变情况及其与HIV感染合并肾病的相关性。结果4例APOL1基因调控区检出A（-565）G突变，2例APOL1基因调控区检出T（-1157）C突变、G（-1024）T突变以及A（-765）C突变，3例APOL1基因7号外显子检出G496A突变、C702A突变、G732A突变、G812A突变、G1008A突变。结论本院HIV感染合并肾病患者缺乏HIVAN患者APOL1基因中的G1和G2突变，8例患者均检出其他类型突变，但这些突变与具体病理类型之间的关系仍待进一步研究。

简介：摘要目的构建肿瘤相关抗原表皮生长因子受体特异性嵌合抗原受体(EGFR-CAR)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抗体双修饰慢病毒载体表达系统。方法人PD-L1-Fc蛋白免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、亚克隆筛选高分泌PD-L1特异性抗体的稳定杂交瘤，酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测抗体特异性，流式细胞术(FACS)鉴定对PD-1配受体封阻性能，Fortebio测定抗体亲和力，抗体全长测序，经保留鼠源CRD1、CRD2和CRD3人源化改造后构建单链抗体(single-chain variable fragment，scFv)；人EGFR单克隆抗体杂交瘤系，经5′RACE技术扩增其轻链和重链可变区(VL和VH)基因，构建scFv，克隆至真核载体pcDNA3.1表达鉴定。基因合成EGFR-CAR(引入CD137协同信号胞内功能域)与PD-L1-scFv借助2A序列连接，克隆入慢病毒pLVX-EF1a-IRES-ZsGreen1表达载体，使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)共同转染293T细胞，获得包装病毒，感染293V细胞，FACS测定CAR膜表达，ELISA检测CAR感染293V细胞培养上清中PD-L1-scFv表达情况，转染激活人外周血T细胞，验证CAR膜表达。结果获得PD-L1抗体11E3，具备高度配受体封阻性能，经人源化改造后，亲和力稳定(2.67×10－10 mol/L)，EGFR-scFv获得有效表达。进一步构建了EGFR-CAR和PD-L1双修饰慢病毒分泌型CAR(CTC0537-1)及膜表达型CAR(CTC0537-2)，其病毒感染293V细胞阳性率为10%。CTZ0431-1感染293V细胞后，细胞膜表面表达EGFR-scFv，检测培养上清存在PD-L1-ScFv；CTZ0431-2感染293V细胞后，细胞膜表面EGFR-scFv和PD-L1-scFv有效表达，双表达病毒感染活化T细胞的CAR表达率为39.3%。结论成功构建了EGFR-CAR和PD-L1-scFv双表达慢病毒载体，EGFR-CAR中度结合亲和力，此为EGFR靶向和PD-L1抗体双修饰CAR-T细胞的实体瘤治疗研究提供了关键工具。

简介：摘要免疫治疗，尤其是程序性死亡受体1(PD－1)和(或)程序性死亡配体1(PD－L1)免疫检查点抑制剂，重塑了肿瘤治疗模式，在包括非小细胞肺癌(NSCLC)在内的多种肿瘤治疗中部分患者均获得了显著的临床获益。如何筛选PD－1和(或)PD－L1抑制剂潜在获益人群成为免疫治疗时代面临的新挑战。NSCLC中PD－L1蛋白表达水平与PD－1和(或)PD－L1抑制剂疗效呈正相关，是重要的预测标志物之一。明确PD－L1检测的临床意义和检测时机，在PD－L1检测步骤、结果判读和质量控制等各个环节实现PD－L1检测的规范化和标准化，对提高检测的准确性和降低室间差异具有重要意义。针对PD－L1检测的实际问题，在结合文献、专家经验和委员会成员内部讨论基础上，最终达成此共识，以期规范PD－L1检测，为临床医师提供准确可靠的治疗依据以及给予临床检测一定的指导。必须指出的是，鉴于PD－L1检测客观复杂因素的存在以及国内PD－L1检测尚处于临床应用初期，此专家共识尚存在不足之处，期待未来有更多的研究和实践数据进一步完善。

简介：摘要目的摸索程序性死亡配体1（PD-L1，22C3）浓缩抗体最佳处理条件（抗原修复时间、抗体稀释度、抗体孵育时间），稳定PD-L1检测质量，建立PD-L1实验室内部检测体系。方法以PD-L1（22C3）标准检测试剂盒的检测条件、染色结果作为参照，评分标准参照Dako公司 PD-L1 IHC 22C3 pharmDX 标准检测试剂盒的判读标准，采用Dako公司 PD-L1（22C3）浓缩抗体及EnVision Flex+/HRP检测试剂盒与PD-L1（22C3）标准检测试剂盒，检测15例肺癌、5例扁桃体及5例胎盘组织在8种不同处理条件下（B1~B8）的免疫组织化学染色结果，并比对其与PD-L1（22C3）标准检测试剂盒（A组）检测结果的一致性。结果8组不同的处理条件，B1组除弥漫强阳性表达及阴性病例（共3例）阳性肿瘤细胞的百分比与A组接近外，其余病例阳性肿瘤细胞百分比略低于A组；B7组有2例肿瘤细胞的阳性百分比明显高于A组，超出阈值范围，其余病例阳性肿瘤细胞的百分比略高于A组，但在阈值范围内；B8组结果与A组结果最接近；B2~B6组阳性肿瘤细胞的百分比均有不同程度的降低，但在阈值范围。结论PD-L1（22C3）检测条件与检测结果密切相关，为达到理想的检测效果同时节约成本，以B8组的检测条件最为合适［用Dako公司 pH6.0 抗原修复液在Dako PT Link 97 ℃修复 40 min；22C3（1∶100）室温孵育60 min；EnVision Flex+Linker室温孵育30 min；EnVision/HRP室温孵育30 min；二氨基联苯胺显色5 min］。

简介：摘要目的探究微小RNA(miR)-103a-3p/壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在卵巢癌细胞增殖和血管拟生中的作用机制及对转化生长因子-β(TGF-β)通路的影响。方法通过生物信息学分析miR-103a-3p的表达水平与卵巢癌患者总生存率间的关系。将人卵巢腺癌细胞株SKOV3细胞分为4组：对照组、miR-103a-3p mimic组、miR-103a-3p mimic＋CHI3L1组和CHI3L1组。采用定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blotting分别检测miR-103a-3p、CHI3L1 mRNA和CHI3L1蛋白的表达水平。采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中YKL-40的表达水平。采用CCK-8法、克隆形成实验和血管生成实验检测4组细胞活力、增殖能力和血管生成能力。通过双荧光素酶报告验证miR-130a-3p靶向CHI3L1。结果miR-103a-3p高表达组卵巢癌患者总体生存率高于miR-103a-3p低表达组(χ2＝6.187，P＝0.048)。对照组、miR-103a-3p mimic组、miR-103a-3p mimic＋CHI3L1组和CHI3L1组4组之间miR-103a-3p和CHI3L1 mRNA的水平差异均具有统计学意义(F＝198.254，P<0.001；F＝60.214，P<0.001)，miR-103a-3p mimic组和miR-103a-3p mimic＋CHI3L1组的miR-103a-3p水平高于对照组(均P<0.001)，CHI3L1组的CHI3L1 mRNA水平显著高于对照组(P<0.001)。4组CHI3L1蛋白的表达水平分别为2.25±0.23、1.19±0.12、2.29±0.28、4.31±0.37，差异具有统计学意义(F＝18.675，P<0.001)。4组细胞培养液中YKL-40的表达水平分别为(1.84±0.20)ng/ml、(0.95±0.08)ng/ml、(2.64±0.25)ng/ml、(6.27±0.79)ng/ml，差异具有统计学意义(F＝35.297，P<0.001)，CHI3L1组的YKL-40水平显著高于对照组(P<0.001)，miR-103a-3p mimic组的YKL-40水平低于对照组(P<0.001)，miR-103a-3p mimic＋CHI3L1组的YKL-40水平高于miR-103a-3p mimic组(P<0.001)。4组的细胞活力分别为100%±2.54%、76.23%±2.13%、104.89%±3.56%、137.42%±2.80%，差异具有统计学意义(F＝23.584，P<0.001)，miR-103a-3p mimic组的细胞活力显著低于对照组(P<0.001)，CHI3L1组显著高于对照组(P<0.001)，miR-103a-3p mimic＋CHI3L1组显著高于miR-103a-3p mimic组(P<0.001)。4组细胞的克隆形成数分别为(76.85±4.67)个、(21.56±2.85)个、(72.06±5.07)个、(169.63±9.21)个，差异具有统计学意义(F＝31.541，P<0.001)，miR-103a-3p mimic组细胞的增殖能力显著低于对照组(P<0.001)，CHI3L1组显著高于对照组(P<0.001)，miR-103a-3p mimic＋CHI3L1组显著高于miR-103a-3p mimic组(P<0.001)。4组细胞的相对管长度和管分支差异均具有统计学意义(F＝24.254，P<0.001; F＝27.564, P<0.001)。4组细胞的TGF-β和Smad水平比较差异均具有统计学意义(F＝30.254，P<0.001；F＝34.187，P<0.001)。双荧光素酶实验结果显示，与转染NC组相比较，共转染miR-103a-3p与CHI3L1-wt后细胞中荧光素酶活性显著降低。分别使用NC和miR-103a-3p与CHI3L1-mut共转染后细胞中荧光素酶活性变化不大。结论miR-103a-3p通过直接靶向抑制CHI3L1的表达，从而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖和血管生成能力，抑制卵巢癌淋巴转移和远端转移，这可能与TGF-β通路有关。

简介：摘要目的探讨焦炉工人尿酚水平与血生化指标的关系。方法于2018年4至5月，选取某焦化厂771名在岗工人为研究对象，按照是否从事苯及苯系物作业，分为苯接触组（402例）和对照组（369例）。采用自行设计的问卷调查研究对象的年龄、性别、吸烟饮酒习惯、职业史、个人疾病及家族遗传史等信息。用气相色谱-氢焰离子化检测器法检测尿酚浓度；用罗氏全自动血生化仪测定血生化指标。采用协方差和多元线性回归模型分析尿酚与血生化指标的关系。结果771名研究对象中，男性719名（93.3%），平均年龄（42.3±8.2）岁，平均工龄（20.6±8.2）年。与对照组比较，苯接触组的年龄、工龄、性别、吸烟及饮酒习惯差异有统计学意义（P<0.05）。苯接触组工人尿酚浓度为6.00（0.00，33.00）μg/ml，明显高于对照组（P<0.05）。与对照组比较，苯接触组工人的空腹血糖、总胆固醇、高密度胆固醇明显降低，血清肌酐、血清尿酸和甘油三酯均明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。自然对数转化后的尿酚水平每增加一个单位，血尿酸和胆固醇水平分别增加9.82（96%CI：2.18~17.47）μmol/L、0.10（95%CI：0.00~0.20）mmol/L。对数转换后的苯累积暴露量每增加一个单位，总胆固醇水平增加0.09（95%CI：0.01~0.17）mmol/L。结论职业性苯暴露可能与焦炉工人体内的嘌呤和总胆固醇代谢改变有关。

简介：摘要 :目的 研究血生化指标异常时 ,尿石症的发病率将有何影响。方法 对体检筛查出的 65610名无结石体检者和 8193名尿石症患者进行血生化结果的调查。结果 随着血糖、尿素氮、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、胆汁酸、球蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶等血生化指标的增高，尿石症的患病率增高，随着高密度脂蛋白、白球比增高，尿石症的患病率降低。而白蛋白低于或高于正常值时，尿石症的患病率均增加。结论 血生化指标异常时，尿石症的患病率会增高。

简介：[摘要 ]：目的 探讨 L形锁定钢板外置治疗少年儿童胫骨远端骨折围手术期护理方法。方法 对我科 2013年 11月～ 2016年 11月收治的采用胫骨远段前外侧 L形锁定钢板外置固定治疗 16例少年儿童胫骨远端近踝关节骨折患儿进行回顾整理与分析。结果 除 1例患者 1枚螺钉钉眼出现红肿渗液外，其余钉眼均干燥。术后 12～ 20周拆除锁定钢板。末次随访时按 Johner-Wruhs评分标准对患肢功能进行评价 :优 11例，良 4例，可 1例。结论 对 L形锁定钢板外置治疗少年儿童胫骨远端骨折进行有效的围手术期护理，可减少并发症和术后感染的风险，缩短住院日，利于患儿早日回归校园。

简介：【摘要】目的：药物联合308nm（SS-16L）紫外线治疗白癜风疗效观察。 方法：选取200例患者均为我院门诊确诊的白癜风患者，临床符合白癜风的诊断标准，资料完整。所有患者均口服中药并（或）配合针剂治疗。治疗6个月后进行评价及统计学分析。 结果：治疗6个月后，各种类型皮损的治疗中又以节段型，局限型及散发型效果较好，总有效率达到100%，97.5%及96.8%，肢端型次之，总有效率达到88.2%，泛发型有效率为62.5%。 结论：药物联合308nm（SS-16L）准分子激光治疗白癜风可以达到协同促进作用，加快黑素细胞的生长，促进白斑复色，缩短病程，提高临床疗效。

简介：摘要程序性死亡受体1(programmed death receptor 1，PD1)和程序性死亡配体1(programmed death ligand 1，PD-L1)是重要的负性免疫调节因子，对T细胞的活化起到抑制作用，介导了感染性疾病、自身免性疾病的发生及肿瘤细胞的免疫逃逸。近年来，针对PD1/PD-L1的单克隆抗体靶向药物在实体肿瘤治疗中均取得了较好的疗效，在肿瘤的治疗中扮演了重要角色。文章综述了PD1/PD-L1的结构功能，在自身免疫性疾病，感染性疾病和肿瘤中的作用及PD1/PD-L1抗体应用于肿瘤免疫治疗中的最新进展。