简介:以6-甲基-2-(α-羟甲基)-IH-苯并咪唑(MHMBM)作为荧光探针,利用蛋白质对MHMBM荧光增敏作用,建立了测定人血清总蛋白的新方法。结果表明,在中性水溶液中,MHMBM的荧光强度与牛蛋白(BSA)的浓度呈良好的线性关系,相关系数(r)为0.9995,检出限2.3μg/mL,线性范围4.6—60.0μg/mL。本方法用于测定两种样品溶液中的总蛋白,RSD(n=6)分别为1.7%和1.3%,回收率95.5%和98.6%。
简介:为制备可视化的转移消失蛋白(MIM)的I-BAR结构域重组体,克隆了顺联绿色荧光蛋白(GFP)探针编码序列的MIM-I-BAR基因.在6xHis标签原核表达质粒上成功构建了DNA序列.同时,实现了未标记荧光探针基因的MIM-I-BAR质粒的构建以作实验对照.成功转染至BL21(DE3)大肠杆菌细胞后,GFP偶联的MIM-I-BAR(MIM-I-BAR-GFP)蛋白表现出很强的可视荧光,该表达产物可方便的通过目测、荧光显微镜、免疫印迹和紫外可见分光光度计等多种手段进行检测.此外,在考察不同条件下的蛋白表达效率过程中发现,带有GFP探针的MIM-I-BAR重组蛋白在温度为10℃时产率最高,而并非37℃.这一特征与非荧光标记的MIM-I-BAR明显不同.研究证实该最佳表达温度条件适用于重组蛋白产品中量制备.所开发的带有荧光探针的MIM-I-BAR蛋白产品及其制备工艺在科学研究、生物医学应用以及药物开发过程中均有较高的应用价值。
简介:以1,8-萘二甲酸酐、二乙烯三胺(DETA)、N-甲基哌嗪及丙烯基氯为原料,通过酰胺化、季胺化、SN2亲核取代以及丙烯酰胺共聚合等反应,合成了水溶性1,8-萘酰亚胺高分子荧光探针。用紫外光谱、荧光光谱等手段研究它们在水、四氢呋喃和乙醇溶液中光物理化学性质,同时考察浓度和溶剂极性及取代基对荧光性能影响及对金属离子的识别作用。结果表明,此高分子荧光探针的光稳定性及荧光量子产率明显提高,随着溶剂极性增大,荧光量子产率增大,波长红移;当浓度超过8×10^-4g/mL时出现荧光浓度自猝灭;该探针在水中能对Cu^2+在392nm处进行高选择性识别。
简介:摘要目的分析探讨荧光定量PCR技术在α地中海贫血基因筛查与诊断中的实际应用。方法选择2014年1月-2014年12月之间来我院进行α地中海贫血基因筛查诊断的800例孕妇作为观察对象,使用荧光定量PCR技术进行筛查。对其中得到的阳性标本使用传统基因诊断方式测定;同时通过血红蛋白电泳法筛查800例孕妇是否存在α地中海贫血。结果800例孕妇中有13例为α地中海贫血基因携带者,检出率为1.63%;这13例的基因分型分别为13例为缺失型、0例为突变型;应用传统经检测方法对孕妇进行筛查,得到与荧光定量PCR技术相同的结果;应用血红蛋白毛细管电泳技术得到的α地中海贫血孕妇有4例,检出率为0.5%。结论应用荧光定量PCR技术对育龄期的孕妇进行α地中海贫血筛查的结果可靠,对于预防缺陷新生儿的出生具有非常重要的意义。
简介:【摘要】刺绣是中国古老的手工技艺之一,而泉州珠绣工艺的历史有百余年,经过历史的沉淀。为了让幼儿感受非遗珠绣的魅力,我们结合当前传承闽南传统优秀文化的大背景,在区域活动中积极探索闽南珠绣文化资源,通过研学参观、寻找刺绣针法、亲身体验等途径,帮助幼儿了解、感受和传承家乡的珠绣文化,对幼儿进行根的教育,培养幼儿对刺绣的热爱之情。