简介:目的:探讨菲律宾蛤仔酶解多肽的制备方法以及体外抗前列腺癌PC-3、DU-145细胞的活性。方法:以胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶4种蛋白酶为供选酶种,以酶解液中游离ANN含量和腥味值为测量指标,对酶种进行筛选,以获得最佳酶解工艺。选择分子质量3ku以下的酶解液分离纯化,所得多肽通过MTT法、AO/EB染色,做体外抗前列腺癌细胞试验。结果:胰蛋白酶酶解效果最佳,最佳酶解条件组合是pH8.0,温度50℃,酶解时间8h,加酶量1200u/g。分子质量3ku以下的酶解液能抑制PC-3、DU-145细胞生长,出现细胞凋亡的形态学改变。结论:由胰蛋白酶酶解所得多肽,在体外能抑制前列腺癌PC-3和DU-145细胞生长,诱导细胞凋亡。
简介:目的:研究鱿鱼墨多肽酸法提取工艺及不同浓度鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:以料液比、加酸量、酸解时间和酸解温度为因素.以酸解液的氨基氮含量为指标.通过正交试验确定提取鱿鱼墨多肽的酸解条件。采用CCK-8法检测其对DU-145和PC-3的生长抑制作用。采用AnnexinV—FITC/PI双标记流式细胞术检测和A0厄B双染法,观察鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的早期凋亡情况。结果:酸法提取鱿鱼墨多肽最佳组合为0.02mol/L盐酸、酸提料液比1:1、酸解时间2h、酸解温度35℃:鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞有增殖抑制作用,能诱导DU-145和PC-3细胞凋亡。结论:鱿鱼墨多肽能抑制DU-145和PC-3细胞增殖,并诱导其细胞凋亡。