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  • 简介:大豆是主要油料作物,起源于中国,在我国种质资源十分丰富。大豆孢囊线虫(SCN)(HeteroderoglycinesIchinohe)是种土传定居内寄生线虫,不易防治,常引起大豆黄萎病等病害,是大豆生产上危害最大病害之。大豆孢囊线虫病生理小种多达十几种,在我国,大豆孢囊线虫病病原主要为3、4号生理小种。大豆抗孢囊线虫研究直是世界上大豆抗病育种研究热点之。在本课题前期研究中,根据已克隆植物抗孢囊线虫病基因保守序列设计引物,对经常规鉴定为抗(感)孢囊线虫3号生理小种15大豆品种基因组DNA进行PCR扩增,在大豆抗病品种中获得条大豆抗孢囊线虫特异条带。本研究在此基础上利用该对引物,对高抗孢囊线虫3号小种北京小黑豆基因组DNA进行扩增,并克隆了特异扩增片段,命名为RSCN3,经测序及BLAST分析,发现DNA序列与GenBank、EMBL、DDBJ、PDB中大豆似受体激酶RHG4、水稻TMK(leucinerichprotein,receptor-likekinase)基因等均有80%以上同源。根据该DNA序列推测氨基酸序列,在其序列中共找到21亮氨酸,将该序列与蛋白质序列同源进行比较,结果发现与植物中受体激酶、富含亮氨酸重复蛋白激酶有较高同源。因此推测RSCN3克隆片断为与受体激酶有类似作用抗病相关基因RGA,并将该序列登录到GenBank中,登录号为:AY580161。

  • 标签: 大豆 孢囊线虫 抗病基因同源序列 基因克隆
  • 简介:本研究以普通小麦品种‘中国春’染色体组DNA为封阻,用生物素(biotin-16-dUTP)标记大麦染色体组DNA作为探针,通过基因组原位杂交法解析了来自杂交组合CS×(CS+Betzes2H)杂种后代X99-13遗传组成,此材料含有42条染色体,其中1条大麦染色体,2条小麦-大麦易位染色体和39条小麦染色体,鉴定为小麦-大麦代换易位系。以小麦第二部分同源群短臂探针psr131进行RFLP分析,结果表明此代换易位系是涉及小麦染色体2B和大麦染色体2H代换易位。为进步选育小麦-大麦2H纯合易位系及利用α-淀粉酶抑制蛋白基因打下了坚实物质基础。

  • 标签: 小麦 大麦 代换易位系 GISH RFLP
  • 简介:葡萄浆果颜色是由花色素苷量来决定,UFGT控制花色素苷合成,Myb相关基因通过时空表达调节UFGT,从而使花色素苷在葡萄发育不同阶段和不同部位表达。不同葡萄品种调节花色素苷合成强度和模式差异造成了有色葡萄品种果皮有多种颜色,白色葡萄品种果皮是由于没有花色素苷合成。Myb相关基因家族主要有八成员,其中MybA种类VlmybA1-1,VlmybA1-2和VlmybA2以及MybB种类VlmybB1-1和VlmybB1-2得到了较深入研究。

  • 标签: 葡萄 花色素苷 MYB UFGT 色素形成
  • 简介:巨胚米富含γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyricacid,GABA)具有缓解和预防血压上升功效。本研究对江苏地方巨胚种质10217巨胚基因进行了克隆,发现GE基因编码区有三位点发生突变,第1090碱基由C突变为G;第1302碱基由T突变为G;第1467碱基由G突变为A,提前形成终止密码子TGA。10217中ge基因是ge等位基因。本研究根据ge基因突变位点设计了对共显性CAPS标记GE-2,对10217/日本晴F2分离群体进行分析后,证实GE基因突变导致了10217巨胚表型。本研究开发GE-2标记能区分GEGE、GEge和gege三种基因型,可直接用于ge基因分子标记辅助选择育种和基因聚合育种。

  • 标签: 水稻 巨胚基因 分子标记
  • 简介:利用甘蓝型油菜与播娘蒿融合杂种中不育株与甘蓝型油菜杂交、回交,得到细胞质雄性不育系NJ65A。根据pol和nap雄性不育高度相关基因orf224和orf222设计兼并引物,从NJ65A植株中克隆得到长度为675bp基因,命名为orf224-NJ65A。该基因编码224氨基酸,氨基酸序列与orf224、orf222和orf220序列相似分别为:70%、53%、60%。RT—PCR表达分析表明:orf224-NJ65A在所检测组织中都有表达,但在花、花蕾和茎中表达量较大。推测orf224-NJ65A与细胞质雄性不育有关。

  • 标签: 甘蓝型油菜 雄性不育 克隆 表达
  • 简介:杂种不育是繁殖隔离种主要形式,数年来,尽管繁殖隔离在广泛生物体体进化生物学中已经成为关键问题,但仅有几个基因在繁殖隔离中被鉴定。亚洲种分为两亚种,籼稻(indica)和精稻(japonica)。这两亚种杂交种通常为高度不育,水稻胚特殊种群具有广泛亲和,与籼稻和精稻进行回交时能产生高度育杂交种。在本研究中,我们利用图位克隆方法,

  • 标签: 繁殖障碍 杂交种 亲和性 籼稻 调控因子 杂种不育性
  • 简介:针对浆旱生植物霸王富含酚和多糖类物质特点,在常规异硫氰酸胍方法基础上进行改进,摸索出种霸王叶和根总RNA提取方法。本方法主要通过在提取缓冲液中加入4%β-巯基乙醇以去除酚物质干扰;用2mol/L醋酸钠(pH4.0)、水饱和酚和氯仿:异戊醇(24:1)抽提以去除多糖和蛋白物质。采用该方法提取霸王总RNA纯度、完整好,电泳条带清晰,OD260/OD280值在1.8~2.0之间,质量完全可以满足进步分子生物学研究要求。

  • 标签: 霸王 多酚 多糖 改进的异硫氰酸胍法 RNA提取
  • 简介:为了更好地在荔枝杂交育种中判别真杂种,以荔枝两个人工杂交群体‘雪怀子’ב桂味’和‘雪怀子’ב焦核三月红’F,代为材料,利用EST.SSR标记进行真假杂种鉴定,创建作图群体,并对两群体进行遗传多样分析。结果表明,分别采用4对引物组合即可实现对两杂交群体F。代单株100%鉴定,两群体159单株均为真杂种;且两群体后代叶片形态存在变异,基因型上产生了不同于亲本扩增谱带。经聚类分析发现,群体‘雪怀子’ב桂味’113F1单株被聚为6大类(相似系数0.68),63.72%(72株)后代与父本聚为类,28.3%(32株)单株与双亲距离较远,推测这些单株中出现了较大遗传重组或变异。在相似系数0.642处,‘雪怀子’ב焦核三月红’组合46株杂种后代分为两大类,该组合大部分单株(60.87%)与母本亲缘关系较近,具有偏母本遗传倾向。可见,EST.SSR标记适合荔枝真假杂种鉴定,两F1作图群体创建为荔枝遗传连锁图谱构建奠定基础,同时为荔枝品种改良积累材料。

  • 标签: 荔枝 杂种群体鉴定 EST—SSR 遗传多样性
  • 简介:应用AFLP、SRAP、RAPD、SSR及同工酶等5种标记构建326标记位点白菜遗传图谱和81DH株系群体,采用MapQTL5软件与MQM作图法对白菜叶片数与单株进行QTL定位及遗传效应分析。结果表明,通过两不同年份试验,在10连锁群上共检测到20QTL,主要分布在R5、R9连锁群上:控制叶片数有5,控制单株有15;其中,获得两年稳定表达QTL共6:控制叶片数有1,控制单株有5;另外,估算了单个QTL遗传贡献和加性效应,发现各QTL加性效应各不相等,各位点遗传贡献介于9.4%~39.6%之间;控制叶片数和控制单株QTL位点表现为紧密连锁或相似的位置,主要集中在R5连锁群上,这与二者性状表型值相关系数很高相致。这将为白菜品种改良中产量等性状分子标记辅助选择提供理论依据。

  • 标签: 大白菜 DH群体 白菜叶片数 单株重 QTL
  • 简介:用超级杂交稻协优9308母本协青早A保持系协青早B和父本恢复系中恢9308杂交,以单粒传方法建立含281株系重组自交系(RIL)群体。选用695对简单重复序列(SS鼬引物进行亲本多态筛选,共有186对检测到多态,频率为26.8%。构建成水稻分子遗传图谱共包含163标记座位,总图距约1578.9cM,覆盖整个基因组87.5%,标记间平均图距为9.69cM。群体和标记中母本等位基因频率平均为0.52,群体中标记偏分离情况较严重。该图谱构建为研究超级杂交稻协优9308各种性状遗传规律及QTL定位打下了基础。

  • 标签: 超级杂交稻 重组自交系 遗传图谱
  • 简介:为了找出差异基因用于油酸油菜育种,对两油酸含量不同油酸油菜材料(油酸含量分别为84.4%和56.2%)成熟期种子进行转录组分析和实时荧光定量PCR分析。IlluminaHiseq,M2000测序得到8.09Gbcleanreads,组成52361unigene,平均长度为659bp。比对公共数据库得到48911f93.41%)氨基酸序列。鉴定出6414油酸油菜和低油酸油菜中差异显著基因,这些基因有1296油酸油菜中上调表达(20.21%),5118下调表达(79.79%),共有2043差异基因在119代谢通路中富集表达。将其中14与脂肪酸代谢和光合作用相关基因进行荧光定量PCR验证。Bna0799930,Bna0104450和Bna0305890在油酸油菜中上调表达,其余下调表达。Bna0501620,Bna0391450和Bna0084310在油酸油菜中表达量超过低油酸油菜中表达量2倍以上,分别为4.48倍,4.21倍和2.26倍。这些新发现差异基因可用于油酸油菜分子育种研究。

  • 标签: 高油酸油菜 转录组 定量PCR
  • 简介:干旱应答元件结合蛋白(dehydrationresponsiveelementbindingprotein,DREB),在植物应对干旱、盐碱和低温胁迫反应中起非常重要调控作用。利用已知甘蔗栽培种DREB2转录因子序列,设计引物,按照同源克隆方法,获得了2割手密DREB2基因组DNA序列,分别命名为SsDREB2-a和SsDREB2-f(GenBank登录号分别为:KU963272和KU963277)。序列分析结果表明,SsDREB2-a基因序列全长为1578bp,SsDREB2-f基因序列全长为1729bp,2基因均包含1内含子和2外显子。SsDREB2-a和SsDREB2-f基因cDNA序列全长分别为824bp和971bp,均编码262氨基酸。序列比对分析显示,2基因序列相似为96.6%,编码蛋白相似为98.9%,存在3氨基酸变异位点。系统进化分析结果显示,割手密DREB2转录因子与高粱、牛鞭草、斑茅、玉米等植物DREB2转录因子同源关系最近。基因获得为下步了解DREB2基因表达与割手密抵御非生物胁迫能力之间关系奠定了基础。

  • 标签: 割手密 DREB2 基因克隆 比较分析
  • 简介:本研究拟采用香蕉芽体薄片为转化受体材料,建立起根癌农杆菌介导香蕉遗传转化体系。以巴西蕉组培苗球茎横切薄片为起始材料,诱导获得多芽体,利用芽体薄片为受体,通过对潮霉素敏感性和GUS基因瞬时表达试验,以期找到适合遗传转化条件。结果表明:巴西蕉球茎横切薄片在芽体诱导培养基(MS+6-BA10mg/L+PP3331mg/L+NAA0.21mg/L)上,经过4至5培养,形成了花椰菜结构芽体。巴西蕉芽体横切薄片对潮霉素敏感,最佳潮霉素素筛选浓度是25mg/L,转化最佳共培时间为4d。本研究从3次转化中共300薄片中获得抗性芽18,经GUS检测和PCR鉴定,获得抗性芽全部为阳性。本研究建立芽体薄片为转化受体转化体系,为今后将具有重要经济性状基因导入香蕉提供了技术参考。

  • 标签: 香蕉 遗传转化 多芽体
  • 简介:植物14-3-3蛋白(GF14蛋白)是类参与调节植物生命活动过程小分子蛋白。本研究根据羊茅转录组学测序获得FaGF14-A和FaGF14-D基因片段,利用RACE技术得到羊茅FaGF14-A和FaGF14-D基因3’和5’cDNA序列,拼接后FaGF14-A基因全长为1153bp,编码260氨基酸;FaGF14-D基因全长为1291bp,编码266氨基酸。生物信息学分析结果表明羊茅FaGF14-A和FaGF14-D蛋白都具有典型14-3-3蛋白结构域,包含9保守琢-螺旋及不保守N-末端和C-末端,尤其与禾本科植物GF14蛋白具有较高相似,位于同进化支上,亲缘关系较近。

  • 标签: 高羊茅 FaGF14-A FaGF14-D 克隆 分析
  • 简介:为探索菜用甘薯抗寒机理,以‘宁菜3号’、‘CH-2’、‘福薯18’、‘福薯10号’4菜用甘薯品种为试验材料,采用温室越冬和人工气候室模拟低温胁迫方法,对菜用甘薯抗寒与POD、SOD活性及可溶性蛋白质含量间关系进行了研究。结果表明:受低温胁迫后,‘宁菜3号’、‘CH-2’POD活性增加速度快、活性强、酶活力持久,SOD活性,SOD活性及可溶性蛋白质含量下降幅度相对较小。在低温胁迫后,POD、SOD活性变化及可溶性蛋白质含量不同可能是引起菜用甘薯抗寒差异原因之。本研究对菜用甘薯栽培品种选择具有指导意义,为进步探索菜用甘薯抗寒机理提供参考。

  • 标签: 菜用甘薯 越冬存活率 低温胁迫 POD活性 SOD活性
  • 简介:本研究以4新疆野苹果优系为试材,采用绚丽海棠花粉对进行控制授粉,研究绚丽海棠花粉对果实品质(套袋条件下)影响。结果表明:与自然授粉相比,绚丽海棠花粉授粉果实单果质量、果实纵径、果实横径、果形指数和果实酸度有升高趋势,可溶性固形物含量和果柄长度有降低趋势,部分优系间差异达到显著水平(p〈0.05),果柄粗度变化趋势不致;在控制授粉和自然授粉条件下,参试4新疆野苹果优系果实香气成分均以醛类和醇类为主,但控制授粉对相对含量影响存在差异,优系N-1在绚丽海棠花粉授粉条件下,醛类相对含量有明显升高,而醇类相对含量未出现明显变化,优系N-2和N-3在绚丽海棠花粉授粉条件下,均表现为醛类相对含量明显降低,醇类相对含量明显升高,优系N-4醛类和醇类相对含量受绚丽海棠花粉影响较小;绚丽海棠授粉对4新疆野苹果优系醛类、醇类、酸类和酯类种类及各组分所占比重有明显影响。绚丽海棠花粉授粉对4新疆野苹果优系果实品质有明显影响,但对果实香气成分影响未表现出规律

  • 标签: 新疆野苹果 花粉直感 果实品质 香气成分
  • 简介:采用YC4和YC9组合群体,该组合在F4代通过分子测定基因型分别为Aabb、aaBb和AaBb杂合型。通过近红外检测技术检测,YC4组合中高油酸类型表型频率为NIR值低于80%占19.77%,高于80%占80.23%。YC9组合中高油酸类型表型频率为NIR值低于80%占28.35%,高于80%占71.65%。考种结果表明,筛选紫色种皮油酸花生且产量高于‘冀花5号’花生品种50%以上材料,YC4组合群体共筛选到材料69株,中果类型50株,大果类型19株。中果类型中荚果形状多为普通型,果嘴形状多为中等或明显;大果类型中荚果形状也多为普通型,果嘴形状多为中等或明显;YC9组合群体共筛选到19株材料,中果类型13株,大果类型6株。中果类型中荚果形状多为普通型,果嘴形状多为中等或明显;大果类型中荚果形状多为普通型或茧型,果嘴形状多为中等或非常明显。通过继代选择,获得3紫色种皮油酸新品系ZG-4-19-5-3、ZG-4-20-18-1和ZG-9-15-9-5,油酸NIR值分别为86.92%、85.77%和88.14%,分子鉴定结果与其表型致。该批新种质材料创制不仅提高了油酸花生医疗保健价值,同时对中国油酸花生种质资源丰富及品质育种具有重要意义。

  • 标签: 花生 紫色种皮 高油酸 荚果性状
  • 简介:解析穗粒数、小穗数和粒重及其QTLs间遗传关联,有利于大麦穗发育遗传和标记辅助选择研究。本研究采用SPSS19.0软件分析了25份试验材料小穗数、千粒和穗粒数表型差异,以及不同性状及其QTLs间遗传关联。结果表明小穗数等3性状具有显著或极显著差异,育种品种小穗数和穗粒数与地方品种没有明显差异,大多数育成品种千粒显著或极显著高于地方品种,二棱大麦小穗数、穗粒数和千粒没有显著差异,但六棱大麦具有显著或极显著差异;小穗数与穗粒数极显著正相关,偏相关系数为0.835;在试验材料中共检测到4小穗数QTLs、6穗粒数QTL和6千粒遗QTLs,16QTLs分别位于1H、2H和4H等6条染色体上,其中QSn-4HS等8QTLs具有增效作用、其余QTLs具有减效作用。与标记HVM40-258bp连锁QTL对小穗数和穗粒数具有效特性。小穗数等3穗部性状分别受遗传效应不同QTLs控制,QTL导致了小穗数与穗粒数关联遗传。

  • 标签: 大麦品种(或品系) 穗部性状差异 SSR标记 关联分析 QTLs检测
  • 简介:对香蕉束顶病毒(BBTV)广州分离物MGHDNA组分6全序列进行了克隆及序列分析。并对来自广州、海南、台湾、澳大利亚及印度BBTV组分6进行了分析,结果表明:BBTV组分6都含有CR-SL(stem-loopcommonregions),CR-M(majorcommonregions)结构等典型特征序列。BBTV组分6核苷酸全序列、开放阅读框(ORF)核苷酸、CR-M核苷酸序列及其氨基酸序列系统进化树结果显示,BBTV分离物可分为2组群:亚洲组和南太平洋组。CR-M结构在2组群间有明显差异,南太平洋组分离物CR-M结构中有段不完全保守16核苷酸重复序列,而在亚洲组分离物中这个序列并不重复。对BBTV组分6蛋白质进行了二级结构预测和理化性质分析发现,这2类群蛋白质二级结构有差异,但是理化性质无明显差异。

  • 标签: 香蕉束顶病毒 DNA组分6 克隆 分离物