简介:目的检测不同年龄大鼠下丘α-氨基羟甲基恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole—propionicacid,AMPA)受体亚型GluR2/3(Glutmaterecptor2/3)的分布及其与听性脑干反应(auditorybrainstemresponse,ABR)的关系。方法分别测定1,4,9,15周龄SD大鼠ABR反应阈;FITC标记免疫组化方法检测GluR2/3亚型在不同周龄SD大鼠下丘中的分布。结果1周龄SD大鼠检测不到明显的ABR波形.4周龄起能检测到稳定的ABR波形。GluR2/3在不同年龄大鼠下丘神经元中均有表达。1周龄大鼠染色较少,位于胞膜;4周龄时表达强,主要位于胞膜;9周龄时较弱,位于胞膜及胞质;15周龄时可见于胞膜及核周胞质,但胞质较强。4周龄与1、9、15周龄胞膜相比,GluR2/3亚型的表达较强,差异有显著性;1周与9周、15周龄胞膜之间.GluR2/3的表达较弱,差异无显著性。结论出生后GluR2/3在下丘的含量及分布部位均随年龄变化而变化.这种改变可能与下丘的发育相关。
简介:《喉科手术学》2000年出版,2002年第2次印刷。近十年间随着医学技术飞跃发展,喉科手术也在不断更新及创新。为了适应新的形式,人民卫生出版社于2007年出版了《喉科手术学》第2版。此版主要围绕有关保留、改菩喉功能的理论,特别是新发展的手术为主要增修内容,增加了与保留和改善喉功能研究发展相关的喉及喉咽的解剖及生理:增补了保留或改善喉功能的手术、喉显微手术、喉咽癌激光手术、喉返神经单、双侧麻痹及喉手术后喉功能不良新发展的喉功能整复术、喉误吸手术、喉蹼切除术、喉肉芽肿切除术、杓状软骨脱位、骨折和固定的整复术:补充了喉气管狭窄,喉、喉咽和颈食管癌等新的手术方法;充实了甲状腺肿瘤手术,颈淋巴结清扫术内容,
简介:TheGJB2gene(connexin26)hasbeenshowntoberesponsibleforDFNB1andDFNA3.WescreenedtheGJB2genein488patientswithprelingualdeafness(Group1),124withpostlingualdeafness(Group2),and117normalhearingsubjects(Group3).Wefoundthat,inGroup1,65patients(13.32%)werehomozygotesorcompoundheterozygotesand51patients(10.45%)carriedasinglepathogenicmutation.The235delCmutationwasthemostfrequentmutation,accountingfor73.22%oftheknownpathogenicallelesinGroup1.NohomozygotesorcompoundheterozygotesweredetectedinGroup2orGroup3.Somepostlingualdeafpatients(2.42%)andnormalhearingsubjects(4.27%)were235delCcarriers.Ourpreliminarydataindicatethat235delC,themostfrequentmutationidentifiedinthisstudy,isamajorcauseforprelingualdeafness.
简介:ObjectiveToestablishalymphocytelinecapableoflongsurvivalandexpressinghumanNT-3tolayafoundationforfutureanimalandhumancochleargenetransfectionresearch.MethodsWecollectedlymphocytesfromnormalhumanbloodviaFicollfluidandaddedIL-2intotheserumculturemediumtopromotelymphocytegrowth.TheNT3cDNAwasobtainedbyRT-PCRandligatedwiththeeukaryonvectorwhichispIRES-DsRed2usingT4DNAenzyme.TheNT3cDNAgenewastransfectedintothelymphocytelineusingcationicliposome(LP2000).ThelymphocytestransfectedwithNT3-cDNAwereexaminedbyRT-PCRandWestern-blotmethods.ResultsWeestablishedanewmethodtoextendinvitrolymphocytessurvivaltimeandtotransfectNT3intolymphocytes.Thegeneticallyengineeredlymphocyteswerecapableofsurvivingoverrelativelylongtime.PositiveproteinsignalswereobtainedbyWesternblot.ConclusionsUsinglymphocytesastheintermediary,recombinedplasmidpIRES-DsRed2NT3isusedtoestablishalymphocytelinethatexpressesandsecretesNT3.Thiscelllinecanbeusedinfutureanimalgenecochleartransfectionresearchandmayhelpfindanintermediarycelllineforgenetherapyforhumandeafness.
简介:目的构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因(pEGFP)的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2,并将其与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒。对重组腺病毒进行扩增、纯化及滴度测定,用聚合酶链反应和测序方法验证穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2穿梭质粒的构建;通过荧光显微镜和Westernblot(蛋白质印迹)方法,分别检测质粒pDC315-GFP-E2F2和重组腺病毒表达E2F2蛋白情况。结果经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2与设计一致;经荧光显微镜检测,分别由穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2、重组腺病毒转染的HEK293细胞均可观察到GFP表达;经WesternBlot检测出在72kDa~95kDa处有条特征带,其大小和E2F2-GFP融合蛋白(~76kDa)相吻合;滴度测定为1×1011PFU/ml(PFU,plaqueformingunit,空斑形成单位)。结论成功构建了人E2F2基因重组腺病毒载体,并能在HEK293细胞中表达。
简介:目的对云南3所特殊教育学校聋生人群进行系统性的耳聋临床资料分析,为开展耳聋基因的分子流行病学研究提供参考依据。方法了解聋生详细的耳聋病史;进行全身及耳鼻咽喉常规检查;进行纯音听阂测试及声导抗测试,了解聋生双耳听功能和中耳功能状况。结果聋生耳聋前有耳毒性药物用药史者占8.2%,有家族史者占19.5%,综合征性耳聋占5.3%,耳聋病因不明者亦占较大比例;汉族与非汉族聋生在综合征性耳聋和聋前用药史方面无显著差异,汉族聋生有家族史的比例高于非汉族聋生。结论云南省聋生可能的致聋原因有遗传性聋、药物性聋,但大部分聋生病因不明,尚需借助分子生物学理论和技术,从基因水平进行耳聋病因学的深入研究。。
简介:目的考察3~5岁听障儿童的气质特点及其影响因素,为康复训练提供参考依据。方法选取111名3~5岁听障儿童,采用3~7岁儿童气质问卷施测。结果3~5岁听障儿童在气质各维度上的表现倾向不同(P〈0.05),适应度维度得分最高,其次为趋避性、心境、注意分散度和规律性,注意力持久性和反应阂得分最低。儿童性别、主要照顾人及其受教育水平、职业、家庭结构对听障儿童气质的多个维度具有显著影响(P〈0.05),主要表现在反应强度、注意力持久性、规律性、注意分散度、活动量、心境和适应度维度;助听设备和康复时间对听障儿童气质特点影响不明显(P〉0.05)。结论3~5岁听障儿童的气质受家庭、社会环境等多方面因素影响,但在具体特征上有其独特性。
简介:目的考察3-6岁听障儿童语言功能发展的特点。方法利用《听障儿童语言功能评估》对202例3-6岁听障儿童进行跟踪评估,分别在基线期、6个月后、12个月后进行测试;对3次评估结果进行比较,分析不同年龄组之间的差异,并将听障儿童评估分数与健听儿童参考值对比。结果听障儿童的各项语言功能随时间推移极显著提高(P=0.000〈0.01);听障儿童年龄越大,语言功能越强,年龄组之间存在显著差异(P〈0.05);所有年龄段听障儿童基线评估得分均低于3岁健听儿童期望值,康复12个月后,3、4岁听障儿童达到同龄健听儿童期望值,5、6岁听障儿童和同龄健听儿童仍有差距。结论听障儿童的语言功能和健听儿童存在差距,但经过康复可有较大提升,且干预年龄越小,提升速度越快。
简介:WehavedeliveredviralvectorscontainingeitherChop2fusedwithGFP,Channelrhodopsin-2(ChR2),orHalorhodopsin(HaloR)fusedwithmCherry(toformlightgatedcationchannelsorchloridepumps,respectively),intothedorsalcochlearnucleus(DCN).OnetoeighteenmonthslaterweexaminedtheCNandinferiorcolliculus(IC)forevidenceofvirallytransfectedcellsandprocesses.ProductionofChR2andHaloRwasobservedthroughouttheDCN.Rhodopsinlocalizationwithinneuronswasdetermined,withelongate,fusiformandgiantcellsidentifiedbasedonmorphologyandlocationwithintheDCN.ProductionofChR2andHaloRwasfoundatboththeinjectionsiteaswellasinregionsprojectingtoandfromtheDCN.LightdrivenneuronalactivityintheDCNwasdependentuponthewavelengthandintensityofthelight,withonlytheappropriatewavelengthresultinginactivationandhigherintensitylightresultinginmoreneuronalactivity.Transfectingcellsviaviraldeliveryofrhodopsinscanbeusefulasatracttracerandasaneuronalmarkertodelineatepathways.Inthefuturerhodopsindeliveryandactivationmaybedevelopedasanalternativetoelectricalstimulationofneurons.
简介:1耳科常用激光激光是继原子能、计算机以及半导体之后,人类的又一重大发明。因其前所未有的高能量、高精确性等特点,激光自发明伊始即被广泛应用于包括临床医学在内的各个领域。在耳科学领域,空间狭小、组织功能脆弱等特征使得耳科手术始终充满了挑战。近年来,随着显微设备、激光设备及手术技术的不断进步,激光技术在耳科学的应用日趋普及并取得了巨大的成功。